Le correlazioni tra le risposte immunologiche specifiche dell'HPV L1 nei pazienti con carcinoma cervicale e neoplasia intraepiteliale cervicale (CIN) e la loro prognosi

Il cancro cervicale è la neoplasia più frequente delle donne a Taiwan e nel mondo. Il cancro cervicale colpisce mezzo milione di donne ogni anno e si traduce in circa 200.000 in tutto il mondo e colpisce anche circa 2.700 donne e circa 1.000 donne che muoiono di cancro cervicale ogni anno ea Taiwan. Esistono prove evidenti che suggeriscono che questo tumore sia attribuibile al 100% all'infezione con alcuni tipi di papillomavirus umano (HPV); infatti, l'Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) ha recentemente riconosciuto che questo tumore è causato dall'HPV. Esistono circa 100 diversi tipi di HPV, di cui circa 40 tipi che infettano il tratto anogenitale e causano lesioni cervicali e cancro cervicale sono stati chiamati HPV ad alto rischio (ovvero HR-HPV-16, -18, -31, -33 e -58). Da anni recenti, ci sono prove convincenti che l'infezione da papillomavirus umano (HPV) è un importante fattore eziologico nello sviluppo della neoplasia intraepiteliale cervicale (CIN) e del carcinoma cervicale.

Come nella maggior parte delle malattie indotte da virus, è probabile che un'adeguata risposta immunitaria svolga un ruolo chiave nell'eliminazione delle infezioni da HPV e delle lesioni correlate all'HPV. Questa ipotesi è confermata sia da studi epidemiologici che da modelli animali. I pazienti immunocompromessi come le donne con infezione da HIV, i pazienti sottoposti a trapianto di organi e i pazienti affetti da altre forme di tumori maligni sono a maggior rischio di sviluppare lesioni CIN e carcinoma cervicale invasivo. Inoltre, diversi studi stabiliscono l'esistenza di un'immunità naturale specifica per l'HPV nell'uomo. Le risposte immunitarie dell'ospite sono infatti fondamentali nelle malattie infettive correlate al virus. La risposta immunitaria contro gli antigeni HPV è limitata all'antigene leucocitario umano. Di conseguenza, il fenotipo HLA di classe I e II può essere correlato con un'efficace risposta immunitaria contro le lesioni cervicali associate all'HPV. Differenze nel riconoscimento dell'antigene estraneo, come quelle fornite dagli alleli nei loci HLA di classe I o II, potrebbero essere proposte per influenzare il rischio di sviluppare il cancro cervicale. Studi condotti da diversi gruppi sulle associazioni tra determinati alleli HLA e suscettibilità o protezione contro lesioni CIN e carcinoma cervicale, rivelano conclusioni diverse e giustificano ulteriori ricerche.

La maggior parte delle infezioni da HPV potenzialmente oncogeniche, persistenti ea lungo termine inducono una risposta anticorpale contro le proteine ​​virali che può essere rilevata dal test ELISA e può essere un buon indicatore di infezioni pregresse, attuali e croniche attive, associate alla presenza di lesioni cervicali e l'alto rischio di contrarre il cancro cervicale. Infatti, è stato riportato che le donne sieropositive per HPV-16 presentano un rischio maggiore di sviluppare carcinoma cervicale rispetto alle donne sieronegative. Le proteine ​​del capside virale L1 sono uno dei bersagli per gli anticorpi indotti dall'infezione genitale persistente da HPV.

La proteina L1 rappresenta oltre il 90% della proteina totale sulla superficie del virus. Questa proteina è in grado di assemblarsi, formando particelle simili a virus (VLP). Le VLP, principalmente di tipo 16, sono state ampiamente utilizzate per studiare la risposta anticorpale indotta dall'infezione genitale da HPV. La presenza di anticorpi VLP è stabile nel tempo, correlata al numero di partner sessuali e associata a infezione persistente, carica virale e sviluppo di lesioni neoplastiche; questo si riscontra raramente in pazienti affetti da infezioni transitorie. La sieropositività si verifica più frequentemente nei pazienti che sono progrediti a CIN III e cancro invasivo rispetto a quelli affetti da CIN I o CIN II e la risposta anticorpale è significativamente più alta nelle donne con una carica virale più elevata rispetto a quelle con carica virale inferiore. Studi prospettici hanno dimostrato che il 70-90% delle donne infette da HPV-16 sono sieroconvertite tra 6 e 18 mesi dopo che il DNA dell'HPV è stato rilevato e che ciò si verifica raramente in pazienti con DNA dell'HPV transitorio.

Tuttavia, altri studi sierologici hanno dimostrato che il 20-50% delle donne affette da lesioni associate all'HPV, con presenza di DNA dell'HPV, non presenta livelli rilevabili di anticorpi anti-VLP; ciò è in parte dovuto alla mancanza di un test ottimizzato e al fatto che la reattività di questi anticorpi è specifica per il tipo di virus. Recentemente è stato segnalato un test ELISA ottimizzato basato su VLP che mostra una sensibilità del 93% e una specificità del 98,5% per la discriminazione tra sieri di controllo positivi e negativi. Tuttavia, non vi è stato alcun rapporto per valutare la risposta anticorpale nei pazienti con lesioni cervicali infette da HPV e con la prognosi di questi pazienti.

Quindi, nella presente proposta, vorremmo esaminare gli anticorpi anti-L1 di vari tipi di HPV tra le donne taiwanesi con CIN correlato all'HPV o cancro cervicale. Gli scopi di questa proposta sono 1) affrontare le risposte immunologiche all'HPV tra CIN e pazienti con cancro cervicale. , 2) per chiarire la correlazione tra le risposte immunologiche all'HPV e la gravità della malattia del cancro cervicale., 3) per valutare la correlazione tra le risposte immunologiche all'HPV e la prognosi dei pazienti con cancro cervicale.

I campioni di siero dei pazienti sono stati raccolti il ​​giorno dell'intervento. 2. I campioni di siero sono stati congelati a -20°C fino all'analisi. 3. I campioni di siero verranno spediti al laboratorio. della società Merck negli Stati Uniti. 4. Test sierologico dell'HPV Verrà utilizzato ed eseguito un test radioimmunologico competitivo sviluppato dai Merck Research Laboratories per quantificare gli anticorpi sierici HPV-6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 58, 59 o 68 in Laboratori di ricerca Merck (12). I risultati verranno letti da una curva standard, corretti per la diluizione e riportati in unità arbitrarie (milli-Merck Unit o mMU per millilitro). Per determinare l'HPV-6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52 verrà utilizzato un cutoff fisso di 5,9 mMU per millilitro (derivato testando ripetutamente un pannello di campioni positivi e negativi rispetto alla curva standard) , 58, 59 o 68 stato sierologico delle donne.