수리남 신생아의 감염, 패혈증 및 수막염 (InSepSur)

연구 설계:

Academic Hospital Paramaribo(AZP)는 수리남에서 가장 큰 주산기 관리 시설을 보유하고 있습니다. 최근 AZP는 국내 유일의 신생아집중치료실(NICU)을 개설했다. 이 연구는 감염 검사가 필요한 감염, 패혈증 또는 수막염(연령: 0-1개월)의 임상 징후가 있는 이곳과 중상급 의료 시설에 있는 모든 신생아를 포함하는 것을 목표로 합니다. 이러한 신생아의 포함과 함께 전염병이 있는 신생아에 대한 상세한 역학 설명이 뒤따릅니다. 참여 소아과 의사 5명 중 1명의 승인을 받아 10명의 거주자 중 1명이 포함됩니다. 감염 매개변수(t=0 및 t=48시간), 혈액 배양(t=0시간) 및 CSF 배양(t=0시간)에 대한 표준 채혈과 함께 혈청 및 CSF는 바이오마커 연구를 위해 분리됩니다. . 모든 신생아의 경우 감염, 패혈증 또는 수막염 관리를 위한 일반적인 현지 프로토콜을 따를 것입니다. 여기에는 1) 입원 시 감염에 대한 임상적 의심이 높았을 때 7일 동안의 항생제 치료가 포함됩니다. 2) 감염 매개변수가 48시간에 비정상적임; 3) 혈액배양은 양성이다. 그렇지 않으면 48시간 후에 항생제 치료를 중단합니다. 추가 프로토콜에는 호흡 지원, 순환(유체) 지원 및 영양 공급에 필요한 변경이 포함됩니다. 의학적 치료는 강심제 및 고혈당증 및 발작에 대한 치료일 수 있습니다. 신생아는 항생제 치료 과정 및 배양 결과에 따라 5개 그룹으로 나뉩니다. 1) 기준선 대조군(감염 징후 없음): 합병증이 없는 고빌리루빈혈증(황달이 있지만 다른 증상은 없음)에 대해 t=0 및 48시간에 연속 채혈을 위해 입원한 신생아 감염 징후); 2) 감염 징후, 추가로 나누기: 2a) 감염 없음: 48시간 후 항생제 중단; 부정적인 문화; 2b) 임상 감염: 7일 항생제; 부정적인 문화; 2c) 패혈증: 세균성 혈액 배양 양성; 2d) 수막염: 세균성 CSF 배양 양성.

샘플 크기 및 검정력:

Suriname Perinatal and Infant Mortality Survey는 신생아 감염 발생률에 대한 데이터 없이 감염으로 인한 사망률 데이터만 제공하기 때문에 샘플 크기 및 검정력 분석이 복잡합니다. AZP의 NICU에서 신생아 1000명당 50명(5%)의 감염에 대한 임상 징후 입원 발생률을 추정합니다. AZP의 연간 출생률은 연간 약 3000명으로 감염 징후가 있는 신생아 n=150명을 4개 그룹으로 나눕니다. 이러한 추정을 기반으로 전체 모집단의 권장 표본 크기는 n=1538(오차 한계 1% 및 CI 99%)입니다. 제외 기준이 적용되는 신생아의 발생률과 하위 그룹의 발생률은 현재 알려지지 않았으며 후속 조치에 대한 손실을 보상하기 위해 1년 기간(n=3000)에 걸쳐 포함하기로 결정했습니다. 바이오마커 연구는 본질적으로 탐색적이며 우리는 n=40의 기준선 대조군을 목표로 합니다(더 큰 n은 실질적인 제약으로 인해 설정하기 어려울 수 있음). 분석에서 재태 연령과 인종에 따라 조정할 것입니다. 신생아 감염과 관련된 바이오마커 수준에 대한 이전 데이터가 없기 때문에 검정력을 추정할 수 없습니다. 150개 포함된 혈청 및 CSF 분석을 통해 향후 후속 바이오마커 연구를 위해 이를 수행하는 것을 목표로 합니다.

방법론:

역학: 다음 데이터는 입원(t=0시간) 및 입원 중(t=48시간) 동안 기록됩니다: 날짜 및 시간, 산모 연령, 성별, 산모 B군 연쇄상구균 배양 결과, 산모 발열, (조기) 연장 양막 파열((P)PROM), 재태 주령(발라드에 따라 알 수 없는 경우), 분만 위치 및 방식, 아프가 점수, 출생 체중, 성별, 민족, 백혈구 수 및 분화, 혈소판 수, CRP, 항생제 치료(유형, 기간), 패혈증(조기/후기 발병, 선), 생존/만기. 신생아 급성 생리학 II에 대한 점수는 t=0 및 48시간에서 채점됩니다. .

