Foliinihappo ja verisuonten reaktiivisuus HIV:ssä

Suunnittelu ja osallistujat Tämä oli satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, lumekontrolloitu tutkimus. Osallistumiskelpoisia olivat henkilöt, joilla oli Centers for Disease Control tarkistettujen kriteerien mukaan tunnettu HIV-tauti, vähintään 18-vuotiaat, jotka saivat ART-hoitoa vähintään 6 kuukauden ajan ja joiden viruskuorma ei ollut havaittavissa (alle 50 kopiota/ml) ja CD4-solujen määrä yli 200 /mm3. Poissulkemiskriteerit olivat diabetes mellitus, mikä tahansa aktiivinen infektio, maksasairaus, munuaissairaus, sydän- ja verisuonitauti tai hallitsematon verenpainetauti, raskaus, laittomien huumeiden käyttö ja mielenterveysongelmat, jotka vaarantaisivat tutkimuksen ymmärtämisen ja yhteistyön. Potilaat, jotka käyttävät tällä hetkellä tupakkaa, ottavat lisäravinteita (kuten foolihappoa tai antioksidantteja) tai naiset, jotka käyttävät hormonikorvaushoitoa, jätettiin myös pois. Kaikki säännöllisessä käytössä olleet lääkkeet säilytettiin koko tutkimusjakson ajan. Protokollan hyväksyi Hospital de Clínicas de Porto Alegren tutkimuksen eettinen komitea, ja kaikki osallistujat antoivat kirjallisen suostumuksen.

Tutkimusympäristö Tutkimus tehtiin Etelä-Brasilian kansallisen HIV/AIDS-viitekeskuksen Hospital de Clínicas de Porto Alegren HIV-poliklinikalla elokuusta 2009 syyskuuhun 2011.

Interventiot Osallistujat jaettiin satunnaisesti 4 viikon hoitoon joko foliinihapolla (n=15) tai lumelääkevalmisteella (n=15). Tutkimuksen täydennysohjelmat koostuivat kapseleista, jotka sisälsivät 5 mg foliinihappoa tai lumelääkettä. Osallistujille annettiin 1 pullo, joka sisälsi 30 kapselia. Koehenkilöitä neuvottiin ottamaan 1 kapseli päivässä, aamulla.

Tulokset Ensisijainen tulosmitta oli olkapäävaltimon vaskulaaristen vasteiden arviointi reaktiivisen hyperemian aikana. Toissijaiset tulokset olivat muutokset biokemiallisissa ja hemodynaamisissa muuttujissa.

Verisuonimittaukset Yön paaston jälkeen arvioinnit suoritettiin lämpötilakontrolloidussa (20-22°C), hiljaisessa huoneessa koehenkilöiden ollessa makuuasennossa. Koko protokollan ajan verenpainetta (BP) ja sykettä mitattiin hallitsevasta käsivarresta käyttämällä kalibroitua oskillometristä automaattilaitetta (Dinamap 1846 SX/P; Critikon, Florida, USA). Kyynärvarren verenvirtaus mitattiin laskimotukoksen pletysmografialla (D.E Hokanson, Washington, USA) ei-dominantissa raajassa, kuten aiemmin on kuvattu. Lyhyesti sanottuna olkavarressa käytettiin nopeaa täyttömansettia laskimoiden ulosvirtauksen estämiseksi ja käsien verenkierto pysäytettiin asettamalla mansetti ranteen ympärille. Reaktiivinen hyperemia (RH) indusoitiin asettamalla mansetti olkavarteen 250 mmHg:n paineeseen ja vapauttamalla se 5 minuutin kuluttua. Operaattori, joka oli sokeutunut ryhmien ja ajan suhteen, jäljitti kaikki virtaustallenteet manuaalisesti. Virtausmittausten toistettavuuden laboratoriossamme päivänsisäinen ja päivän välinen vaihtelukerroin on 6,9 ja 9,2 %. 15 minuutin levon jälkeen annettiin 2,5 mg sublingvaalista isosorbididinitraattia (Isordil®, Sigma, Brasilia) endoteelistä riippumattomana vasodilataattorina. Viisi minuuttia myöhemmin mitattiin olkapäävaltimon endoteelistä riippumaton vasodilataatio.

Laboratoriomittaukset Kaikki näytteet otettiin yön yli paaston jälkeen, ennen ja jälkeen 4 viikon interventiota. Kullekin kohteelle mitattiin plasman homokysteiinin kokonaispitoisuus, seerumin folaatti, B12-vitamiini, glukoosi, kreatiniini, kokonaiskolesteroli, korkeatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli (HDL-C) ja triglyseridit. Seerumin folaatti- ja B12-vitamiinitasot mitattiin kilpailevalla immunomäärityksellä käyttäen suoraa kemiluminesenssiteknologiaa (Bayer ADVIA Centaur, Leverkusen, Saksa). Plasman homokysteiinitasot mitattiin myös kilpailevalla immunomäärityksellä käyttäen suoraa kemiluminesenssiteknologiaa (IMMULITE 2000 Siemens, Illinois, USA). Glukoosi, kreatiniini, kokonaiskolesteroli, HDL-c ja triglyseridit mitattiin tavallisilla laboratoriomenetelmillä.

Näytteen koko ja satunnaistaminen Teholaskelmat osoittivat, että yhteensä 15 osallistujaa ryhmää kohden pystyisi havaitsemaan 4 ml/min/100 ml muutoksen verisuonivasteessa ryhmien välisen reaktiivisen hyperemian aikana teholla 80 % ja α=0,05. Osallistujien jakamista varten satunnaistaminen suoritettiin tietokoneella luodulla satunnaislukuluettelolla, ja tutkijat pysyivät sokeina, kunnes tutkimus saatiin päätökseen. Osallistujat jaettiin satunnaisesti lume- tai foliinihappohoitoryhmiin. Satunnaistaminen suoritettiin kolmessa 10 lohkossa ja se jaettiin sukupuolen mukaan, jotta varmistettiin suhteellisen yhtä suuri määrä miehiä ja naisia ​​kussakin hoitoryhmässä.

Foliinihappo- ja lumekapselit olivat muodoltaan, kooltaan ja väriltään erottamattomia. Ne pakattiin valmiiksi identtisiin pulloihin ja numeroitiin peräkkäin kullekin potilaalle satunnaistamisaikataulun mukaisesti. Täydennykset koodattiin siten, että tutkijat tai osallistujat eivät olleet tietoisia niiden sisällöstä. Yksittäin pakattujen kapselipullojen tunnistekoodi oli ainoa henkilö, joka ei liittynyt tutkimukseen.

Tilastollinen analyysi Kaikki muuttujat testattiin normaalijakauman suhteen Kolmogorov-Smirnov-testillä. Normaalijakautuneet muuttujat ilmaistaan ​​keskiarvona ± SEM. Muuttujat, jotka eivät jakautuneet normaalisti, esitetään mediaaneina (25.–75. persentiilit). Ryhmän ominaisuuksien perusvertailu suoritettiin parittomalla t-testillä tai Mann-Whitney U -testillä. Vastausten vertaamiseksi 4 viikon interventiojakson jälkeen käytettiin kaksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA) toistetuille mittauksille (ryhmä, aika ja vuorovaikutus). Seerumin foolihapon muutosten ja RH:n muutosten väliset yhteydet sekä plasman homokysteiinin muutosten ja RH:n muutosten väliset yhteydet arvioitiin Spearmanin rankkorrelaatiokertoimella. Kaksisuuntaista P-arvoa alle 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevänä.