Korelacje między odpowiedziami immunologicznymi specyficznymi dla HPV L1 u pacjentek z rakiem szyjki macicy i śródnabłonkową neoplazją szyjki macicy (CIN) a ich rokowaniem

Rak szyjki macicy jest najczęstszym nowotworem kobiet na Tajwanie i na świecie. Rak szyjki macicy dotyka każdego roku pół miliona kobiet i powoduje około 200 000 na całym świecie, a także wpływa na około 2700 kobiet i około 1000 kobiet umierających na raka szyjki macicy każdego roku oraz na Tajwanie. Istnieją mocne dowody sugerujące, że rak ten można w 100% przypisać zakażeniu niektórymi typami wirusa brodawczaka ludzkiego (HPV); w rzeczywistości Światowa Organizacja Zdrowia (WHO) niedawno uznała, że ​​rak ten jest powodowany przez HPV. Istnieje około 100 różnych typów HPV, z których około 40 typów infekujących drogi odbytowo-płciowe i powodujących zmiany szyjki macicy i raka szyjki macicy nazwano HPV wysokiego ryzyka (tj. HR-HPV-16, -18, -31, -33 i -58). Z ostatnich lat istnieją przekonujące dowody na to, że zakażenie wirusem brodawczaka ludzkiego (HPV) jest głównym czynnikiem etiologicznym rozwoju śródnabłonkowej neoplazji szyjki macicy (CIN) i raka szyjki macicy.

Podobnie jak w przypadku większości chorób wywoływanych przez wirusy, odpowiednia odpowiedź immunologiczna może odgrywać kluczową rolę w usuwaniu infekcji HPV i zmian związanych z HPV. Założenie to potwierdzają zarówno badania epidemiologiczne, jak i modele zwierzęce. Pacjenci z obniżoną odpornością, tacy jak kobiety zakażone wirusem HIV, biorcy narządów i pacjenci cierpiący na inne formy nowotworów złośliwych, są bardziej narażeni na rozwój zmian CIN i inwazyjnego raka szyjki macicy. Co więcej, kilka badań potwierdza istnienie naturalnej odporności specyficznej dla HPV u ludzi. Odpowiedzi immunologiczne gospodarza są rzeczywiście krytyczne w chorobach zakaźnych związanych z wirusami. Odpowiedź immunologiczna przeciwko antygenom HPV jest ograniczona ludzkimi antygenami leukocytarnymi. W konsekwencji fenotyp HLA klasy I i II może być skorelowany ze skuteczną odpowiedzią immunologiczną przeciwko zmianom szyjki macicy związanym z HPV. Można zaproponować, że różnice w rozpoznawaniu obcego antygenu, takie jak te spowodowane allelami w loci HLA klasy I lub II, wpływają na ryzyko rozwoju raka szyjki macicy. Badania różnych grup dotyczące powiązań między niektórymi allelami HLA a podatnością lub ochroną przed zmianami CIN i rakiem szyjki macicy ujawniają różne wnioski i uzasadniają dalsze badania.

Większość potencjalnie onkogennych, trwałych, długotrwałych infekcji HPV indukuje odpowiedź przeciwciał przeciwko białkom wirusa, którą można wykryć testem ELISA i może być dobrym wskaźnikiem przebytych, jak i obecnych infekcji oraz przewlekłej aktywnej infekcji, związanej z obecnością zmian szyjki macicy oraz wysokie ryzyko zachorowania na raka szyjki macicy. W rzeczywistości doniesiono, że kobiety seropozytywne w kierunku HPV-16 są bardziej narażone na rozwój raka szyjki macicy niż kobiety seronegatywne. Białka kapsydu wirusa L1 są jednym z celów dla przeciwciał indukowanych przez przetrwałą infekcję narządów płciowych HPV.

Białko L1 stanowi ponad 90% całkowitego białka na powierzchni wirusa. Białko to jest w stanie złożyć się, tworząc cząstki wirusopodobne (VLP). VLP, głównie typu 16, były szeroko stosowane do badania odpowiedzi przeciwciał indukowanej przez infekcję narządów płciowych HPV. Obecność przeciwciał przeciw VLP jest stabilna w czasie, skorelowana z liczbą partnerów seksualnych i związana z przetrwałą infekcją, wiremią i rozwojem zmian nowotworowych; jest to rzadko spotykane u pacjentów cierpiących na przejściowe infekcje. Seropozytywność występuje częściej u pacjentów, u których doszło do progresji do CIN III i raka inwazyjnego, niż u pacjentów cierpiących na CIN I lub CIN II, a odpowiedź przeciwciał jest znacznie wyższa u kobiet z wyższym wiremią niż u kobiet z niższym wiremią. Badania prospektywne wykazały, że 70-90% kobiet zakażonych HPV-16 przechodzi serokonwersję między 6 a 18 miesiącami po wykryciu DNA HPV i że rzadko zdarza się to u pacjentek, u których wykryto przejściowe DNA HPV.

Jednak inne badania serologiczne wykazały, że 20-50% kobiet cierpiących na zmiany związane z HPV, z obecnością DNA HPV, nie wykazuje wykrywalnych poziomów przeciwciał anty-VLP; jest to częściowo spowodowane brakiem zoptymalizowanego testu oraz faktem, że reaktywność tych przeciwciał jest typowo specyficzna dla wirusa. Zoptymalizowany test ELISA oparty na VLP został ostatnio zgłoszony, wykazując 93% czułość i 98,5% specyficzność w rozróżnianiu surowic kontroli dodatniej i ujemnej. Nie było jednak doniesień oceniających odpowiedź przeciwciał u pacjentek ze zmianami szyjki macicy zakażonych HPV oraz rokowanie u tych pacjentek.

Tak więc w niniejszej propozycji chcielibyśmy zbadać przeciwciała anty-L1 różnych typów HPV wśród tajwańskich kobiet z CIN lub rakiem szyjki macicy związanym z HPV. Celem tej propozycji jest 1) zajęcie się odpowiedziami immunologicznymi na HPV między pacjentkami z CIN a rakiem szyjki macicy. , 2) wyjaśnienie korelacji między odpowiedziami immunologicznymi na HPV a ciężkością raka szyjki macicy., 3) ocena korelacji między odpowiedziami immunologicznymi na HPV a rokowaniem pacjentek z rakiem szyjki macicy.

Próbki surowic pacjentów pobierano w dniu zabiegu. 2. Próbki surowic zamrażano w temperaturze -20°C do czasu analizy. 3. Próbki surowicy zostaną wysłane do laboratorium. firmy Merck w USA. 4. Test serologiczny HPV Kompetycyjny test radioimmunologiczny opracowany przez Merck Research Laboratories zostanie użyty i wykonany w celu ilościowego oznaczenia przeciwciał HPV-6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 58, 59 lub 68 w Laboratoria badawcze Merck (12). Wyniki zostaną odczytane z krzywej wzorcowej, skorygowane o rozcieńczenie i podane w dowolnych jednostkach (mili-Merck Units lub mMU na mililitr). Stała wartość odcięcia wynosząca 5,9 mMU na mililitr (uzyskana przez wielokrotne testowanie panelu próbek dodatnich i ujemnych w stosunku do krzywej standardowej) zostanie wykorzystana do określenia HPV-6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52 , 58, 59 lub 68 status serologiczny kobiet.