Folinezuur en vasculaire reactiviteit bij HIV

Opzet en deelnemers Dit was een gerandomiseerde, dubbelblinde, placebogecontroleerde studie. In aanmerking komende deelnemers waren personen met een bekende hiv-ziekte volgens de herziene criteria van de Centers for Disease Control, 18 jaar of ouder, gedurende ten minste 6 maanden ART gebruikt, met een niet-detecteerbare virale belasting (minder dan 50 kopieën/ml) en CD4-tellingen van meer dan 200 cellen /mm3. Uitsluitingscriteria waren diabetes mellitus, elke actieve infectie, leverziekte, nierziekte, voorgeschiedenis van hart- en vaatziekten of ongecontroleerde hypertensie, zwangerschap, gebruik van illegale drugs en psychische aandoeningen die begrip en samenwerking met het onderzoek in gevaar zouden brengen. Patiënten die momenteel tabak gebruiken, voedingssupplementen gebruiken (zoals foliumzuur of antioxidanten) of vrouwen die hormoonvervangende therapie gebruiken, werden ook uitgesloten. Alle medicijnen die regelmatig werden gebruikt, werden gedurende de onderzoeksperiode gehandhaafd. Het protocol werd goedgekeurd door de commissie voor ethiek in onderzoek van het Hospital de Clínicas de Porto Alegre en alle deelnemers gaven schriftelijke geïnformeerde toestemming.

Onderzoekssettings Het onderzoek vond plaats in de hiv-polikliniek van het Hospital de Clínicas de Porto Alegre, een nationaal referentiecentrum voor hiv/aids in Zuid-Brazilië, van augustus 2009 tot september 2011.

Interventies Deelnemers werden willekeurig toegewezen aan een behandeling van 4 weken met folinezuur (n=15) of placebo (n=15). De suppletieregimes van de studie bestonden uit capsules met 5 mg folinezuur of placebo. Deelnemers kregen 1 fles met 30 capsules. De proefpersonen kregen de instructie om 's ochtends dagelijks 1 capsule in te nemen.

Uitkomsten De primaire uitkomstmaat was de beoordeling van de vasculaire respons van de arteria brachialis tijdens reactieve hyperemie. Secundaire uitkomsten waren de veranderingen op de biochemische en hemodynamische variabelen.

Vasculaire metingen Na een nacht vasten werden de beoordelingen uitgevoerd in een rustige kamer met temperatuurregeling (20-22°C), met de proefpersonen in rugligging. Gedurende het hele protocol werden bloeddruk (BP) en hartslag gemeten in de dominante arm met behulp van een gekalibreerd oscillometrisch automatisch apparaat (Dinamap 1846 SX/P; Critikon, Florida, VS). De bloedstroom in de onderarm werd gemeten door middel van veneuze occlusieplethysmografie (D.E Hokanson, Washington, VS), in het niet-dominante ledemaat, zoals eerder beschreven. Kortom, er werd een snelle opblaasmanchet in de bovenarm gebruikt om de veneuze uitstroom af te sluiten en de handcirculatie werd gestopt door een manchet om de pols te plaatsen. Reactieve hyperemie (RH) werd geïnduceerd door een manchet in de bovenarm te plaatsen bij 250 mmHg en na 5 minuten los te laten. Alle stroomopnames werden handmatig getraceerd door een operator die blind was voor de groepen en de tijd. De reproduceerbaarheid van de flowmetingen in ons laboratorium heeft intraday- en interday-variatiecoëfficiënten van respectievelijk 6,9 en 9,2%. Na 15 minuten rust werd 2,5 mg sublinguaal isosorbidedinitraat (Isordil®, Sigma, Brazilië) toegediend als een endotheelonafhankelijke vasodilatator. Vijf minuten later werd endotheelonafhankelijke vasodilatatie van de arteria brachialis gemeten.

Laboratoriummetingen Alle monsters werden verkregen na een nacht vasten, voor en na 4 weken interventie. Voor elke proefpersoon werden de totale homocysteïneconcentratie in het plasma, serumfolaat, vitamine B12, glucose, creatinine, totaal cholesterol, high-density lipoprotein-cholesterol (HDL-C) en triglyceriden gemeten. Serumfolaat- en vitamine B12-spiegels werden gemeten door een competitieve immunoassay met behulp van directe chemiluminescentietechnologie (Bayer ADVIA Centaur, Leverkusen, Duitsland). Homocysteïnespiegels in het plasma werden ook gemeten met een competitieve immunoassay met behulp van directe chemiluminescentietechnologie (IMMULITE 2000 Siemens, Illinois, VS). Glucose, creatinine, totaal cholesterol, HDL-c en triglyceriden werden gemeten met standaard laboratoriummethoden.

Steekproefomvang en randomisatie Power-berekeningen toonden aan dat een totaal aantal van 15 deelnemers per groep in staat zou zijn om een ​​verandering van 4 ml/min/100 ml in vasculaire respons te detecteren tijdens reactieve hyperemie tussen groepen, met een power van 80% en α=0,05. Voor de toewijzing van de deelnemers werd randomisatie bereikt door een door de computer gegenereerde lijst met willekeurige getallen, en de onderzoekers bleven blind totdat het onderzoek was voltooid. Deelnemers werden willekeurig toegewezen aan placebo- of folinezuurbehandelingsgroepen. De randomisatieprocedure werd uitgevoerd in drie blokken van 10 en was gestratificeerd naar geslacht, om te zorgen voor een relatief gelijk aantal mannen en vrouwen in elke behandelingsgroep.

Folinezuur- en placebocapsules waren qua vorm, grootte en kleur niet van elkaar te onderscheiden. Ze waren voorverpakt in identieke flessen en opeenvolgend genummerd voor elke patiënt, volgens het randomisatieschema. Supplementen werden zo gecodeerd dat noch de onderzoekers, noch de deelnemers op de hoogte waren van de inhoud. Een persoon die niet bij de studie betrokken was, was de enige aan wie de identificatiecode voor de individueel verpakte flesjes met capsules was toevertrouwd.

Statistische analyse Alle variabelen werden getest op normale verdeling met de Kolmogorov-Smirnov-test. Normaal verdeelde variabelen worden uitgedrukt als gemiddelde ± SEM. Niet-normaal verdeelde variabelen worden weergegeven als mediaan (25e-75e percentiel). Basislijnvergelijkingen van groepskenmerken werden uitgevoerd door ongepaarde t-test of Mann-Whitney U-test. Om de respons na 4 weken interventie te vergelijken, werd een tweewegs variantieanalyse (ANOVA) voor herhaalde metingen (groep, tijd en interactie) gebruikt. Associaties tussen veranderingen in serumfoliumzuur en veranderingen in RH en associaties tussen veranderingen in plasmahomocysteïne en veranderingen in RH werden geëvalueerd door Spearman's rangcorrelatiecoëfficiënt. Een tweezijdige P-waarde van minder dan 0,05 werd als statistisch significant beschouwd.