COVID-19介在性失調症の治療のためのシンバスタチン鼻洗浄剤 (SimCA)

嗅覚障害 (OD) は、COVID-19 パンデミックを引き起こしたウイルスである SARS-CoV-2 の特徴的な症状の 1 つです。 COVID媒介ODにおける局所炎症と酸化的損傷の役割の証拠が増えています。 現在のところ、COVID-19 媒介性 OD 患者に推奨される唯一の治療法は嗅覚トレーニングであり、嗅覚の劇的な改善をもたらすことは示されていません。 したがって、急速に増加するCOVIDを介した感覚異常人口に対して、他の効果的な管理戦略を特定することが不可欠です。

スタチンは、主にコレステロールを下げるために使用されます。 ただし、スタチンには、細胞の炎症、酸化ストレス、および神経保護に対する多面的な効果もあります。 複数の研究で、局所スタチンの気道内での抗炎症効果が評価され、局所適用により、IL-4、IL-6、IL-6、IL-8、CCL-11 などの炎症性メディエーターや炎症細胞が減少することが示されています。 スタチンの抗炎症効果は、神経炎症についても実証されています。 ある研究では、ミクログリア細胞の代用としてのヒト単球由来マクロファージ THP-1 に対する 10 uM シンバスタチン懸濁液の抗炎症効果が評価され、リポ多糖誘発 IL-6 分泌の有意な減少が注目されました。 別の研究では、マウスの神経炎症に対するシンバスタチン (用量 0-20 ug/mL) と脳由来神経栄養因子を含浸させた経鼻投与ポリマーソームの影響を評価し、3 日間の曝露後に脳​​ホモジネート内の IL-6 と IL-1b の減少を指摘しました。

局所シンバスタチンの安全性も in vitro で調査されています。 鼻毛様体機能に対する局所シンバスタチンの効果は、1×10-6Mを鼻細胞ブラッシングに30分間適用することによって評価した。 得られた繊毛運動頻度を評価し、対照と比較して悪影響を示さなかった。 経上皮電気抵抗もまた、エアロゾル化シンバスタチンを気管支上皮細胞に曝露してから4時間後に評価され、対照細胞とエアロゾル化シンバスタチンで短期的に処理された細胞との間で経上皮細胞抵抗に有意な変化は見られませんでした。 しかし、14日後、経上皮抵抗の大幅な減少が認められ、細胞透過性の大幅な増加が示されました。 ただし、この細胞透過性の変化は、細胞生存率の変化とは関連していないことに注意することが重要です。 マニカヴァサガム等。また、マウス海馬神経細胞に対する最大 20 uM のシンバスタチン ナノ粒子の安全性を評価し、毒性に注目せず、我々の試験濃度 (最大 10 uM) が神経組織に毒性をもたらさないことを示しています。

王ら。ヒト鼻上皮細胞に適用されたスタチン懸濁液の毒性と抗炎症効果を評価し、細胞生存率に大きな影響を与えることなく、24時間の薬物曝露後にCCL5、CCL11、IL-5、およびIL-13の減少を示しました。

スタチンは神経再生にも役立ちます。 複数の研究で、脊髄損傷、外傷性脳損傷、および末梢神経損傷後の神経保護効果が実証されています。 末梢神経損傷の研究は、スタチンの早期投与が神経突起成長の増加を通じて神経再生を加速できることを実証しました。 複数のマウス研究は、経口スタチン投与が、嗅粘膜への化学的損傷を受けたマウスの嗅上皮の増殖と神経再生を改善できることを示しています。

スタチンは、抗炎症、抗酸化、および神経再生能力により、COVID を介した OD を安全に治療できる可能性があります。 しかし、経口スタチン投与は、腸壁内での代謝と肝臓による初回通過代謝が高いため、バイオアベイラビリティが非常に低くなります。 経口投与されたスタチンには、スタチン不耐症のリスクもあり、患者は軽度の筋肉痛から生命を脅かす横紋筋融解症に至るまで、スタチン関連の筋肉症状を発症します。 そのため、非経口経路によるスタチンの投与は、局所的なバイオアベイラビリティを高め、薬効を改善し、全身投与量を減らし、副作用のリスクを制限することができます。

鼻洗浄による鼻腔内薬物投与は、副鼻腔障害の管理に広く使用されています。 鼻腔内投薬には、全身経路よりも高濃度の送達、初回通過肝代謝をバイパスすることによるバイオアベイラビリティの増加、迅速な薬物吸収と作用の開始、副作用の軽減、および神経系による直接吸収の可能性など、多くの利点があります。嗅神経上皮。 鼻腔は、薬物適用に対して複数の障壁を提示します: 粘膜層、上皮内層、密着結合。 したがって、薬物の親油性は大きな利点を提供し、薬物が粘膜層に浸透し、鼻上皮細胞を介して受動的に拡散することを可能にします.