혈청 분리: 하나의 혈청 마이크로테이너(500 μL)에서 대정맥 천자에 의해 전혈을 수집합니다. 혈청 샘플은 2500 xg에서 15분 동안 원심분리하여 분리하고 보관할 때까지 얼음에 보관합니다. 모든 혈청 및 CSF 샘플은 AZP의 중앙 실험실에서 -80°C로 보관됩니다. 일괄 처리된 혈청 및 CSF 샘플은 드라이아이스(최대 24 시간; 국제 항공 운송 협회 지침에 따라) 흐로닝언에 있는 내피 생의학 및 혈관 약물 표적화 연구소로 이송됩니다.

Luminex® 기술: 흐로닝언에 있는 당사 연구소는 임상 환자 샘플에서 한 번에 여러 접착 분자를 측정(즉, 다중 분석)하기 위해 Luminex® 어레이를 사용한 광범위한 경험을 보유하고 있습니다. 현재 이 기술은 기초 및 중개 연구에 성공적으로 적용되고 있으며 패혈증이나 암과 같은 복잡한 질병에 대한 분자의 진단 다중 배열을 편집할 수 있도록 점차 임상에 진출하고 있습니다. 어레이에 포함된 특정 접착 분자 및 관련 발산 효소에 대해서는 표 1을 참조하십시오. 가용성 L-, E- 및 P-셀렉틴, 세포간 접착 분자(ICAM-1), 혈관 세포 접착 분자(VCAM-1), 호중구 엘라스타제(NE), 매트릭스-메탈로프로테이나제-9(MMP-9), 메탈로프로테이나제(TIMP-1) 및 ADAM 메탈로펩티다제 도메인 17(ADAM-17)의 조직 억제제는 Luminex®로 수행됩니다. NE 및 ADAM-17은 이러한 분자에 Luminex®가 아직 사용 가능하지 않은 한 ELISA로 분석됩니다. 또한 Luminex®를 사용하여 내피 세포 활성화의 마커로 순환하는 Angiopoetin-1 및 -2와 용해성 Tie-2 수용체를 측정합니다. Luminex® 분석(Life Technologies)의 경우 적절하게 희석된 양의 샘플을 96웰 플레이트에 분주합니다. Luminex® 100 분석기(Life Technologies)를 사용하여 동시 분석이 수행됩니다. ELISA는 제조업체 프로토콜(R&D 시스템)에 따라 수행됩니다.

통계 분석:

발생률 종료 역학 결정 요인은 포함 기간 종료 시 계산됩니다. 범주형 변수는 숫자와 백분율로 표시되며 연속 변수는 평균 +/- SD 또는 정규 분포가 아닌 경우 중앙값 +/- 10번째 백분위수로 표시됩니다. 범주형 데이터는 독립 t-테스트 또는 양방향 ANOVA를 사용하여 카이제곱 및 연속 변수와 비교됩니다. 감염 발생에 대한 바이오마커 조합(cAM/SE 비율)의 독립적인 효과를 평가하기 위해 감염을 종속 변수로, cAM/SE 비율, 재태 연령 및 인종을 독립 변수로 사용하여 다변량 로지스틱 회귀 분석을 수행합니다. Spearman 순위 상관관계를 계산하여 바이오마커 간의 이변량 연관성을 평가합니다. cAM/SE 비율의 진단 정확도는 ROC(Receiver Operating Characteristic) 기반 곡선 아래 영역을 사용하여 평가됩니다. 예측 값 및 가능성 비율과 같은 기타 테스트 특성이 계산됩니다. P-값 < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다. 통계 분석은 Stata(StataCorp)를 사용하여 수행됩니다.

어려움과 한계:

첫째, 신생아에서 혈청을 분리하면 부피가 작아질 수 있지만 Luminex® 기술은 소량의 많은 분자를 평가하도록 설계되었습니다. 지역 프로토콜에 따르면 CSF 수집은 기준선 대조군에서 수행되지 않으며 수막염이 의심되지 않는 신생아에서는 수행되지 않습니다. 두 시점의 측정은 시간의 변화를 감지하기에 불충분할 수 있습니다. 현재 수리남에서는 적절한 진단이 불가능하기 때문에 감염의 바이러스 원인을 식별할 수 없습니다.

