Studio Clinico Esplorativo sulla Sicurezza ed Efficacia dell'Iniezione di Cellule CAR-NK Anti-CD19/BCMA per il Trattamento delle Malattie Reumatiche Pediatriche Refrattarie (Cell therapy)

Criteri Comuni di Inclusione:

1. . Genere non vincolato, età ≥5 anni;
2. . Il paziente o il suo tutore legale accetta di partecipare a questa sperimentazione clinica e firma il modulo di consenso informato, indicando la comprensione dello scopo e delle procedure della sperimentazione e la volontà di partecipare;
3. . Cellule B del sangue periferico confermate mediante citometria a flusso per esprimere CD19, con un conteggio di cellule B >5 cellule/uL;
4. . Se precedentemente trattato con terapia mirata alle cellule B, il conteggio di cellule B nel sangue periferico allo screening è tornato alla normalità o superiore al livello pre-trattamento;
5. . L'ecocardiografia indica una struttura cardiaca sostanzialmente normale e una frazione di eiezione ventricolare sinistra (LVEF) ≥55%; l'elettrocardiogramma non mostra anomalie significative;
6. . Funzione epatica: aspartato aminotransferasi (AST) e alanina aminotransferasi (ALT) ≤3.0×ULN, bilirubina totale (TBIL) ≤2.0×ULN;
7. . Funzione renale: velocità di filtrazione glomerulare stimata (eGFR) ≥30 mL/min/1.73m²; (Se eGFR <30 mL/min/1.73m² e/o sottoposto a terapia sostitutiva renale, il soggetto può essere considerato per l'arruolamento dopo la valutazione dello sperimentatore che il beneficio supera il rischio e con il pieno consenso informato del paziente/tutore);
8. . Funzione polmonare: Nessuna lesione polmonare grave, saturazione di ossigeno nel sangue (SpO₂) ≥92%;
9. . Le donne in età fertile devono avere un test di gravidanza urinario negativo e accettare di usare un contraccettivo efficace durante la sperimentazione fino a 1 anno dopo l'infusione.

Artrite Idiopatica Giovanile Poliarticolare (pJIA):

1. . Esordio prima dei 16 anni, durata della malattia ≥6 settimane, diagnosticata come JIA poliarticolare secondo i criteri di classificazione ILAR 2001, e positiva per il fattore reumatoide (RF) e/o anticorpi anti-peptidi/proteine citrullinati (ACPA): positiva in ≥2 occasioni ad almeno 3 mesi di distanza durante i primi 6 mesi di malattia;
2. . Giudicato dallo sperimentatore avere malattia attiva nonostante un trattamento adeguato con dosi standard prima dello screening, soddisfacendo le seguenti condizioni di adeguatezza del trattamento: a. Trattamento con farmaci antireumatici modificanti la malattia convenzionali (DMARDs) per almeno 6 mesi, con dosi stabili di 2 DMARDs per ≥12 settimane; b. Trattamento con almeno 2 agenti biologici, con dosi stabili per ≥12 settimane;
3. . Punteggio JADAS-27 >8.5;
4. . Deve avere almeno 5 articolazioni attive (definite come presenza di gonfiore articolare; o in assenza di gonfiore, presenza di limitazione del movimento accompagnata da dolore al movimento e/o dolorabilità) secondo la definizione ACR sia allo screening che al basale;
5. . Nessuna insorgenza di sindrome da attivazione macrofagica entro 1 mese prima dello screening.

Sindrome di Sjögren (SS):

1. . Diagnosticata con SS primaria ad esordio infantile almeno 24 settimane prima della firma del ICF, secondo i criteri di classificazione AECG 2002 / criteri di classificazione EULAR/ACR 2016 e i criteri di classificazione giapponesi 2021 per SS primaria infantile;
2. . Soddisfare i criteri di classificazione per SS, e intolleranza o risposta inadeguata ai glucocorticoidi (prednisone 1-2 mg/kg/giorno o dosi equivalenti di altri corticosteroidi) e almeno 2 immunosoppressori, con una durata del trattamento con glucocorticoidi di almeno 6 mesi;
3. . Punteggio ESSDAI ≥5 in almeno 1 dei seguenti 8 domini allo screening: costituzionale, linfoadenopatia, ghiandolare, articolare, cutaneo, renale, ematologico e sierologico;
4. . Punteggio ESSPRI ≥5 allo screening;

5. . Positività per anticorpi anti-SSA/Ro.

   Dermatomiosite Giovanile (JDM):

6. . Diagnosticata con JDM almeno 24 settimane prima della firma del ICF secondo i criteri di classificazione EULAR/ACR 2017;
7. . Soddisfare i criteri di classificazione per JDM Refrattaria (RJDM), e aver avuto intolleranza o risposta inadeguata ai glucocorticoidi (prednisone 1-2 mg/kg/giorno o dosi equivalenti di altri corticosteroidi) e almeno 2 immunosoppressori, con una durata del trattamento con glucocorticoidi di almeno 6 mesi;
8. . Pazienti con sindrome anti-sintetasi che sono positivi agli anticorpi anti-sintetasi e soddisfano i criteri per RJDM possono essere arruolati direttamente;
9. . Pazienti con miopatia necrotizzante immuno-mediata che sono positivi per anticorpi contro la particella di riconoscimento del segnale (SRP) o 3-idrossi-3-metilglutaril-coenzima A reduttasi (HMGCR) e soddisfano i criteri per RJDM possono essere arruolati direttamente.

Sclerosi Sistemica (SSc):

1. . Soddisfare i criteri di classificazione ACR/EULAR 2013 per SSc, con primo fenomeno non di Raynaud verificatosi a età <18 anni e durata della malattia ≥60 mesi;
2. . Positività per anticorpi antinucleo (ANA) o qualsiasi anticorpo specifico per SSc;
3. . Punteggio cutaneo di Rodnan modificato (mRSS) ≥15 (punteggio totale 51);
4. . Soddisfare la definizione di malattia refrattaria al trattamento: risposta inadeguata ai glucocorticoidi (≥0.5 mg/kg/giorno) e ciclofosfamide e almeno 1 altro farmaco immunomodulante per oltre 3 mesi;
5. . Diagnosticata con UCTD-ILD refrattaria: UCTD tipicamente si riferisce a pazienti con sintomi e segni suggestivi di CTD e evidenza sierologica di autoimmunità, ma che non soddisfano i criteri di classificazione per nessuna CTD definita. Presenza di manifestazioni cliniche correlate a ILD: es. tosse secca, dispnea da sforzo, crepitii bibasali, dita a bacchetta di tamburo, OPPURE tomografia computerizzata ad alta risoluzione del torace coerente con caratteristiche di ILD (spesso simmetriche, sottopleuriche), OPPURE test di funzionalità polmonare che mostrano capacità di diffusione compromessa e difetto ventilatorio restrittivo. Tutti i pazienti non devono aver mostrato miglioramento in sintomi come dispnea o tosse dopo almeno 1 mese di terapia con glucocorticoidi (prednisone ≥1 mg/kg/giorno o equivalente).

Lupus Eritematoso Sistemico (SLE):

(1. Diagnosticato con SLE ad esordio infantile secondo i criteri di classificazione SLICC 2012 o EULAR/ACR 2019 per SLE; (2). Deve soddisfare una delle seguenti condizioni di adeguatezza del trattamento:

• Dopo trattamento con glucocorticoidi (≥1 mg/kg/giorno di prednisone o equivalente) e uno o più immunomodulatori (inclusi ciclofosfamide, MMF, azatioprina, metotrexato, ciclosporina, tacrolimus, sirolimus, leflunomide, telitacicept, belimumab e rituximab) per 3 mesi (3M);
• Pazienti intolleranti alla terapia convenzionale possono essere considerati per l'arruolamento dopo che lo sperimentatore giudica che il beneficio supera il rischio e con il pieno consenso informato del paziente/tutore;
• OPPURE incapacità di ridurre i glucocorticoidi a ≤5 mg/giorno dopo 6 mesi (6M) di terapia convenzionale; (3). Punteggio SLEDAI-2K >6; (4). Nessuna insorgenza di sindrome da attivazione macrofagica entro 1 mese prima dello screening.

