De correlaties tussen HPV L1-specifieke immunologische responsen bij patiënten met baarmoederhalskanker en cervicale intra-epitheliale neoplasie (CIN) en hun prognose

Baarmoederhalskanker is het meest voorkomende neoplasma bij vrouwen in Taiwan en in de wereld. Baarmoederhalskanker treft elk jaar een half miljoen vrouwen en resulteert in ongeveer 200.000 wereldwijd en het treft ook ongeveer 2.700 vrouwen en ongeveer 1.000 vrouwen sterven elk jaar aan baarmoederhalskanker en in Taiwan. Er zijn sterke aanwijzingen dat deze kanker voor 100% kan worden toegeschreven aan een infectie met bepaalde typen humaan papillomavirus (HPV); in feite heeft de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) zeer recent erkend dat deze kanker wordt veroorzaakt door HPV. Er zijn ongeveer 100 verschillende HPV-typen, waarvan ongeveer 40 typen die het anogenitale kanaal infecteren en cervicale laesies en baarmoederhalskanker veroorzaken, High Risk HPV worden genoemd (d.w.z. HR-HPV-16, -18, -31, -33 en -58). De afgelopen jaren is er overtuigend bewijs dat infectie met humaan papillomavirus (HPV) een belangrijke etiologische factor is bij de ontwikkeling van cervicale intra-epitheliale neoplasie (CIN) en cervicaal carcinoom.

Zoals bij de meeste door virussen veroorzaakte ziekten, speelt een adequate immuunrespons waarschijnlijk een sleutelrol bij het opruimen van HPV-infecties en HPV-gerelateerde laesies. Deze aanname komt voort uit zowel epidemiologische studies als diermodellen. Immuungecompromitteerde patiënten zoals HIV-geïnfecteerde vrouwen, ontvangers van orgaantransplantaties en patiënten die lijden aan andere vormen van maligniteiten, lopen een hoger risico op het ontwikkelen van CIN-laesies en invasieve baarmoederhalskanker. Bovendien hebben verschillende onderzoeken het bestaan ​​van natuurlijke HPV-specifieke immuniteit bij mensen aangetoond. Immuunresponsen van de gastheer zijn inderdaad van cruciaal belang bij virusgerelateerde infectieziekten. De immuunrespons tegen HPV-antigenen is beperkt door humaan leukocytenantigeen. Bijgevolg kan het HLA klasse I en II fenotype gecorreleerd zijn met een effectieve immuunrespons tegen HPV-geassocieerde cervicale laesies. Er kan worden voorgesteld dat verschillen in de herkenning van vreemd antigeen, zoals die welke worden bijgedragen door allelen op de HLA klasse I- of II-loci, het risico op het ontwikkelen van baarmoederhalskanker beïnvloeden. Studies door verschillende groepen naar verbanden tussen bepaalde HLA-allelen en gevoeligheid voor of bescherming tegen CIN-laesies en cervicaal carcinoom, onthullen uiteenlopende conclusies en rechtvaardigen verder onderzoek.

De meeste potentieel oncogene, persistente, langdurige HPV-infecties induceren een antilichaamrespons tegen viruseiwitten die kan worden gedetecteerd met een ELISA-test en een goede indicator kan zijn van zowel vroegere als huidige infecties en chronische actieve infectie, geassocieerd met de aanwezigheid van cervicale laesies en het hoge risico op het krijgen van baarmoederhalskanker. Er is zelfs gemeld dat vrouwen die seropositief zijn voor HPV-16 een hoger risico lopen op het ontwikkelen van baarmoederhalskanker dan seronegatieve vrouwen. L1-virale capside-eiwitten zijn een van de doelwitten voor antilichamen die worden geïnduceerd door aanhoudende HPV-genitale infectie.

Het L1-eiwit vertegenwoordigt meer dan 90% van het totale eiwit op het oppervlak van het virus. Dit eiwit kan zichzelf samenstellen en virusachtige deeltjes (VLP's) vormen. VLP's, voornamelijk type 16, zijn algemeen gebruikt voor het bestuderen van de antilichaamrespons die wordt veroorzaakt door genitale HPV-infectie. De aanwezigheid van VLP-antilichamen is stabiel in de tijd, gecorreleerd met het aantal seksuele partners en geassocieerd met aanhoudende infectie, virale belasting en ontwikkeling van neoplasische laesies; dit wordt zelden gevonden bij patiënten die lijden aan voorbijgaande infecties. Seropositiviteit komt vaker voor bij patiënten die zijn geëvolueerd naar CIN III en invasieve kanker dan bij patiënten die lijden aan CIN I of CIN II en de antilichaamrespons is significant hoger bij vrouwen met een hogere viral load dan bij vrouwen met een lagere viral load. Prospectieve onderzoeken hebben aangetoond dat 70-90% van de met HPV-16 geïnfecteerde vrouwen seroconversie vertoont tussen 6 en 18 maanden nadat HPV-DNA is gedetecteerd en dat dit zelden voorkomt bij patiënten bij wie is vastgesteld dat ze tijdelijk HPV-DNA hebben.

Andere serologische onderzoeken hebben echter aangetoond dat 20-50% van de vrouwen die lijden aan HPV-geassocieerde laesies, met HPV-DNA-aanwezigheid, geen detecteerbare niveaus van anti-VLP-antilichamen vertonen; dit komt mede door het ontbreken van een geoptimaliseerde test en het feit dat de reactiviteit van deze antilichamen typespecifiek is voor het virus. Onlangs is een geoptimaliseerde op VLP gebaseerde ELISA-test gerapporteerd die een gevoeligheid van 93% en een specificiteit van 98,5% laat zien voor het maken van onderscheid tussen positieve en negatieve controlesera. Er was echter geen melding om de antilichaamrespons te evalueren bij patiënten met HPV-geïnfecteerde cervicale laesies en met de prognose van deze patiënten.

In dit voorstel willen we dus de anti-L1-antilichamen van verschillende HPV-typen onderzoeken bij Taiwanese vrouwen met HPV-gerelateerde CIN of baarmoederhalskanker. De doelstellingen van dit voorstel zijn 1) het aanpakken van de immunologische reacties op HPV tussen CIN- en baarmoederhalskankerpatiënten. , 2) om de correlatie tussen immunologische reacties op HPV en de ernst van de ziekte van baarmoederhalskanker op te helderen., 3) om de correlatie tussen immunologische reacties op HPV en de prognose van patiënten met baarmoederhalskanker te evalueren.

De monsters van de sera van de patiënten werden verzameld op de dag van de operatie. 2. De seramonsters werden ingevroren bij -20°C tot analyse. 3. De sera-monsters worden naar het laboratorium verzonden. van het bedrijf Merck in de VS. 4. Serologische HPV-assay Er zal een competitieve radio-immunoassay, ontwikkeld door Merck Research Laboratories, worden gebruikt en uitgevoerd om serum-HPV-6-, 11-, 16-, 18-, 31-, 33-, 45-, 51-, 52-, 58-, 59- of 68-antilichamen te kwantificeren in Merck-onderzoekslaboratoria (12). De resultaten worden afgelezen van een standaardcurve, gecorrigeerd voor verdunning en gerapporteerd in willekeurige eenheden (milli-Merck Units of mMU per milliliter). Een vaste grenswaarde van 5,9 mMU per milliliter (afgeleid door het herhaaldelijk testen van een panel van positieve en negatieve monsters tegen de standaardcurve) zal worden gebruikt om de HPV-6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52 te bepalen , 58, 59 of 68 serologische status van de vrouwen.