親油性の高いプロドラッグであるシンバスタチンは、経鼻使用に最適です。 それは、鼻上皮内に存在するシトクロム p450 酵素 3A4/5 によって、その活性親水性形態 (シンバスタチンヒドロキシ酸) に変換されます。 利用可能なスタチンのうち、シンバスタチンは、下気道の抗炎症成分について頻繁に評価されています。 多くの動物モデルでは、シンバスタチン投与後の損傷した末梢神経の回復の改善も実証されています。 局所シンバスタチンは、炎症、酸化ストレス、および神経再生能力に対する高い親油性と多面的効果を備えているため、局所適用およびCOVID媒介ODの管理に理想的なスタチンです。

私たちの研究室では、240 mL のリン酸緩衝生理食塩水 (1-100 uM シンバスタチン) に懸濁した 0.1-10 mg のカスタム合成シンバスタチンの評価を行いました。 これらの懸濁液は、1 日 5 分間、表面 hTEC (気液界面で分化) に毎日適用され、続いて合計 4 日間、2 回の生理食塩水ですすがれました。 繊毛運動頻度 (CBF)、経上皮抵抗 (TEER)、および乳酸脱水素酵素 (LDH) は、時間 0 および薬物曝露の 4 日後に評価されました。 細胞は、アセチル化αチューブリンに対する抗体を用いて繊毛について免疫染色され、E-カドヘリンに対する抗体を用いて細胞接合部について免疫染色された。 シンバスタチン 0.1 ～ 10 mg の用量で処理した多繊毛細胞の繊毛は、対照と変わらないことがわかりました。 同様に、E-カドヘリンは、より高い 5 mg の用量を除いて維持されました。 0.1-1 mg で処理された細胞では、4 日間の薬物曝露後に TEER に変化はありませんでした。 しかし、シンバスタチン 5 mg および 10 mg で処理した細胞では、TEER の減少が認められました。 TEER は減少しましたが、4 日間の 0.1 ～ 10 mg の薬物曝露後に LDH が上昇したという証拠はなく、細胞毒性がないことを示しています。

これらの調査結果、および 10 uM (生理食塩水 240 mL 内のシンバスタチン 1 mg) シンバスタチン懸濁液の抗炎症効果を示す以前のデータを考慮して、安全性と忍容性、および最大耐量を分析する第 1 相試験を提案します。 COVID媒介ODの成人における局所シンバスタチン鼻洗浄の効果。 最初のコホートは、鼻洗浄を介してシンバスタチンの最低用量（0.1 mg）を4週間受け取ります。 3人の被験者のいずれも毒性を報告していない場合、登録された3人の被験者の次のグループは、1か月間、最大用量（1mg）までのより高い用量のシンバスタチンを連続して投与されます。 次の用量をテストする予定です: 0.1 mg、0.25 mg、0.5 mg、1 mg。

これは、鼻洗浄を介して送達される局所シンバスタチンの非盲検第1相試験であり、単一の三次学術医療センターで実施されます。 標準的な 3 プラス 3 (3+3) の用量漸増設計を使用することを提案します。 治験薬は、毎日4週間洗浄するために被験者に直接出荷されます。

包含基準を満たす被験者については、チャートから被験者の名前、住所、電話番号、年齢、性別、および OD に関連する来院日時が取得されます。 被験者がスタチン不耐症のリスクを高める状態にないことを確認するために、治験の開始前に以下のベースライン臨床検査を実施します：甲状腺刺激ホルモン（TSH）、アスパラギン酸トランスアミナーゼ（AST）、アラニントランスアミナーゼ（ALT）、推定糸球体濾過率 (eGFR)、血中尿素窒素 (BUN)、クレアチニン (Cr)、クレアチンキナーゼ (CK)、および総コレステロール。 標準的な正常範囲外の検査値を持つ被験者は、研究から除外され、かかりつけ医（PCP）に紹介されます。 スタチン投与の前に、すべての被験者は、副鼻腔が健康であることを確認するために、フェローシップの訓練を受けた鼻科医による硬性鼻内視鏡検査による評価を受けます。

被験者は、3 人 1 組のグループで研究に参加します。 研究は、登録された被験者の33％以上で用量制限毒性（DLT）が観察されるまで、3人の被験者の連続コホートで続行されます。 用量を増やしながら、毒性の徴候や症状を監視します。 この試験の目的のために、DLTはスタチン不耐症の発症と定義され、肝臓毒性または筋肉毒性（AST、ALT、またはCKの上昇によって決定される）、または薬物の中止を必要とする重大な全身症状または副鼻腔症状の発症と定義されます。 最小限の副作用しかないと仮定しています。 各参加者は、研究の完了時に再び血液検査（血清CK、AST、ALT）を完了します。

研究中毎週、被験者はSino-Nasal Outcome Test-22（SNOT-22、©2006、Washington University、St. Louis、MO）、検証済みの患者報告による副鼻腔症状の測定を完了します。 SNOT-22 は、リッカート スケールを使用して、副鼻腔の病理の身体的、機能的、および感情的な結果を評価します。 1="非常に軽度"; 2="軽度または軽度"; 3="中"; 4="重度";と 5="可能な限り悪い。" ベースラインからの SNOT-22 スコアの絶対変化を利用して、副鼻腔機能および生活の質に対するシンバスタチンリンスの悪影響を説明します。

鼻内視鏡検査は、フェローシップの訓練を受けた鼻科医によっても実施されます。 副鼻腔疾患の重症度を反映する Lund-Kennedy スコアは、鼻腔内視鏡検査時に記録されます。

各参加者の嗅覚機能は、ペンシルバニア大学の嗅覚識別テスト（UPSIT）を介して、この研究の開始時および完了時にも評価されます。 UPSIT は、嗅覚の鋭敏さの有効な評価です。 被験者は 40 個のスクラッチ アンド スニッフィング アイテムのにおいを嗅ぎ、次に 4 つの香りのオプションから選択方法で知覚されたにおいを選択します。 それぞれの正しい匂いの識別には 1 のスコアが与えられ、最終的なテストのスコアは 1 ～ 40 になります。 男性で 34 点以上、女性で 35 点以上のスコアは、正常な感覚を表しています。 スコアの変化が 4 を超えると、臨床的に重要であると見なされます。

現在の研究は、フェーズ II および III の臨床試験のサポートを提供します。 さらに、この研究には、副鼻腔に影響を与える他の疾患プロセスへの応用があります。