Malattia del Tessuto Connettivo Mista (MCTD):

(5). Diagnosticata con MCTD primaria ad esordio infantile almeno 24 settimane prima della firma del ICF secondo i criteri di classificazione MCTD di Sharp 1986 adattati per bambini; (6). Soddisfare i suddetti criteri di classificazione per MCTD infantile, e aver avuto intolleranza o risposta inadeguata ai glucocorticoidi (prednisone 1-2 mg/kg/giorno o dosi equivalenti di altri corticosteroidi) e almeno 2 immunosoppressori convenzionali, con una durata del trattamento standardizzato con glucocorticoidi di almeno 6 mesi; (7). Punteggio della versione infantile dell'Indice di Attività della Malattia del Tessuto Connettivo Mista (MDAI) ≥8 allo screening; (8). Punteggio PRO per le dimensioni di coinvolgimento caratteristiche della MCTD ≥5 allo screening; (9). Positività ad alto titolo per anticorpi anti-U1-RNP (titolo ≥1:1000), e negatività per anticorpi anti-Sm.

Criteri di Esclusione:

1. . Storia di malignità (eccetto carcinoma a cellule basali o squamose della pelle o carcinoma in situ della cervice che è stato asportato e curato per almeno 5 anni), o malignità attuale.
2. . Allergia nota, ipersensibilità, intolleranza o controindicazione alle cellule CAR-NK CD19/BCMA o a qualsiasi componente dei farmaci che possono essere usati nello studio (inclusi fludarabina, ciclofosfamide e tocilizumab), o soggetti che hanno avuto una grave reazione allergica in passato.
3. . Evidenza di grave infezione virale o batterica attiva, o infezione fungina sistemica non controllata alle visite di screening o basale, o soggetti con infezione attiva o non controllata che richiede terapia antimicrobica parenterale.
4. . Soggetti con insufficienza cardiaca classificata come Classe III o IV secondo la classificazione funzionale NYHA (vedi Appendice).
5. . Soggetti con cardiopatia congenita, o storia di infarto miocardico acuto entro 6 mesi prima dello screening, o grave aritmia (inclusi battiti prematuri ventricolari multifrequenti, tachicardia sopraventricolare, tachicardia ventricolare, ecc.); o combinata con versamento pericardico da moderato a grande, miocardite grave, ecc.; o segni vitali instabili che richiedono vasopressori per mantenere la pressione sanguigna.
6. . Antigene di superficie dell'epatite B (HBsAg) positivo o anticorpo contro il core dell'epatite B (HBcAb) con livelli di DNA del virus dell'epatite B (HBV) rilevabili sopra l'intervallo di riferimento normale nel sangue periferico allo screening; OPPURE anticorpi contro il virus dell'epatite C (HCV) positivi con livelli di RNA di HCV rilevabili sopra l'intervallo di riferimento normale; OPPURE anticorpi contro il virus dell'immunodeficienza umana (HIV) positivi; OPPURE test per sifilide positivo; OPPURE test DNA per citomegalovirus (CMV) positivo.
7. . Storia di grave infezione da herpes, come encefalite erpetica, herpes oculare o herpes disseminato; segni di infezione da herpes o virus varicella-zoster (in particolare varicella, herpes zoster) entro 12 settimane prima dello screening.
8. . Tubercolosi attiva attuale o storia di tubercolosi attiva, o soggetti il cui test di rilascio dell'interferone-gamma per infezione tubercolare non può dare un risultato negativo durante il periodo di screening.
9. . Soggetti con malattia polmonare interstiziale (ILD), soddisfare una delle seguenti condizioni comporta l'esclusione: Capacità vitale forzata (FVC) <50% del valore predetto allo screening, OPPURE capacità di diffusione del monossido di carbonio (DLCO) <40% del valore predetto; Richiedere terapia con ossigeno a lungo termine o ventilazione non invasiva; Esacerbazione acuta di polmonite interstiziale/insufficienza respiratoria acuta negli ultimi 6 mesi, o ospedalizzazione per ILD che richiede terapia corticosteroidica endovenosa in bolo; ILD rapidamente progressiva secondo il giudizio dello sperimentatore.

