Folinsav és vaszkuláris reaktivitás HIV-ben

Tervezés és résztvevők Ez egy randomizált, kettős vak, placebo-kontrollos vizsgálat volt. A résztvevõk a Centers for Disease Control felülvizsgált kritériumai szerint ismert HIV-betegségben szenvedõ személyek voltak, 18 évesek vagy idõsebbek, legalább 6 hónapig ART-t kaptak, kimutathatatlan vírusterheléssel (kevesebb mint 50 kópia/ml), és a CD4-szám több mint 200 sejtet tartalmaz. /mm3. A kizárási kritériumok a következők voltak: diabetes mellitus, bármilyen aktív fertőzés, májbetegség, vesebetegség, szív- és érrendszeri betegség anamnézisében, vagy ellenőrizetlen magas vérnyomás, terhesség, tiltott kábítószer-használat és mentális betegségek, amelyek veszélyeztetik a tanulmány megértését és az azzal való együttműködést. A jelenleg dohányzó, bármilyen étrend-kiegészítőt (például folsavat vagy antioxidánsokat) szedő betegeket vagy a hormonpótló kezelésben részesülő nőket szintén kizárták. A rendszeres használatban lévő összes gyógyszert fenntartották a vizsgálati időszak alatt. A protokollt a Hospital de Clínicas de Porto Alegre kutatási etikai bizottsága hagyta jóvá, és minden résztvevő írásos beleegyezését adta.

A vizsgálat körülményei A vizsgálat a Hospital de Clínicas de Porto Alegre HIV-ambulánsán, a HIV/AIDS dél-brazíliai nemzeti referenciaközpontjában zajlott 2009 augusztusa és 2011 szeptembere között.

Beavatkozások A résztvevőket véletlenszerűen 4 hetes folinsav (n=15) vagy placebo (n=15) kezelésre osztották be. A vizsgálati kiegészítések 5 mg folinsavat vagy placebót tartalmazó kapszulákból álltak. A résztvevők 1 palackot kaptak, ami 30 kapszulát tartalmazott. Az alanyokat arra utasították, hogy vegyenek be 1 kapszulát naponta, reggel.

Eredmények Az elsődleges eredménymérő a brachialis artéria vaszkuláris válaszreakciók értékelése volt a reaktív hiperémia során. A másodlagos eredmények a biokémiai és hemodinamikai változók változásai voltak.

Érrendszeri mérések Egyéjszakás koplalás után a méréseket szabályozott hőmérsékletű (20-22°C), csendes szobában, az alanyok hanyatt fekve végeztük. A protokoll során a vérnyomást (BP) és a szívfrekvenciát mértük a domináns karban kalibrált oszcillometrikus automata eszközzel (Dinamap 1846 SX/P; Critikon, Florida, USA). Az alkar véráramlását vénás elzáródásos pletizmográfiával (D.E Hokanson, Washington, USA) mérték a nem domináns végtagban, a korábban leírtak szerint. Röviden, gyors felfújó mandzsettát használtak a felkarban a vénás kiáramlás elzárására, és a kéz keringését leállították egy mandzsetta csukló köré helyezésével. A reaktív hiperémiát (RH) úgy váltották ki, hogy egy mandzsettát helyeztek a felkarba 250 Hgmm nyomáson, és 5 perc múlva elengedték. Az összes áramlási felvételt manuálisan nyomon követte egy operátor, aki nem látta a csoportokat és az időt. Laboratóriumunkban az áramlásmérések reprodukálhatósága 6,9, illetve 9,2%-os napon belüli és 9,2%-os. 15 perces pihentetés után 2,5 mg szublingvális izoszorbid-dinitrátot (Isordil®, Sigma, Brazília) adtunk be endotélium-független értágítóként. Öt perccel később mértük a brachialis artéria endothelium-független értágulatát.

Laboratóriumi mérések Valamennyi mintát egy éjszakai koplalás után vettük, 4 hetes beavatkozás előtt és után. Minden alanynál megmértük a teljes plazma homocisztein-koncentrációt, a szérum folátot, a B12-vitamint, a glükózt, a kreatinint, az összkoleszterint, a nagy sűrűségű lipoprotein koleszterint (HDL-C) és a triglicerideket. A szérum folsav- és B12-vitamin szintjét kompetitív immunoassay-vel mértük, közvetlen kemilumineszcens technológiával (Bayer ADVIA Centaur, Leverkusen, Németország). A plazma homociszteinszintjét kompetitív immunoassay-vel is mértük direkt kemilumineszcens technológiával (IMMULITE 2000 Siemens, Illinois, USA). A glükózt, a kreatinint, az összkoleszterint, a HDL-c-t és a triglicerideket standard laboratóriumi módszerekkel mérték.

Mintanagyság és randomizáció A teljesítményszámítások azt mutatták, hogy csoportonként összesen 15 résztvevő 4 ml/perc/100 ml-es változást tudna kimutatni a vaszkuláris válaszban a csoportok közötti reaktív hiperémia során, 80%-os és α=0,05-ös teljesítménnyel. A résztvevők kiosztásához a randomizálást a véletlenszámok számítógéppel generált listájával valósították meg, és a vizsgálók vakok maradtak a vizsgálat befejezéséig. A résztvevőket véletlenszerűen placebóval vagy folinsavval kezelt csoportokba osztották be. A randomizációs eljárást három 10-es blokkban hajtották végre, és nem szerint rétegezték, hogy viszonylag egyenlő számú férfi és nő legyen az egyes kezelési csoportokban.

A folinsav és a placebo kapszulák alakjában, méretében és színében is megkülönböztethetetlenek voltak. Egyforma palackokba előre csomagolták, és minden betegnél sorszámozták, a véletlen besorolási ütemterv szerint. A kiegészítéseket úgy kódolták, hogy sem a vizsgálók, sem a résztvevők nem voltak tisztában a tartalommal. A tanulmányhoz nem kapcsolódó személy volt az egyetlen, akire az egyedileg becsomagolt kapszulapalackok azonosító kódját bízták meg.

Statisztikai analízis Minden változó normális eloszlását a Kolmogorov-Smirnov teszttel teszteltük. A normál eloszlású változókat átlag ± SEM formában fejezzük ki. A nem normál eloszlású változókat mediánként (25-75. percentilis) mutatjuk be. A csoportjellemzők kiindulási összehasonlítását páratlan t-próbával vagy Mann-Whitney U teszttel végeztük. A 4 hetes beavatkozás utáni válaszok összehasonlításához kétirányú varianciaanalízist (ANOVA) használtunk az ismételt mérésekre (csoport, idő és interakció). A szérum folsav változása és az RH változásai közötti összefüggéseket, valamint a plazma homocisztein változása és az RH változásai közötti összefüggéseket Spearman rangkorrelációs együtthatójával értékeltük. A 0,05-nél kisebb kétirányú P-értéket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük.