Ácido folínico y reactividad vascular en el VIH

Diseño y participantes Este fue un ensayo aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo. Los participantes elegibles eran personas con la enfermedad del VIH conocida según los criterios revisados ​​de los Centros para el Control de Enfermedades, mayores de 18 años, en TAR durante al menos 6 meses, con carga viral indetectable (menos de 50 copias/ml) y recuentos de CD4 de más de 200 células /mm3. Los criterios de exclusión fueron diabetes mellitus, cualquier infección activa, enfermedad hepática, enfermedad renal, antecedentes de enfermedad cardiovascular o hipertensión no controlada, embarazo, uso de drogas ilícitas y enfermedad mental que comprometiera la comprensión y la colaboración con el estudio. También se excluyeron pacientes que fumaban actualmente, tomaban algún suplemento dietético (como ácido fólico o antioxidantes) o mujeres que tomaban terapia de reemplazo hormonal. Todos los medicamentos de uso regular se mantuvieron durante todo el período de estudio. El protocolo fue aprobado por el comité de ética en investigación del Hospital de Clínicas de Porto Alegre, y todos los participantes dieron su consentimiento informado por escrito.

Ámbitos del estudio El estudio se llevó a cabo en el ambulatorio de VIH del Hospital de Clínicas de Porto Alegre, centro de referencia nacional para el VIH/SIDA en el sur de Brasil, de agosto de 2009 a septiembre de 2011.

Intervenciones Los participantes fueron asignados aleatoriamente a un tratamiento de 4 semanas con ácido folínico (n=15) o placebo (n=15). Los regímenes de suplementación del estudio consistieron en cápsulas que contenían 5 mg de ácido folínico o placebo. Los participantes recibieron 1 botella, que contenía 30 cápsulas. Se indicó a los sujetos que tomaran 1 cápsula al día, por la mañana.

Resultados La medida de resultado primaria fue la evaluación de las respuestas vasculares de la arteria braquial durante la hiperemia reactiva. Los resultados secundarios fueron los cambios en las variables bioquímicas y hemodinámicas.

Mediciones vasculares Después de una noche en ayunas, las evaluaciones se realizaron en una habitación silenciosa con temperatura controlada (20-22 °C), con los sujetos en posición supina. A lo largo del protocolo, se midió la presión arterial (PA) y la frecuencia cardíaca en el brazo dominante mediante un dispositivo automático oscilométrico calibrado (Dinamap 1846 SX/P; Critikon, Florida, EE. UU.). El flujo sanguíneo del antebrazo se midió mediante pletismografía de oclusión venosa (D.E Hokanson, Washington, EE. UU.), en la extremidad no dominante, como se describió anteriormente. En resumen, se usó un manguito de inflado rápido en la parte superior del brazo para ocluir el flujo venoso y se detuvo la circulación de la mano colocando un manguito alrededor de la muñeca. Se indujo hiperemia reactiva (RH) colocando un manguito en la parte superior del brazo a 250 mmHg y soltándolo después de 5 min. Todos los registros de flujo fueron rastreados manualmente por un operador que desconocía los grupos y el tiempo. La reproducibilidad de las medidas de caudal en nuestro laboratorio tiene coeficientes de variación intradiarios e interdiarios de 6,9 ​​y 9,2%, respectivamente. Después de 15 min de reposo, se administraron 2,5 mg de dinitrato de isosorbida sublingual (Isordil®, Sigma, Brasil), como vasodilatador independiente del endotelio. Cinco minutos más tarde, se midió la vasodilatación independiente del endotelio de la arteria braquial.

Mediciones de laboratorio Todas las muestras se obtuvieron después de una noche de ayuno, antes y después de 4 semanas de intervención. Para cada sujeto, se midieron la concentración de homocisteína plasmática total, el folato sérico, la vitamina B12, la glucosa, la creatinina, el colesterol total, el colesterol de lipoproteínas de alta densidad (HDL-C) y los triglicéridos. Los niveles séricos de folato y vitamina B12 se midieron mediante un inmunoensayo competitivo utilizando tecnología de quimioluminiscencia directa (Bayer ADVIA Centaur, Leverkusen, Alemania). Los niveles de homocisteína en plasma también se midieron mediante un inmunoensayo competitivo utilizando tecnología de quimioluminiscencia directa (IMMULITE 2000 Siemens, Illinois, EE. UU.). La glucosa, la creatinina, el colesterol total, el HDL-c y los triglicéridos se midieron con métodos estándar de laboratorio.

Tamaño de la muestra y aleatorización Los cálculos de potencia mostraron que un número total de 15 participantes por grupo sería capaz de detectar un cambio de 4 ml/min/100 ml en la respuesta vascular durante la hiperemia reactiva entre grupos, con una potencia del 80 % y α=0,05. Para la asignación de los participantes, la aleatorización se logró mediante una lista de números aleatorios generada por computadora, y los investigadores permanecieron ciegos hasta que se completó el estudio. Los participantes fueron asignados aleatoriamente a grupos de tratamiento con placebo o ácido folínico. El procedimiento de aleatorización se realizó en tres bloques de 10 y se estratificó según el sexo, para asegurar un número relativamente igual de hombres y mujeres en cada grupo de tratamiento.

Las cápsulas de ácido folínico y de placebo eran indistinguibles en forma, tamaño y color. Fueron preenvasados ​​en frascos idénticos y numerados consecutivamente para cada paciente, de acuerdo con el cronograma de aleatorización. Los suplementos se codificaron de modo que ni los investigadores ni los participantes tuvieran conocimiento de su contenido. Una persona no afiliada al estudio fue la única a la que se le confió el código de identificación de los frascos de cápsulas envueltos individualmente.

Análisis estadístico Todas las variables fueron probadas para distribución normal con la prueba de Kolmogorov-Smirnov. Las variables distribuidas normalmente se expresan como media ± SEM. Las variables que no se distribuyen normalmente se presentan como medianas (percentiles 25 a 75). Las comparaciones iniciales de las características de los grupos se realizaron mediante la prueba t no pareada o la prueba U de Mann-Whitney. Para comparar las respuestas después de 4 semanas de intervención, se utilizó un análisis de varianza de dos vías (ANOVA) para medidas repetidas (grupo, tiempo e interacción). Las asociaciones entre los cambios en el ácido fólico sérico y los cambios en la HR y las asociaciones entre los cambios en la homocisteína plasmática y los cambios en la HR se evaluaron mediante el coeficiente de correlación de rangos de Spearman. Un valor de p de dos colas inferior a 0,05 se consideró estadísticamente significativo.