COVID-19: 소아 환자의 SARS-CoV-2 장 배출의 감염 가능성(INPOSIS) (INPOSIS)

배경:

명백한 COVID-19는 훨씬 덜 빈번한 어린이라고 합니다. 중국의 한 연구에서 10세 미만 어린이는 0.9%, 10~19세 어린이는 진단 확진 사례의 1.2%에 불과했습니다1. 매우 유사한 데이터가 이탈리아 등록부에 의해 발표되었으며 각각 0.5% 및 0.7%를 나타냅니다2. 2,000명 이상의 어린이를 포함하여 지금까지 발표된 가장 큰 소아과 연구에서 4%는 무증상 경과를 보였고, 90%는 경미하거나 중간 정도의 임상 경과를 보였고, 6%의 사례에서 심각한 징후가 기록되었으며, 대부분 1세 미만의 유아가 관련되었습니다3. 일부 보고서는 개별 연령 그룹 내 영향을 받은 어린이의 16-30%에서 무증상 과정을 나타냈습니다3,4. 발열 및 마른 기침(사례의 40-100%)과 같은 일반적인 증상 외에도 COVID-19에 걸린 어린이(사례의 10-30%)에서 설사가 자주 관찰되는 반면, 명백한 질병이 있는 성인(4% 건수) 5-11. 급성 감염이 해결된 후 1개월 이상 소아에서 대변으로 바이러스가 빠져나가는 것이 일반적으로 관찰되었습니다7,10. 그러나 관련 바이러스 SARS-CoV 및 MERS-CoV(중동 호흡기 증후군 코로나바이러스)에 대해 입증된 장내 바이러스 배출의 감염 가능성은 현재 SARS-CoV-212,13에 대해 명확하지 않습니다. COVID-19의 경증 또는 무증상 과정으로 인해 어린이는 질병 전파의 중요한 원인이 될 수 있습니다. 예방 접종을 받는 성인의 수가 증가하고 다른 특성을 나타내는 새로운 변종 바이러스가 출현함에 따라 어린이의 상황은 확실히 변할 수 있으며 재평가가 필요할 수 있습니다. 따라서 오스트리아 병원의 여러 소아과 시설과 협력하여 제안된 연구는 소아 인구와 관련된 COVID-19의 다양한 측면을 해결할 수 있는 훌륭한 기회를 제공합니다.

가설:

• SARS-CoV-2가 대변으로 배출되는 것은 무증상 어린이의 비율에서 감지할 수 있습니다.
• COVID-19 환자의 경우 장내 바이러스 배설 빈도가 더 높고 감염 후 장기간 지속됩니다.
• 대변으로 배설된 바이러스는 감염 가능성을 나타낼 수 있습니다.

연구 설계:

12개월의 연구 기간 동안 COVID-19와 무관한 이유로 병원에 입원한 ~500명의 소아 환자를 조사하여 SARS-CoV-2가 대변으로 배출되는 어린이의 발생을 선별하기 위한 것입니다. 바이러스를 옮기는 것으로 의심되지 않습니다. 모집할 소아 환자의 표시된 수는 약술된 연구 기간 내에 달성 가능한 최대 수를 기반으로 합니다. 현재 SARS-CoV-2의 장내 배설이 있는 환자의 비율을 예측하는 것은 불가능합니다. 또한 조사관은 장내 바이러스 배출의 빈도와 기간을 결정하기 위해 COVID-19에 걸린 소아 환자 약 100명을 선별할 것입니다. 대부분의 환자는 병원 입원 시에만 조사를 받게 되며 바이러스 검출 기간을 문서화하기 위해 첫 번째 분석에서 양성 반응을 보인 환자에게서 후속 샘플을 얻을 것입니다. 또한 다양한 적응증으로 입원한 소아 환자의 대변 표본을 포함하여 생체 저장소에 저장된 생체 물질을 분석하여 분자 스크리닝을 통해 SARS-CoV-2의 검출 가능성을 결정하고 양성 사례는 추가 분석을 받게 됩니다. 아래에 지정된 대로.

SARS-CoV-2의 분자 테스트는 독일 참조 센터인 베를린의 로버트 코흐 연구소(Robert Koch Institute)의 지침에 따라 확립된 검증되고 인증된 RTQ-PCR 분석으로 수행됩니다. 임상 검체 처리는 관련 생물안전 규정에 따라 수행됩니다. 특히 대변(및 잠재적으로 비인두 면봉)을 포함한 임상 검체에서 검출된 SARS-CoV-2 병원체의 전염성 특성에 대한 테스트는 BSL3 시설(비엔나 의과대학 Dr. Willinger 교수와 협력)에서 다음을 사용하여 수행됩니다. 적절한 배양 조건에서 허용 세포주(VeroE6, CaCo2 또는 HCT116). 판독은 확립된 RTQ-PCR 테스트를 사용하여 세포 변성 효과 및 서브게놈 mRNA 발현의 문서화를 기반으로 합니다.

