高齢患者のPOCDの診断バイオマーカーとしてのLINC01844

試験デザイン この単一施設の観察試験は、中国、上海の復丹大学中山病院で選択的腰椎減圧術および固定術中に実施されます。 書面によるインフォームドコンセントが参加者全員から得られます。 この治験は2024年2月21日までに、承認番号B2024-063Rで復旦大学中山病院（中国）に対して承認された。

麻酔 患者が手術室に入った後、バイタルサインが監視され、酸素吸入が行われます (> 8L/分)。 全身麻酔は、スフェンタニル (0.2ug/kg)、プロポフォール [血漿濃度 3ug/ml の標的制御注入 (TCI)]、レミフェンタニル (血漿濃度 3ng/ml の TCI) およびロクロニウム (0.6mg/kg) で導入されます。 。 麻酔薬と血管作動薬は、麻酔深度、血圧、呼吸パラメータに応じて手術中に使用されます。 手術後には、患者管理静脈鎮痛 (PCIA) ポンプ (スフェンタニル 250ug、ラモセトロン 0.6mg) が接続されます。

ＬＩＮＣ０１８４４の検出および調製 製造業者の指示に従って、ＴＲＩｚｏｌ ＬＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、米国）を使用して、末梢血サンプルから全ＲＮＡを抽出する。 簡単に説明すると、血液サンプル (250 μL) を TRIzol LS 試薬 (750 μL) で均質化した後、さらなる分析のためにクロロホルム (200 μL) を加えます。 サンプルを 12,000 × g、4℃で 15 分間遠心分離し、RNA を含む水相を新しいチューブに移し、RNA を沈殿させるためにイソプロパノール (0.5 mL) を加えます。 RNA ペレットを 75% エタノール (1 mL) で洗浄し、最後に RNase フリー水 (10 ～ 20 μL) に再懸濁し、NanoDrop2000 で RNA の品質を測定します。 光学密度比 260/280 >1.80 は、サンプルがその後の実験で使用できることを示します。 次に、M-MLV 逆転写酵素 (Promega、米国) を使用して cDNA を合成します。 SYBR Green PCR Master Mix Kit (Qiagen) の指示に従って、リアルタイム定量的ポリメラーゼ連鎖反応 (qRT-PCR) を最終分析に利用しました。 PCR パラメーター: 95 ℃ 10 分間。 95℃で15秒、60℃で30秒、72℃で30秒を45サイクル。 GAPDH を参照遺伝子として選択し、倍率変化 (2 -44Ct ) を利用して LINC01844 相対レベルを分析します。

神経心理学的検査の評価と POCD の評価 手術の前日に、患者健康質問票-9 (PHQ-9) を使用して患者のうつ病が評価されますが、以前に重度の認知障害のある患者はミニ精神状態検査 (MMSE) を使用して除外されます (MMSE)スコア < 24)。 患者の認知機能を評価するために、手術の 1 日前と術後 1、3、5 日目に一連の神経心理学的検査が行われます。これには、改訂ホプキンス聴覚学習検査 (HALT-R)、改訂簡易視空間記憶検査 (BVMT) が含まれます。 -R)、トレイル作成テスト (TMT)、桁スパン テスト (DST)、デジタル記号置換テスト (DSST)、動詞とグラフの再現テスト。 これらの検査はすべて、手術手順や血液サンプルについて知らされていない訓練を受けた医師によって、静かな環境で行われます。 同時に、年齢、性別、学歴を一致させた、手術を受けていない健康なボランティア20人を対照群として募集する。 神経心理学的検査は、認知機能の正常基準値を決定するために対照群に対して同じ間隔で実施されます。 術後の認知障害研究に関する国際ガイドラインに従って、各神経心理学的検査スコアからベースラインスコアと学習成果を差し引き、対照群のベースラインスコアの標準偏差で割った。 結果をZスコアと名付けた。 少なくとも 2 つの Z スケールが 1.961 より大きい場合、POCD が考慮されました。

研究訪問とデータ収集 患者は術前と術後 (POD) 1、3、5 日目に訪問されます。 患者は包含基準に従ってスクリーニングされます。 包含基準を満たすすべての患者は、スクリーニング ログ ファイルに登録されます。 研究者は研究の経過と目的を説明し、研究に関する情報を書面で提供します。 研究への参加を希望する患者は、書面によるインフォームドコンセントの提供が必要となります。

