Op naalden gebaseerd confocaal endomicroscopieonderzoek van pancreasmassa

Achtergrond Alvleesklierkanker is een van de meest agressieve gastro-intestinale maligniteiten, waarbij de mortaliteitscijfers nauw aansluiten bij de incidentiecijfers. De incidentie neemt toe en de prognose is somber, vooral vanwege de late diagnose en het potentieel voor metastasen. Hoewel chirurgische behandeling momenteel de enige mogelijke curatieve ingreep is, wordt helaas 80-85% van de PC-gevallen ontdekt in een laat inoperabel stadium van de ziekte. Ondanks de vooruitgang in de diagnose en behandeling van pancreaskanker is minder dan 5% van de patiënten na vijf jaar nog in leven.

Endoscopische echografie (EUS) is een zeer waardevol hulpmiddel bij de behandeling van patiënten met alvleesklierkanker. Als minimaal invasieve techniek die beeldvorming met hoge resolutie van het pancreasparenchym en omliggende structuren mogelijk maakt, wordt het beschouwd als de voorkeursmethode voor de detectie van klinisch verdachte pancreastumoren, met een negatief voorspellende waarde van bijna 100%. Eerdere studies toonden aan dat de diagnostische gevoeligheid superieur is in vergelijking met andere beeldvormende technieken, vooral in het geval van kleinere tumoren. Bovendien maakt EUS geleide fijne naaldaspiratie (EUS-FNA) mogelijk, wat momenteel wordt aanbevolen als de eerstelijnsprocedure wanneer een pathologische diagnose vereist is. EUS-FNA als bemonsteringstechniek heeft echter zijn nadelen, voornamelijk vertegenwoordigd door de relatief lage negatief voorspellende waarde bij het diagnosticeren van alvleesklierkanker. Het kan dus niet op betrouwbare wijze een diagnose van maligniteit uitsluiten en patiënten met een hoge klinische verdenking hebben meestal herhaalde FNA nodig.

Confocale laserendomicroscopie is de afgelopen jaren naar voren gekomen als een nieuwe techniek die daadwerkelijk in vivo microscopische analyse mogelijk maakt tijdens lopende endoscopie. Endomicroscopie kan worden uitgevoerd met speciale (eCLE) of met miniprobe-gebaseerde systemen (pCLE). Het is een op contrast gebaseerde techniek, waarbij het meest gebruikte middel intraveneus toegediende fluoresceïne is. Het op sonde gebaseerde endomicroscopiesysteem bestaat uit een flexibele kathetersonde die een bundel optische vezels vertegenwoordigt die is gekoppeld aan een micro-objectief, een laserscaneenheid en de besturings- en acquisitiesoftware (Cellvizio; Mauna Kea Technology, Parijs, Frankrijk). De flexibele confocale minisondes zijn speciaal ontworpen om door de werkkanalen van standaard endoscopen, galkatheters of cholangioscopen te worden gevoerd en het pCLE-systeem kan dus eenvoudig in elke endoscopie-eenheid worden geïntegreerd. Het principe van de techniek is gebaseerd op het feit dat een laserstraal met een gedefinieerde golflengte wordt gefocusseerd op het doelweefsel en het opgevangen signaal wordt weergegeven als 'optische biopsieën' in een enkel horizontaal vlak.

De potentiële rol van CLE is onderzocht in de pathologie van zowel het bovenste als het onderste deel van het maagdarmkanaal, en toont een goede nauwkeurigheid voor het voorspellen van de uiteindelijke histopathologische diagnose op basis van onmiddellijke evaluatie van weefsel- en vasculaire patronen. Onlangs is CLE verder gegaan dan de oppervlakkige luminale indicaties met de ontwikkeling van een nieuwe microsonde, d.w.z. een flexibele sonde die dun genoeg is om door een 19-gauge naald te gaan. Dus onder EUS-begeleiding kunnen solide organen worden benaderd voor real-time microscopische informatie. nCLE-beeldvorming van buikorganen is tot nu toe bereikt in diermodellen. De haalbaarheid van de techniek werd ook bewezen in een klinische studie en beschrijvende criteria voor de diagnose van pancreascystisch neoplasma werden ontwikkeld op basis van een multicentrische studie. Er is echter slechts een beperkt aantal gevallen van vaste massa's van de pancreas beschreven met nCLE.

