Фолиевая кислота и сосудистая реактивность при ВИЧ

Дизайн и участники Это было рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Приемлемыми участниками были лица с известным заболеванием ВИЧ в соответствии с пересмотренными критериями Центров по контролю за заболеваниями, в возрасте 18 лет и старше, получавшие АРТ в течение не менее 6 месяцев, с неопределяемой вирусной нагрузкой (менее 50 копий/мл) и числом CD4 более 200 клеток. /мм3. Критериями исключения были сахарный диабет, любая активная инфекция, заболевания печени, почек, сердечно-сосудистые заболевания в анамнезе или неконтролируемая гипертензия, беременность, употребление запрещенных наркотиков и психические заболевания, которые могли поставить под угрозу понимание и сотрудничество с исследованием. Пациенты, в настоящее время употребляющие табак, принимающие какие-либо пищевые добавки (например, фолиевую кислоту или антиоксиданты) или женщины, получающие заместительную гормональную терапию, также были исключены. Все лекарственные препараты в регулярном применении поддерживались на протяжении всего периода исследования. Протокол был одобрен комитетом по этике исследований больницы Hospital de Clínicas de Porto Alegre, и все участники дали письменное информированное согласие.

Условия проведения исследования Исследование проводилось в амбулаторной клинике по лечению ВИЧ больницы Hospital de Clínicas de Porto Alegre, национального справочного центра по ВИЧ/СПИДу на юге Бразилии, с августа 2009 года по сентябрь 2011 года.

Вмешательства Участники были случайным образом распределены для 4-недельного лечения либо фолиевой кислотой (n=15), либо плацебо (n=15). Схемы приема добавок в исследовании состояли из капсул, содержащих 5 мг фолиновой кислоты или плацебо. Участникам была предоставлена ​​1 бутылка, в которой было 30 капсул. Субъектам было рекомендовано принимать по 1 капсуле в день утром.

Исходы Первичным критерием исхода была оценка сосудистых реакций плечевой артерии во время реактивной гиперемии. Вторичными исходами были изменения биохимических и гемодинамических показателей.

Сосудистые измерения После ночного голодания оценки проводились в тихой комнате с регулируемой температурой (20-22°C), в положении испытуемых на спине. На протяжении всего протокола артериальное давление (АД) и частота сердечных сокращений измерялись на ведущей руке с помощью калиброванного осциллометрического автоматического устройства (Dinamap 1846 SX/P; Critikon, Флорида, США). Кровоток в предплечье измеряли с помощью венозной окклюзионной плетизмографии (D.E. Hokanson, Вашингтон, США) в недоминантной конечности, как описано ранее. Короче говоря, на плече использовалась манжета для быстрого надувания, чтобы перекрыть венозный отток, а кровообращение в руке было остановлено путем наложения манжеты на запястье. Реактивную гиперемию (РГ) индуцировали путем наложения манжеты на плечо при 250 мм рт. ст. и отпускания через 5 мин. Все записи потоков вручную отслеживались оператором, который не знал групп и времени. Воспроизводимость измерений расхода в нашей лаборатории имеет внутрисуточный и межсуточный коэффициенты вариации 6,9 и 9,2% соответственно. После 15-минутного отдыха вводили 2,5 мг сублингвального изосорбида динитрата (Изордил®, Sigma, Бразилия) в качестве эндотелий-независимого сосудорасширяющего средства. Через пять минут измеряли эндотелийнезависимую вазодилатацию плечевой артерии.

Лабораторные измерения Все образцы были получены после ночного голодания, до и после 4 недель вмешательства. Для каждого субъекта измеряли общую концентрацию гомоцистеина в плазме, фолиевую кислоту в сыворотке, витамин B12, глюкозу, креатинин, общий холестерин, холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL-C) и триглицериды. Уровни фолиевой кислоты и витамина B12 в сыворотке измеряли с помощью конкурентного иммуноанализа с использованием прямой хемилюминесцентной технологии (Bayer ADVIA Centaur, Леверкузен, Германия). Уровни гомоцистеина в плазме также измеряли конкурентным иммуноанализом с использованием прямой хемилюминесцентной технологии (IMMULITE 2000 Siemens, Иллинойс, США). Глюкоза, креатинин, общий холестерин, HDL-c и триглицериды измерялись стандартными лабораторными методами.

Размер выборки и рандомизация Расчеты мощности показали, что общее количество участников в группе, составляющее 15 человек, сможет обнаружить изменение сосудистой реакции на 4 мл/мин/100 мл во время реактивной гиперемии между группами с мощностью 80% и α=0,05. Для распределения участников была достигнута рандомизация с помощью сгенерированного компьютером списка случайных чисел, и исследователи оставались слепыми до завершения исследования. Участники были случайным образом распределены в группы лечения плацебо или фолиевой кислотой. Процедура рандомизации проводилась в три блока по 10 человек и была стратифицирована по полу, чтобы обеспечить относительно равное количество мужчин и женщин в каждой группе лечения.

Капсулы фолиевой кислоты и плацебо были неразличимы по форме, размеру и цвету. Они были предварительно упакованы в идентичные флаконы и последовательно пронумерованы для каждого пациента в соответствии с графиком рандомизации. Добавки были закодированы так, что ни исследователи, ни участники не знали о содержании. Лицо, не связанное с исследованием, было единственным, кому был доверен идентификационный код для индивидуально упакованных флаконов с капсулами.

Статистический анализ Все переменные были проверены на нормальное распределение с помощью теста Колмогорова-Смирнова. Нормально распределенные переменные выражены как среднее ± SEM. Переменные с ненормальным распределением представлены в виде медианы (25-75-й процентили). Исходные сравнения групповых характеристик проводили с помощью непарного t-критерия или U-критерия Манна-Уитни. Чтобы сравнить ответы после 4 недель вмешательства, использовался двусторонний дисперсионный анализ (ANOVA) для повторных измерений (группа, время и взаимодействие). Связи между изменениями уровня фолиевой кислоты в сыворотке и изменениями ОВ, а также связи между изменениями уровня гомоцистеина в плазме и изменениями ОВ оценивали с помощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Двустороннее значение P менее 0,05 считалось статистически значимым.