Deze pagina is automatisch vertaald en de nauwkeurigheid van de vertaling kan niet worden gegarandeerd. Raadpleeg de Engelse versie voor een brontekst.

Transformatiepotentieel van aan E2 blootgestelde vatbaarheid voor borstkanker Genmutatie Heterozygote epitheliale borstcellen

24 juli 2013 bijgewerkt door: Asher Salmon, Hadassah Medical Organization

Identificatie van het transformatiepotentieel van aan normaal oestrogeen blootgesteld BRCA1 (Breast Cancer Susceptibility Gen 1) en BRCA2 (Breast Cancer Susceptibility Gen 2) Heterozygote epitheliale borstcellen als gevolg van bestraling

Gevoeligheid voor borstkanker is gerelateerd aan de combinatie van genetische, hormonale en meerdere andere omgevingsrisicofactoren, zoals respectievelijk mutaties in het BRCA-gen en overmatige blootstelling aan exogeen oestrogeen. BRCA is een nucleair eiwit dat de stabiliteit van het genoom handhaaft door op te treden als een belangrijke speler in het DNA-reparatiecomplex. Onlangs is er bewijs naar voren gekomen dat BRCA-mutatie heterozygose zelf afgebroken DNA-herstel bevordert en kan bijdragen aan het ontstaan van borstkanker na blootstelling aan bestraling. In onze voorlopige resultaten van lymfocytenculturen op korte termijn vonden we aanvullend bewijs dat gezonde heterozygote BRCA1- en BRCA2-mutatiedragers een andere reactie op DNA-schade hebben dan niet-dragers.

Het hoofddoel van ons lopende project is het identificeren van het transcriptionele modulatie- en transformatiepotentieel van normale BRCA1- en BRCA2-mutatie heterozygote epitheliale borstcellen na bestraling en onderzoeken hoe dit wordt beïnvloed door blootstelling aan oestrogeen. Onze hypothesen zullen worden onderzocht door middel van RNA-seq en microRNA-seq om een uniek moleculair expressieprofiel te identificeren van de aan oestrogeen blootgestelde cellen na ioniserende bestraling.

Inzicht in de rol van BRCA-heterozygositeit in de celrespons op blootstelling aan oestrogeen en bestraling kan de ontwikkeling van geschiktere diagnostische en therapeutische strategieën voor deze personen vergemakkelijken.

Studie Overzicht

Toestand

Onbekend

Conditie

Gedetailleerde beschrijving

Om de verschillende cellijnen te bestuderen, zijn we van plan luminale voorlopers te isoleren en te verspreiden uit normaal menselijk borstweefsel. Hiertoe zullen 10 menselijke borstweefselmonsters worden verkregen uit risicoverlagende mastectomie bij gezonde premenopauzale vrouwen met BRCA1-mutaties. Weefsels van 10 premenopauzale vrouwen die esthetische borstchirurgie ondergaan zonder familiegeschiedenis van borst- of eierstokkanker zullen als controlegroep dienen. Om primaire epitheelcellen te isoleren, wordt menselijk borstweefsel fijngehakt en 's nachts enzymatisch verteerd in collagenase en hyaluronidase om suspensie van epitheliale organoïden te verkrijgen. Deze organoïden worden verzameld en verder verteerd met trypsine, dispase en deoxyribonuclease 1 (DNAse), worden gefilterd om een enkele celsuspensie te genereren, opnieuw gesuspendeerd in Hank's + 2% foetaal runderserum (FBS) en 0,1 mg/ml DNAse, en ook geïncubeerd met een blokkerend antilichaam gedurende 15 minuten op ijs.

Cellen worden gedurende 48 uur behandeld met oestrogeen (E2) (10 nM) en worden vervolgens bestraald om dubbelstrengsbreuk te induceren. Cellen worden bestraald met 8 Gray (Gy) met behulp van een Co60-bron.

Om onze studie te voltooien, zullen aan oestrogeen blootgestelde en niet-blootgestelde BRCA-mutatie heterozygote epitheelborstcellen worden bestraald en 1 uur later zal RNA uit de cellen worden geëxtraheerd met behulp van Tri-reagens (Sigma). Het RNA zal worden omgezet in een bibliotheek van cDNA-fragmenten (complementair DNA) en zal worden verzonden voor diepe sequentiebepaling in het illumina Hi-Seq-platform.

Studietype

Observationeel

Inschrijving (Verwacht)

Contacten en locaties

In dit gedeelte vindt u de contactgegevens van degenen die het onderzoek uitvoeren en informatie over waar dit onderzoek wordt uitgevoerd.