データは、治験施設の治験責任医師の監督の下、治験担当者または臨床担当者によって電子データキャプチャ（EDC）システム上の紙の症例報告書（CRF）と電子症例報告書（eCRF）の両方に登録されます。 不一致がある場合には、紙の CRF がゴールドスタンダードとして使用されます。

データの取り扱い 研究チームの2名のメンバーが研究モニタリングを行います。 遠隔監視は、初期の異常なパターン、一貫性、信頼性の問題、その他の異常を知らせるために実行されます。 患者データは、4 つの 3 桁で構成される患者 (識別) 番号を使用して、匿名形式で収集されます。 研究データは、医師主導治験 EDC (IIT-EDC) ツールを使用して収集および管理されます。 IIT-EDC は、研究研究のためのデータ記録をサポートするために設計された、パスワードで保護されたイントラネット ベースのアプリケーションです (Web サイト: http://10.15.7.137)。 最終治験データセットへの完全なアクセスは、選ばれた研究者に与えられます。 同意書、予期せぬ重篤な有害事象（SAE）の疑いの報告、および関連する通信を含むすべての元の記録は、治験施設で 10 年間アーカイブされます。 クリーンな治験データベース ファイルは匿名化され、10 年間維持されます。

安全性 試験に関連すると考えられるすべての有害事象 (AE) は試験調整センターに報告されます。 現地の法律および規制に従って、参加者は当部門が提供する無料の治療を受けることができ、あるいはこの研究に関連して何らかの傷害が発生した場合には補償を受けることができ、予期せぬ重篤な有害事象の疑いがあるものはすべてデータ監視安全委員会（DMSC）に報告されます。 DMSC は治験責任医師からは独立しており、安全性パラメーターと全体的な治験実施の継続的なレビューを実施します。 DMSC は、大規模臨床試験の独立した専門家 2 名と独立した統計学者 1 名で構成されています。 DMSC は、治験参加者の利益を保護し、治験中の介入の安全性と有効性を評価し、臨床試験の全体的な実施を監視する責任を負います。 治験の完全性を高めるために、DMSC は参加者の募集/維持、参加者の管理、治験実施計画書に規定されたレジメンの遵守と参加者の維持の改善、データ管理と品質管理の手順に関する推奨事項を策定することもあります。

統計分析 サンプルサイズ - 手術後の高齢者の POCD に対する血液中の LINC01844 の相対レベルの予測値を検証するには、受信者動作特性曲線 (ROC) を介して測定された曲線下面積 (AUC) が 0.5 以上である必要があります。 予備試験の結果に基づくと、AUC は 0.73、POCD の発生率は 33.3% でした。 サンプルサイズは PASS (バージョン 11.0) によって計算されました。 片側対立仮説に対する検出力が 80%、有意水準が 5% の場合、57 人の参加者が必要です。 参加者の 10% の脱落が予想されるため、サンプル サイズ 63 が必要です。

分析 - コルモゴロフ-スミルノフ検定は、連続データの正規分布を評価するために使用されます。 ベースライン特性は、必要に応じて、数とパーセンテージ、平均と標準偏差、または中央値と四分位範囲として表されます。 POCD の独立した予測因子はバイナリ ロジスティック回帰によって分析され、結果はオッズ比 (OR) として表されました。 POCD に対する LINC01844 の予測パフォーマンスは ROC を使用して測定され、結果は 95% 信頼区間と AUC によって決定されました。 一次および二次アウトカムの追跡調査における損失はまったくないか、最小限であると予想されます。 すべての結果分析には、治療意図 (ITT、すべてランダムに割り当てられたケース) 母集団が使用されます。 支持分析は、完全な分析セット (FAS、腰椎減圧術と固定術を受けるランダムに割り当てられたすべての患者) に基づいています。 すべての結果に対して完全なケース分析が実行されます。 ただし、主要結果に対して 1% を超える欠落データが見つかった場合は、複数の代入と推定方程式法を使用した感度分析が実行されます。

データベースのクリーニングとロック 現在の研究中に使用および/または分析されたデータセットは、合理的な要求に応じて責任著者から入手可能になります。 すべてのデータが入力され、すべての不一致または欠落データが解決された後、またはすべての努力が払われ、残りの問題を修正できないと当社が判断した場合、データベースはただちにロックされます。 このステップでは、データベースをロックする前にデータが確認されます。 その後、研究データベースはロックされ、統計分析のためにエクスポートされます。 この段階で、すべての調査員からデータベースへのアクセス許可が削除され、データベースはアーカイブされます。