Doel Het doel van de voorgestelde studie is om confocale beeldvormingscriteria te beschrijven voor pancreasmassa's, lymfeklieren of levermetastasen geïdentificeerd tijdens EUS-procedures die worden uitgevoerd voor pancreaskankerstadiëring (EUS-nCLE), terwijl ook de haalbaarheid en veiligheid van nCLE-onderzoek wordt geëvalueerd. De hypothese is dat EUS-nCLE gerichte weefselbemonstering van pancreaslaesies mogelijk zou kunnen maken, wat resulteert in een nauwkeurigere diagnose. Met verdere validatie van de techniek kon real-time pathologische diagnose worden verkregen met onmiddellijke start van de adequate therapie na een enkel onderzoek.

Patiënten De studie zal prospectief patiënten omvatten die naar onze afdeling zijn verwezen voor EUS en EUS-FNA met vermoedelijke pancreasmassa's gedurende een periode van 12 maanden. De indicatie voor dit onderzoek zal gebaseerd zijn op de klinische geschiedenis van de patiënt en eerdere beeldvormende onderzoeken (abdominale echografie, CT-scan, MRI).

Patiënten zullen worden geselecteerd op basis van de volgende criteria die tijdens het onderzoek worden gebruikt:

De gegevens die voor elke deelnemer worden verzameld, omvatten:

• Persoonsgegevens (naam, achternaam, leeftijd, geslacht)
• EUS-variabelen (tumorkenmerken)
• Histologische en immunohistochemische bevindingen (definitieve diagnose)

Beeldvormende onderzoeken Alle patiënten met een vermoeden (klinisch, US, CT/MRI) van pancreasmassa's worden door EUS, nCLE en EUS-FNA geëvalueerd voor pathologische diagnose.

Voor EUS-onderzoek zullen lineaire instrumenten worden gebruikt om een ​​volledig onderzoek van de pancreas uit te voeren.

Tumorkarakteristieken (echogeniciteit, echostructuur, grootte, vasculaire invasie) zullen worden beschreven.

De aanwezigheid van regionale lymfeklieren wordt gerapporteerd met hun maximale grootte, echogeniciteit, vorm en marges.

Identificatie van levermetastasen zal ook worden bekeken.

EUS-nCLE wordt uitgevoerd na EUS-identificatie van de alvleeskliertumor / lymfeklier / levermetastase:

De confocale microprobe wordt voorgeladen in een 19G FNA-naald zoals eerder beschreven en onder EUS-begeleiding in de laesie gebracht.

nCLE-onderzoek volgt na intraveneuze toediening van het contrastmiddel (2,5 ml fluoresceïne 10%).

Beeldgegevens worden digitaal opgeslagen voor offline analyse. EUS-FNA zal ook worden uitgevoerd na beeldacquisitie voor cytologie-uitstrijkjes en celblokken om een ​​definitieve pathologische diagnose mogelijk te maken Confocale beelden zullen tijdens het onderzoek door de hoofdonderzoeker worden geanalyseerd, met klinische en andere procedurele informatie in gedachten. In een tweede stap offline analyse zullen de correlaties tussen representatieve confocale beelden en klassieke hematoxyline- en eosinesecties worden geïdentificeerd.

Definitieve diagnose De definitieve diagnose zal gebaseerd zijn op EUS-FNA-cytologie en/of histologische monsters bij die patiënten die verder zullen worden doorverwezen voor een operatie. Pathologiemonsters verkregen uit duodeno-pancreatectomieën of caudale pancreatectomieën uitgevoerd met curatieve bedoelingen, evenals microhistologische fragmenten verkregen via EUS-FNA-biopsie zullen worden verwerkt door paraffine-inbedding met gebruikelijke kleuringen (haematoxyline-eosine), met daaropvolgende immuunhistochemie waar nodig.

Voor de patiënten zonder positieve cytologie of histologie zal de diagnose gebaseerd zijn op EUS-tumorkenmerken en andere relevante informatie (klinische, beeldvormingstesten) met een follow-up van ten minste zes maanden.