샘플 수집 및 취급 물류:

전향적 분석 - 대변 샘플(및 인두, 구강, 코 및 손바닥의 면봉을 포함한 다른 부위의 다양한 대조 표본)을 수집하여 중앙 실험실인 Labdia Labordiagnostik으로 옮길 때까지 4°C에서 보관합니다. 샘플은 생물안전 규정(UN3373)에 따라 신속한 배송 서비스(EMS 또는 이와 유사한 서비스)를 통해 전송되어 3일 이내에(보통 같은 날) 샘플이 도착할 수 있습니다. 샘플을 수령하면 즉시 처리되고(인산염 완충 식염수에서 바이러스 용출) 분자 분석을 받게 됩니다. 양성인 경우 대변 추출물을 가능한 한 빨리 사용하여 허용 세포(예: VeroE6) BSL3 안전 조건 하에서 바이러스의 감염 가능성이 결정됩니다. 판독값은 세포 변이 효과의 평가와 서브게놈 mRNA의 발현을 기반으로 합니다. 기본 샘플과 분리된 RNA는 연구가 끝날 때까지 -80°C의 전용 냉동고에 있는 Labdia의 전용 냉동고에 보관되며 폐기됩니다. 그후에.

소급 분석 - Labdia Labordiagnostik의 생물 저장소에 수집 및 저장된 생체 재료

윤리적 고려 및 통계:

연구에 대한 윤리적 승인 및 환자 및/또는 법적 대리인 및 직원으로부터 연구 참여에 대한 사전 동의를 얻었습니다.

개인 데이터는 진단 테스트를 수행하는 인증된 임상 실험실인 Labdia Labordiagnostik에서만 독점적으로 사용할 수 있습니다. 본 연구를 위한 데이터 처리는 일련번호를 할당하여 가명화 방식으로 수행될 것입니다.

연구의 주요 목적에 따라 Fisher의 정확 테스트는 인두 및 대변 검체에서 SARS-CoV-2 검출 가능성의 발생률을 비교하고 대변 검체에서 감염성 바이러스의 발생을 평가하기 위해 사용될 것입니다.

예상 결과 및 향후 계획:

특정 소아과 환경에서 COVID-19에 대한 데이터가 상대적으로 부족하기 때문에 제안된 연구는 위에서 설명한 임상 및 역학 관련 주제에 대한 중요한 통찰력을 제공할 것입니다. 얻은 데이터는 장내 바이러스 배출의 감염 가능성과 다양한 어린이 시설에 필요한 조치를 다루는 대규모 연구를 위한 기초가 될 것입니다.

특히 대변(및 잠재적으로 비인두 면봉)을 포함한 임상 검체에서 검출된 SARS-CoV-2 병원체의 감염 특성에 대한 테스트는 적절한 배양 조건에서 허용 세포주(VeroE6, CaCo2 또는 HCT116)를 사용하여 수행됩니다. 판독은 확립된 RTQ-PCR 테스트를 사용하여 세포 변성 효과 및 서브게놈 mRNA 발현의 문서화를 기반으로 합니다.

일반적으로 샘플 수집은 병원 입원 시 각 환자의 단일 시점에서 수행됩니다. 연구의 예상 부분 내에서 바이러스가 대변으로 배출되는 COVID-19 환자로부터 후속 샘플을 수집할 것입니다. 세포 변성 효과 및 서브게놈 mRNA의 발현을 평가하기 위해 가능할 때마다 새로운 샘플을 사용합니다. 다른 모든 경우에는 샘플을 -80°C에서 동결하고 나중에 확립된 프로토콜을 사용하여 분석합니다.

임상적 의미:

질병 증상을 나타내지 않을 수 있는 어린이의 장기간 장 SARS-CoV-2 배출이 명백히 일반적으로 발생하기 때문에, 이 추정되는 바이러스 전파 방식이 임상 및 역학적 관련성이 있는지 여부를 이해하는 것이 가장 중요합니다. 적절한 보호 조치를 개발하기 위해. SARS-CoV-2 확산 억제를 위한 현재 및 미래의 접근 방식을 위해서는 전송 방식을 규명하는 것이 중요합니다.