Studie Locaties

Israël
- - Jerusalem, Israël
    - Hadassah Medical Center

Deelname Criteria

Onderzoekers zoeken naar mensen die aan een bepaalde beschrijving voldoen, de zogenaamde geschiktheidscriteria. Enkele voorbeelden van deze criteria zijn iemands algemene gezondheidstoestand of eerdere behandelingen.

Geschiktheidscriteria

Leeftijden die in aanmerking komen voor studie

25 jaar tot 50 jaar (VOLWASSEN)

Accepteert gezonde vrijwilligers

Geslachten die in aanmerking komen voor studie

Vrouw

Bemonsteringsmethode

Niet-waarschijnlijkheidssteekproef

Studie Bevolking

menselijke borstweefselmonsters zullen worden verkregen uit risicoverlagende mastectomie bij gezonde premenopauzale vrouwen met BRCA1- en BRCA2-mutaties. Weefsels van premenopauzale vrouwen die esthetische borstchirurgie ondergaan zonder familiegeschiedenis van borst- of eierstokkanker zullen ook worden verkregen.

Beschrijving

Inclusiecriteria:

gezond
premenopauze
vrouwen
BRCA1-mutaties
BRCA2-mutaties

Uitsluitingscriteria:

vrouwen met borst- of eierstokkanker

Studie plan

Dit gedeelte bevat details van het studieplan, inclusief hoe de studie is opgezet en wat de studie meet.

Hoe is de studie opgezet?

Ontwerpdetails

Aantal groepen / cohorten

Cohorten en interventies

Groep / Cohort
niet-dragers Weefsels van premenopauzale vrouwen die esthetische borstchirurgie ondergaan zonder familiegeschiedenis van borst- of eierstokkanker zullen worden verkregen. borstcellen worden geïsoleerd, 48 uur behandeld met oestrogeen en daarna bestraald.
BRCA1-mutatiedragers Weefsels van risicoverlagende mastectomie bij gezonde premenopauzale vrouwen met BRCA1-mutaties die epitheel ondergaan borstcellen worden geïsoleerd, 48 uur behandeld met oestrogeen en daarna bestraald.
BRCA2-mutatiedragers Weefsels van risicoverlagende mastectomie bij gezonde premenopauzale vrouwen met BRCA2-mutaties die epitheel ondergaan borstcellen worden geïsoleerd, 48 uur behandeld met oestrogeen en daarna bestraald.

Wat meet het onderzoek?

Primaire uitkomstmaten

Uitkomstmaat	Maatregel Beschrijving	Tijdsspanne
Het transcriptionele profiel van heterozygote epitheliale borstcellen Tijdsspanne: menselijke borstweefselmonsters zullen worden verkregen van premenopauzale vrouwen die een borstoperatie ondergaan. cellen worden onmiddellijk geïsoleerd en 48 uur later wordt het transcriptieprofiel geïdentificeerd.	we zullen een RNA-seq-expressieprofileringsanalyse uitvoeren van normale oestrogeen blootgestelde BRCA heterozygote epitheelcellen na bestraling.	menselijke borstweefselmonsters zullen worden verkregen van premenopauzale vrouwen die een borstoperatie ondergaan. cellen worden onmiddellijk geïsoleerd en 48 uur later wordt het transcriptieprofiel geïdentificeerd.

Medewerkers en onderzoekers

Hier vindt u mensen en organisaties die betrokken zijn bij dit onderzoek.

Sponsor

Hadassah Medical Organization

Onderzoekers

Hoofdonderzoeker: Asher Y Salmon, MD, PhD, Hadassah Medical Organization

Studie record data

Deze datums volgen de voortgang van het onderzoeksdossier en de samenvatting van de ingediende resultaten bij ClinicalTrials.gov. Studieverslagen en gerapporteerde resultaten worden beoordeeld door de National Library of Medicine (NLM) om er zeker van te zijn dat ze voldoen aan specifieke kwaliteitscontrolenormen voordat ze op de openbare website worden geplaatst.

Bestudeer belangrijke data

Studie start

1 september 2013

Primaire voltooiing (VERWACHT)

1 september 2014

Studie voltooiing (VERWACHT)

1 september 2015

Studieregistratiedata

Eerst ingediend

22 juli 2013

Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria

24 juli 2013

Eerst geplaatst (SCHATTING)

25 juli 2013

Updates van studierecords

Laatste update geplaatst (SCHATTING)