Haimamassan neulapohjainen konfokaalinen endomikroskopia

Tausta Haimasyöpä on yksi aggressiivisimmista maha-suolikanavan pahanlaatuisista sairauksista, jonka kuolleisuus seuraa tarkasti ilmaantuvuuslukuja. Ilmaantuvuus lisääntyy ja ennuste on synkkä erityisesti myöhäisen diagnoosin ja metastaattisen mahdollisuuden vuoksi. Vaikka kirurginen hoito on tällä hetkellä ainoa mahdollinen parantava toimenpide, 80–85 % PC-tapauksista havaitaan valitettavasti taudin myöhäisissä ei-leikkausvaiheissa. Huolimatta haimasyövän diagnosoinnin ja hoidon edistymisestä alle 5 % potilaista on elossa viiden vuoden iässä.

Endoskooppinen ultraääni (EUS) on erittäin arvokas väline haimasyöpäpotilaiden hoidossa. Minimaalisesti invasiivisena tekniikkana, joka mahdollistaa haiman parenkyymin ja sitä ympäröivien rakenteiden korkearesoluutioisen kuvantamisen, sitä pidetään parhaana menetelmänä kliinisesti epäiltyjen haimakasvainten havaitsemiseen, negatiivisen ennustusarvon ollessa lähellä 100 %. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet sen diagnostisen herkkyyden olevan parempi verrattuna muihin kuvantamistekniikoihin, erityisesti pienempien kasvainten tapauksessa. Lisäksi EUS mahdollistaa ohjatun ohuen neulan aspiraation (EUS-FNA), jota suositellaan tällä hetkellä ensisijaiseksi toimenpiteeksi aina, kun tarvitaan patologista diagnoosia. EUS-FNA:lla näytteenottotekniikana on kuitenkin haittoja, joita edustaa pääasiassa suhteellisen alhainen negatiivinen ennustearvo haimasyövän diagnosoinnissa. Näin ollen se ei voi luotettavasti sulkea pois pahanlaatuisuuden diagnoosia, ja potilaat, joilla on suuri kliininen epäily, tarvitsevat yleensä toistuvan FNA:n.

Konfokaalinen laserendomikroskopia on noussut viime vuosina uudeksi tekniikaksi, joka todella mahdollistaa in vivo mikroskooppisen analyysin käynnissä olevan endoskopian aikana. Endomikroskopia voidaan suorittaa joko erillisillä (eCLE) tai minianturipohjaisilla järjestelmillä (pCLE). Se on varjoainepohjainen tekniikka, jossa laajimmin käytetty aine on suonensisäisesti annettava fluoreseiini. Koettimeen perustuva endomikroskopiajärjestelmä koostuu joustavasta katetrianturista, joka edustaa optisten kuitujen nippua, joka on yhdistetty mikroobjektiiviin, laserskannausyksiköstä ja ohjaus- ja hankintaohjelmistosta (Cellvizio; Mauna Kea Technology, Pariisi, Ranska). Joustavat konfokaaliset minikoettimet on erityisesti suunniteltu kuljetettavaksi tavallisten endoskooppien, sappikatetrien tai kolangioskooppien työkanavien läpi, joten pCLE-järjestelmä voidaan helposti integroida mihin tahansa endoskopiayksikköön. Tekniikan periaate perustuu siihen, että määritellyn aallonpituuden omaava lasersäde kohdistetaan kohdekudokseen ja uudelleen siepattu signaali näytetään "optisina biopsiina" yhdessä vaakatasossa.

CLE:n mahdollista roolia on tutkittu sekä ylemmän että alemman maha-suolikanavan patologiassa, mikä osoittaa hyvää tarkkuutta lopullisen histopatologisen diagnoosin ennustamisessa, joka perustuu kudos- ja verisuonimallien välittömään arviointiin. Viime aikoina CLE on ylittänyt pinnalliset luminaaliset indikaatiot kehittämällä uuden mikrosondin, eli joustavan anturin, joka on tarpeeksi ohut, jotta se voidaan viedä 19 gaugen neulan läpi. Siten EUS:n ohjauksessa kiinteisiin elimiin voidaan saada reaaliaikaista mikroskooppista tietoa. Vatsan elinten nCLE-kuvaus on toistaiseksi saavutettu eläinmalleilla. Tekniikan käyttökelpoisuus todistettiin myös kliinisessä tutkimuksessa ja haiman kystisen kasvaimen diagnosointiin kehitettiin kuvaavat kriteerit monikeskustutkimuksessa. Kuitenkin vain rajoitettu määrä haiman kiinteitä massoja on kuvattu nCLE:llä.

