La differenza di microRNA e cellule tumorali circolanti nel sangue tra pazienti oncologici con immunoterapia

Tra i biomarcatori attualmente importanti, le cellule tumorali circolanti e il microRNA (miRNA) hanno ricevuto un'attenzione significativa. Quest'ultimo, tradotto anche come acido ribonucleico micro, è una molecola di acido ribonucleico (RNA) ampiamente presente negli eucarioti, lunga circa 21-23 nucleotidi, che regola l'espressione di altri geni. I miRNA derivano da RNA trascritti dal DNA ma che non possono essere ulteriormente tradotti in proteine (classificati come RNA non codificante). I miRNA si legano all'RNA messaggero (mRNA) bersaglio, inibendo così l'espressione genica post-trascrizionale, e svolgono ruoli importanti nella regolazione dell'espressione genica, del ciclo cellulare e del timing dello sviluppo biologico.Il progetto recluterà 300 soggetti a cui è stato diagnosticato un cancro da un medico e per i quali è stata presa la decisione di utilizzare l'immunoterapia. I campioni di sangue verranno raccolti prima e dopo il trattamento (i tessuti diagnostici patologici passati possono anche essere riesaminati secondo le esigenze dello studio). Lo studio analizzerà le differenze nella quantità di microRNA liberi, il numero di cellule tumorali circolanti e le differenze nell'espressione degli antigeni di superficie nel sangue dei soggetti, nonché lo specifico stato di espressione degli antigeni di superficie nei tessuti tumorali, ed eseguirà un'analisi statistica.

Per la sperimentazione, verranno prelevati solo due tubi di sangue periferico da 10cc (totale 20cc, utilizzando grandi tubi di raccolta con tappo viola). I soggetti parteciperanno a un massimo di tre prelievi di sangue per questa sperimentazione (prima dell'immunoterapia, dopo l'immunoterapia e durante l'imaging di follow-up).

Attraverso il prelievo del sangue del paziente, l'estrazione del plasma, la purificazione dei microRNA e la loro conversione in acido deossiribonucleico complementare (cDNA) – insieme ai materiali diagnostici del cancro (raccolti durante le diagnosi passate, nessun nuovo campione necessario) – verrà utilizzata la piattaforma miRSCanPanelChip™ per lo screening e l'analisi statistica della quantità di microRNA liberi nel plasma. Infine, verrà analizzata la correlazione tra le quantità di RNA, il numero di cellule tumorali circolanti e la risposta al trattamento clinico.