수리남 상황에 대한 윤리적 우려:

우리는 2015년 3월 9일에 수리남 윤리 위원회로부터 승인을 받았습니다. 신생아의 자격이 있는 경우, 적어도 한 명의 부모 또는 보호자에게 자녀를 연구에 참여하도록 요청하고 네덜란드어로 서면 정보를 제공합니다. 환자가 읽을 수 없거나 네덜란드어를 이해하지 못하는 경우 이해 가능한 언어(영어 또는 스라난 통고)로 구두 설명이 제공됩니다. 모든 임상 데이터, 혈액 및 CSF 수집에 대해 부모 또는 보호자로부터 서면 동의서(서명 또는 지문 포함)를 얻습니다. 혈청 분리를 위한 채혈 및 CSF 수집을 위한 척수 천자는 현지 프로토콜에 따른 개입과 함께만 수행됩니다(즉, 추가 채혈 또는 척수 천자는 수행되지 않음). 모든 샘플은 익명으로 처리되며 샘플 ID를 받습니다.

개별 과목 철회:

피험자의 부모 또는 보호자는 아무런 결과 없이 원하는 경우 언제든지 어떤 이유로든 연구 휴학을 개시할 수 있습니다. 조사자는 의학적 이유로 또는 피험자가 비협조적인 경우(즉, 채혈에 저항하는 경우) 피험자를 철회하기로 결정할 수 있습니다.

연구의 조기 종료:

연구의 조기 종료로 이어질 것으로 예상되는 상황은 없습니다.

안전 보고:

부작용 및 심각한 부작용 모집단(기준) 채혈과 관련된 어떠한 (심각한) 부작용도 예상하지 않습니다.

관리 측면 및 출판:

데이터 및 문서의 취급 및 저장: 조정 조사자는 종이 데이터를 조정 조사관과 연구에 참여하는 조사관이 액세스할 수 있는 고유한 폴더에 저장합니다. 데이터는 또한 Excel 데이터베이스에 전자적으로 저장됩니다. 주 조사관이 데이터를 입력합니다. 파일은 조사관만 액세스할 수 있으며 이메일을 통한 데이터 교환은 암호로 암호화됩니다. 각 참가자는 동의서에 서명한 후 혈액 샘플의 샘플 ID에 해당하는 고유한 참여 번호를 받게 됩니다.

개정:

수정은 공인 윤리위원회의 호의적인 의견이 제공된 후 연구에 적용된 변경입니다. 호의적인 의견을 준 모든 수정 사항은 통보됩니다. '실질적인 수정'은 다음과 같은 상당한 영향을 미칠 수 있는 윤리 위원회 신청 조건이나 의정서 또는 기타 지원 문서에 대한 수정으로 정의됩니다.

• 시험 대상자의 안전 또는 신체적 또는 정신적 완전성
• 임상시험의 과학적 가치
• 재판의 실시 또는 관리 또는
• 시험에 사용된 개입의 품질 또는 안전성.

모든 실질적인 수정 사항은 윤리 위원회와 관할 기관에 통보됩니다. 실질적이지 않은 수정 사항은 공인 윤리 위원회 및 관할 기관에 통보되지 않지만 후원자가 기록하고 제출합니다.

연간 진행 보고서:

스폰서/조사자는 1년에 한 번 공인 윤리 위원회에 연구 진행 상황 요약을 제출합니다. 첫 번째 피험자 포함 날짜, 포함된 피험자 수 및 시험을 완료한 피험자 수, 심각한 부작용/심각한 부작용, 기타 문제 및 수정 사항에 대한 정보가 제공됩니다.

연구 종료 보고서:

조사관은 8주 이내에 연구 종료를 공인 윤리 위원회에 알릴 것입니다. 연구 종료는 마지막 환자의 마지막 방문으로 정의됩니다. 연구가 조기에 종료되는 경우, 시험자는 조기 종료 사유를 포함하여 공인 윤리 위원회에 통지합니다. 연구 종료 후 1년 이내에 조사자/스폰서는 연구의 간행물 또는 초록을 포함하여 연구 결과와 함께 최종 연구 보고서를 공인 윤리 위원회에 제출합니다.

공개 및 출판 정책:

연구 결과의 최종 출판물은 수행된 통계 분석을 기반으로 연구 코디네이터(들)에 의해 작성됩니다. 원고 초안은 검토를 위해 모든 공동 저자에게 제출됩니다. 수정 후 원고는 피어 리뷰를 거친 과학 저널로 보내집니다. 연구 코디네이터는 연구에 포함된 환자를 기반으로 하는 모든 출판물, 초록 또는 프레젠테이션을 승인해야 합니다.