Folinsyre og vaskulær reaktivitet i HIV

Design og deltagere Dette var et randomiseret, dobbeltblindt, placebokontrolleret forsøg. Kvalificerede deltagere var personer med kendt hiv-sygdom i henhold til Centers for Disease Controls reviderede kriterier, i alderen 18 år eller derover, på ART i mindst 6 måneder, med uopdagelig viral belastning (mindre end 50 kopier/ml), og CD4 tæller mere end 200 celler /mm3. Eksklusionskriterier var diabetes mellitus, enhver aktiv infektion, leversygdom, nyresygdom, hjertekarsygdom eller ukontrolleret hypertension, graviditet, brug af ulovligt stof og psykisk sygdom, der ville kompromittere forståelse og samarbejde med undersøgelsen. Patienter, der i øjeblikket bruger tobak, tager ethvert kosttilskud (såsom folinsyre eller antioxidanter), eller kvinder, der tager hormonerstatningsterapi, blev også udelukket. Al medicin i regelmæssig brug blev opretholdt i hele undersøgelsesperioden. Protokollen blev godkendt af udvalget for etik i forskning på Hospital de Clínicas de Porto Alegre, og alle deltagere gav skriftligt informeret samtykke.

Studieindstillinger Undersøgelsen fandt sted på HIV-ambulatoriet på Hospital de Clínicas de Porto Alegre, et nationalt referencecenter for HIV/AIDS i det sydlige Brasilien, fra august 2009 til september 2011.

Interventioner Deltagerne blev tilfældigt tildelt en 4-ugers behandling med enten folinsyre (n=15) eller placebo (n=15). Studiets tilskudsregimer bestod af kapslerne indeholdende 5 mg folinsyre eller placebo. Deltagerne fik 1 flaske, som indeholdt 30 kapsler. Forsøgspersonerne blev instrueret i at tage 1 kapsel dagligt om morgenen.

Resultater Det primære resultatmål var vurdering af vaskulære reaktioner i brachialis arterie under reaktiv hyperæmi. Sekundære resultater var ændringerne på de biokemiske og hæmodynamiske variabler.

Vaskulære målinger Efter faste natten over blev vurderingerne udført i et temperaturkontrolleret (20-22°C), stille rum med forsøgspersoner i liggende stilling. Gennem hele protokollen blev blodtryk (BP) og hjertefrekvens målt i den dominerende arm ved hjælp af en kalibreret oscillometrisk automatisk enhed (Dinamap 1846 SX/P; Critikon, Florida, USA). Underarmens blodgennemstrømning blev målt ved venøs okklusionsplethysmografi (D.E. Hokanson, Washington, USA) i det ikke-dominante lem, som tidligere beskrevet. Kort sagt blev der brugt en hurtig oppustningsmanchet i overarmen for at tilstoppe venøs udstrømning, og håndcirkulationen blev standset ved at placere en manchet rundt om håndleddet. Reaktiv hyperæmi (RH) blev induceret ved at placere en manchet i overarmen ved 250 mmHg og frigive efter 5 min. Alle flowregistreringer blev manuelt sporet af en operatør, der var blindet til grupperne og tid. Reproducerbarheden af ​​flowmålinger i vores laboratorium har intradag- og interday-variationskoefficienter på henholdsvis 6,9 og 9,2%. Efter 15 minutters hvile blev 2,5 mg sublingualt isosorbiddinitrat (Isordil®, Sigma, Brasilien) administreret som en endotel-uafhængig vasodilator. Fem minutter senere blev endotel-uafhængig vasodilatation af brachialisarterien målt.

Laboratoriemålinger Alle prøver blev taget efter faste natten over, før og efter 4 ugers intervention. For hvert individ blev den totale plasmakoncentration af homocystein, serumfolat, vitamin B12, glucose, kreatinin, total kolesterol, high-density lipoprotein kolesterol (HDL-C) og triglycerider målt. Serumfolat- og vitamin B12-niveauer blev målt ved et konkurrerende immunoassay under anvendelse af direkte kemiluminescerende teknologi (Bayer ADVIA Centaur, Leverkusen, Tyskland). Plasmahomocysteinniveauer blev også målt ved en kompetitiv immunoassay under anvendelse af direkte kemiluminescerende teknologi (IMMULITE 2000 Siemens, Illinois, USA). Glucose, kreatinin, total kolesterol, HDL-c og triglycerider blev målt med standard laboratoriemetoder.

Prøvestørrelse og randomisering Power-beregninger viste, at et samlet antal på 15 deltagere pr. gruppe ville være i stand til at detektere en ændring på 4ml/min/100ml i vaskulær respons under reaktiv hyperæmi mellem grupperne med en styrke på 80% og α=0,05. Til fordeling af deltagerne blev randomisering opnået ved computergenereret liste over tilfældige tal, og efterforskerne forblev blinde, indtil undersøgelsen var afsluttet. Deltagerne blev tilfældigt fordelt til placebo- eller folinsyrebehandlingsgrupper. Randomiseringsproceduren blev udført i tre blokke af 10 og blev stratificeret efter køn for at sikre et relativt lige antal mænd og kvinder i hver behandlingsgruppe.

Folinsyre og placebo-kapsler kunne ikke skelnes i form, størrelse og farve. De var færdigpakket i identiske flasker og fortløbende nummereret for hver patient i henhold til randomiseringsplanen. Tillæg blev kodet, så hverken efterforskerne eller deltagerne var klar over indholdet. En person, der ikke var tilknyttet undersøgelsen, var den eneste, der fik betroet identifikationskoden for de individuelt indpakkede flasker med kapsler.

Statistisk analyse Alle variabler blev testet for normalfordeling med Kolmogorov-Smirnov-testen. Normalfordelte variabler udtrykkes som middelværdi ± SEM. Variabler, der ikke er normalfordelte, præsenteres som median (25.-75. percentiler). Baseline-sammenligninger af gruppekarakteristika blev udført ved uparret t-test eller Mann-Whitney U-test. For at sammenligne svar efter 4 ugers intervention blev der brugt en to-vejs variansanalyse (ANOVA) for gentagne mål (gruppe, tid og interaktion). Forbindelser mellem ændringer i serumfolinsyre og ændringer i RH og sammenhænge mellem ændringer i plasmahomocystein og ændringer i RH blev evalueret ved Spearmans rangkorrelationskoefficient. En to-halet P-værdi på mindre end 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.