HIV 中的亚叶酸和血管反应性

设计和参与者 这是一项随机、双盲、安慰剂对照试验。 符合条件的参与者是根据疾病控制中心修订标准患有已知 HIV 疾病、年龄在 18 岁或以上、接受 ART 治疗至少 6 个月、病毒载量检测不到（低于 50 拷贝/毫升）且 CD4 细胞计数超过 200 个的个体/mm3。 排除标准是糖尿病、任何活动性感染、肝脏疾病、肾脏疾病、心血管疾病史或不受控制的高血压、怀孕、使用非法药物和精神疾病，这些都会影响对研究的理解和合作。 目前吸烟、服用任何膳食补充剂（如叶酸或抗氧化剂）的患者或服用激素替代疗法的女性也被排除在外。 在整个研究期间维持所有常规使用的药物。 该协议得到了阿雷格里港医院研究伦理委员会的批准，所有参与者都签署了书面知情同意书。

研究环境 该研究于 2009 年 8 月至 2011 年 9 月在阿雷格里港医院的艾滋病毒门诊诊所进行，该医院是巴西南部国家艾滋病毒/艾滋病参考中心。

干预 参与者被随机分配接受为期 4 周的亚叶酸 (n=15) 或安慰剂 (n=15) 治疗。 研究补充方案由含有 5 毫克亚叶酸或安慰剂的胶囊组成。 向参与者提供 1 个瓶子，其中包含 30 个胶囊。 受试者被指示每天早上服用 1 粒胶囊。

结果 主要结果指标是评估反应性充血期间的肱动脉血管反应。 次要结果是生化和血液动力学变量的变化。

血管测量 禁食一夜后，评估在温度受控 (20-22°C) 的安静房间中进行，受试者处于仰卧位。 在整个协议中，使用校准的示波自动装置（Dinamap 1846 SX/P；美国佛罗里达州 Critikon）测量优势臂的血压 (BP) 和心率。 如前所述，在非优势肢体中通过静脉闭塞体积描记术（D.E Hokanson，华盛顿，美国）测量前臂血流量。 简而言之，在上臂使用快速充气袖带以阻塞静脉流出，并通过将袖带套在手腕上来阻止手部循环。 通过在 250 mmHg 的上臂放置一个袖带并在 5 分钟后释放来诱导反应性充血 (RH)。 所有流量记录均由对组和时间不知情的操作员手动跟踪。 我们实验室流量测量的再现性具有日内和日间变异系数分别为 6.9 和 9.2%。 休息 15 分钟后，舌下含服 2.5 mg 硝酸异山梨酯（Isordil®，Sigma，巴西）作为不依赖内皮的血管扩张剂。 五分钟后，测量了肱动脉的内皮非依赖性血管舒张。

实验室测量 所有样本均在禁食过夜、干预前后 4 周后获得。 对于每个受试者，测量总血浆同型半胱氨酸浓度、血清叶酸、维生素 B12、葡萄糖、肌酐、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C) 和甘油三酯。 使用直接化学发光技术（Bayer ADVIA Centaur，Leverkusen，Germany）通过竞争性免疫测定法测量血清叶酸和维生素 B12 水平。 还使用直接化学发光技术（IMMULITE 2000 Siemens，Illinois，USA）通过竞争性免疫测定法测量血浆同型半胱氨酸水平。 葡萄糖、肌酐、总胆固醇、HDL-c 和甘油三酯用标准实验室方法测量。

样本量和随机化功效计算表明，每组总共 15 名参与者能够检测到组间反应性充血期间血管反应 4 毫升/分钟/100 毫升的变化，功效为 80%，α=0.05。 对于参与者的分配，随机化是通过计算机生成的随机数列表实现的，研究人员在研究完成之前保持盲态。 参与者被随机分配到安慰剂或亚叶酸治疗组。 随机化程序分三组进行，每组 10 组，并根据性别分层，以确保每个治疗组的男性和女性人数相对相等。

亚叶酸胶囊和安慰剂胶囊在形状、大小和颜色上都没有区别。 根据随机化时间表，它们被预先包装在相同的瓶子中，并为每位患者连续编号。 对补充资料进行了编码，以便研究人员和参与者都不知道其中的内容。 一个与该研究无关的人是唯一被委托获得独立包装胶囊瓶识别码的人。

统计分析 所有变量均通过 Kolmogorov-Smirnov 检验进行正态分布检验。 正态分布的变量表示为平均值±SEM。 非正态分布的变量显示为中位数（第 25-75 个百分位数）。 通过非配对 t 检验或 Mann-Whitney U 检验进行组特征的基线比较。 为了比较干预 4 周后的反应，使用了重复测量（组、时间和交互）的双向方差分析 (ANOVA)。 通过 Spearman 等级相关系数评估血清叶酸变化与 RH 变化之间的关联以及血浆同型半胱氨酸变化与 RH 变化之间的关联。 小于 0.05 的双尾 P 值被认为具有统计学意义。