10. . Soggetti con ipertensione arteriosa polmonare (PAH), soddisfare una delle seguenti condizioni comporta l'esclusione: Risultati da cateterismo cardiaco destro o ecocardiografia (stima non invasiva) che soddisfano una delle seguenti: a. Pressione arteriosa polmonare sistolica stimata (sPAP) >50 mmHg (valutata in combinazione con la velocità di rigurgito tricuspidale); b. Diagnosi di PAH di classe funzionale WHO III o IV.

    Ospedalizzazione negli ultimi 6 mesi a causa di esacerbazione acuta di PAH o insufficienza cardiaca destra; Richiedere terapia con analoghi della prostaciclina endovenosa durante il periodo di screening; Presenza di segni di disfunzione ventricolare destra, inclusi ma non limitati ad ascite, congestione epatica, edema periferico, accompagnati da livelli significativamente elevati di BNP/NT-proBNP e sintomi clinicamente instabili.

11. . Storia di epilessia o altre malattie attive del sistema nervoso centrale.
12. . Soggetti con malattie da immunodeficienza acquisita o congenita.
13. . Storia di qualsiasi condizione cardiaca, endocrina, ematologica, epatica, immunologica, metabolica, urologica, polmonare, neurologica, dermatologica, psichiatrica, renale clinicamente significativa, o altra condizione importante che, nel giudizio dello sperimentatore, preclude la somministrazione di KN5601.
14. . Trapianto di organo solido o di cellule staminali ematopoietiche entro 3 mesi prima dello screening; OPPURE malattia del trapianto contro l'ospite (GVHD) acuta di grado 2 o superiore entro 2 settimane prima dello screening.
15. . Vaccinazione con vaccino vivo entro 4 settimane prima dello screening.
16. . Aver ricevuto i seguenti trattamenti entro i tempi specificati prima della visita basale: Terapia di deplezione delle cellule B entro 26 settimane; Entro 24 settimane prima della randomizzazione: Anticorpo monoclonale anti-CD40, belimumab, abatacept, biologici anti-fattore di necrosi tumorale alfa (anti-TNFα), immunoglobuline, plasmaferesi; Entro 12 settimane prima della randomizzazione: Inibitori di JAK o altri inibitori di chinasi, a meno che esplicitamente permesso dal protocollo; Uso di medicine tradizionali cinesi, medicine cinesi proprietarie o prodotti per la salute contenenti Tripterygium wilfordii (Lei Gong Teng), Tripterygium hypoglaucum (Kunming Shan Hai Tang), Colquhounia coccinea var. mollis (Huo Ba Hua Gen), o radice di peonia bianca (Paeonia lactiflora, Bai Shao) entro 4 settimane; Entro 3 emivite della terapia precedente, OPPURE entro 4 settimane, OPPURE fino a quando gli effetti farmacodinamici attesi non sono tornati ai livelli basali (qualunque sia più lungo); Conteggio di cellule B inferiore al limite inferiore del normale o al valore basale (qualunque sia più basso) a seguito di precedente terapia di deplezione delle cellule B.
17. . Partecipazione a qualsiasi sperimentazione clinica entro tre mesi.
18. . Qualsiasi altra condizione che, a giudizio dello sperimentatore, possa aumentare il rischio per il soggetto o interferire con i risultati della sperimentazione.