Tavoite Ehdotetun tutkimuksen tavoitteena on kuvata haimasyövän staging (EUS-nCLE) EUS-toimenpiteiden yhteydessä tunnistetut haimamassat, imusolmukkeet tai maksametastaasien konfokaaliset kuvantamiskriteerit sekä arvioida nCLE-tutkimuksen toteutettavuutta ja turvallisuutta. Oletuksena on, että EUS-nCLE voisi mahdollistaa kohdistetun kudosnäytteiden oton haimavaurioista, mikä johtaa tarkempaan diagnoosiin. Kun tekniikkaa validoidaan edelleen, voidaan saada reaaliaikainen patologinen diagnoosi aloittamalla välittömästi riittävä hoito yhden tutkimuksen jälkeen.

Potilaat Tutkimukseen otetaan mukaan potilaita, jotka on lähetetty osastollemme EUS:n ja EUS-FNA:n vuoksi epäiltyjen haimamassan vuoksi 12 kuukauden aikana. Tämän tutkimuksen käyttöaihe perustuu potilaan kliiniseen historiaan ja aikaisempiin kuvantamistutkimuksiin (vatsan ultraääni, TT-skannaus, MRI).

Potilaat valitaan seuraavien koko tutkimuksen ajan käytettyjen kriteerien mukaan:

Jokaisesta osallistujasta kerätyt tiedot sisältävät:

• Henkilötiedot (nimi, sukunimi, ikä, sukupuoli)
• EUS-muuttujat (kasvaimen ominaisuudet)
• Histologiset ja immunohistokemialliset löydökset (lopullinen diagnoosi)

Kuvantamiskokeet Kaikki potilaat, joilla on epäilyksiä (kliininen, US, CT/MRI) haimamassasta, arvioidaan EUS:n, nCLE:n ja EUS-FNA:n avulla patologista diagnoosia varten.

EUS-tutkimuksessa käytetään lineaarisia instrumentteja haiman täydelliseen tutkimukseen.

Tuumorin ominaisuudet (kaikukyky, kaikurakenne, koko, verisuonten tunkeutuminen) kuvataan.

Alueellisten imusolmukkeiden esiintyminen raportoidaan niiden enimmäiskoon, kaikukyvyn, muodon ja marginaalien kanssa.

Myös maksametastaasien tunnistamista tarkastellaan.

EUS-nCLE suoritetaan haiman kasvaimen/imusolmukkeen/maksa metastaasin EUS-tunnistuksen jälkeen:

Konfokaalinen mikroanturi asetetaan esiladattuna 19G FNA-neulaan, kuten aiemmin on kuvattu, ja viedään leesion sisään EUS:n ohjauksessa.

nCLE-tutkimus seuraa varjoaineen (2,5 ml fluoreseiini 10 %) laskimonsisäisen annon jälkeen.

Kuvatiedot tallennetaan digitaalisesti offline-analyysiä varten. EUS-FNA suoritetaan myös kuvanoton jälkeen sytologisia sivelynäytteitä ja solulohkoja varten lopullisen patologisen diagnoosin mahdollistamiseksi. Päätutkija analysoi konfokaalisia kuvia tutkimuksen aikana kliiniset ja muut menettelyyn liittyvät tiedot huomioon ottaen. Toisessa vaiheessa offline-analyysissä tunnistetaan edustavien konfokaalisten kuvien ja klassisten hematoksyliini- ja eosiinileikkeiden väliset korrelaatiot.

Lopullinen diagnoosi Lopullinen diagnoosi perustuu EUS-FNA-sytologiaan ja/tai histologisiin näytteisiin niiltä potilailta, jotka lähetetään edelleen leikkaukseen. Pohjukais-haiman tai kaudaalisen haiman poistoleikkauksista saadut patologiset näytteet sekä EUS-FNA-biopsialla saadut mikrohistologiset fragmentit käsitellään parafiiniin upottamalla tavallisilla värjäyksillä (hematoksyliini-eosiini) ja tarvittaessa immuunihistokemialla.

Potilaille, joilla ei ole positiivista sytologiaa tai histologiaa, diagnoosi perustuu EUS-kasvaimen ominaisuuksiin ja muihin asiaankuuluviin tietoihin (kliiniset, kuvantamistutkimukset) ja seurantaa vähintään kuuden kuukauden ajan.