E2 노출 유방암 감수성 유전자 돌연변이 이형접합 상피유방세포의 형질전환 가능성
방사선 조사에 의한 정상 에스트로겐 노출 BRCA1(유방암 감수성 유전자 1) 및 BRCA2(유방암 감수성 유전자 2) 이형접합 상피 유방세포의 형질전환 가능성 규명
유방암에 대한 감수성은 각각 BRCA 유전자의 돌연변이 및 외인성 에스트로겐에 대한 과도한 노출과 같은 유전적, 호르몬 및 여러 기타 환경적 위험 요소의 조합과 관련이 있습니다. BRCA는 DNA 복구 복합체에서 핵심 역할을 함으로써 게놈 안정성을 유지하는 핵 단백질입니다. 최근 BRCA 돌연변이 이형 접합 자체가 중단된 DNA 복구를 향상시키고 방사선 노출 후 유방암 개시에 기여할 수 있다는 증거가 나타났습니다. 단기 림프구 배양에 대한 예비 결과에서 우리는 건강한 이형 BRCA1 및 BRCA2 돌연변이 보인자가 비보인자보다 DNA 손상에 대해 다른 반응을 보인다는 추가 증거를 발견했습니다.
진행 중인 프로젝트의 주요 목표는 조사 후 정상적인 BRCA1 및 BRCA2 돌연변이 이형 상피 유방 세포의 전사 조절 및 변형 가능성을 확인하고 에스트로겐 노출에 의해 어떻게 영향을 받는지 조사하는 것입니다. 우리의 가설은 이온화 조사 후 에스트로겐 노출 세포의 독특한 분자 발현 프로필을 확인하기 위해 RNA-seq 및 microRNA-seq에 의해 조사될 것입니다.
에스트로겐 노출과 방사선 조사에 대한 세포 반응에서 BRCA 이형 접합체의 역할을 이해하면 이러한 개인을 위한 보다 적절한 진단 및 치료 전략의 개발을 촉진할 수 있습니다.
연구 개요
상태
상세 설명
다른 세포 계통을 연구하기 위해 정상적인 인간 유방 조직에서 루미날 전구체를 분리하고 전파할 계획입니다. 이를 위해 BRCA1 돌연변이가 있는 건강한 폐경 전 여성의 위험 감소 유방 절제술에서 10개의 인간 유방 조직 샘플을 얻을 것입니다. 유방암 또는 난소암의 가족력 없이 심미적 유방 수술을 받는 폐경 전 여성 10명의 조직을 대조군으로 사용합니다. 1차 상피 세포를 분리하기 위해 인간 유방 조직을 다진 후 콜라게나아제 및 히알루로니다아제에서 밤새 효소적으로 분해하여 상피 오르가노이드의 현탁액을 생성합니다. 이러한 오가노이드는 수집되어 트립신, 디스파제 및 데옥시리보뉴클레아제 1(DNAse)로 더 소화되고, 단일 세포 현탁액을 생성하기 위해 여과되며, Hank's + 2% 태아 소 혈청(FBS) 및 0.1 mg/mL DNAse에 재현탁됩니다. 얼음 위에서 15분 동안 차단 항체와 함께 인큐베이션하였다.
세포를 48시간 동안 에스트로겐(E2)(10 nM)으로 처리한 다음 이중 가닥 절단을 유도하기 위해 조사할 것입니다. 세포는 Co60 소스를 사용하여 8 그레이(Gy)로 조사됩니다.
본 연구를 수행하기 위해 에스트로겐 노출 및 노출되지 않은 BRCA 돌연변이 이형 접합 상피 유방 세포를 조사하고 1시간 후에 Tri-reagent(Sigma)를 사용하여 세포에서 RNA를 추출합니다. RNA는 cDNA(상보적 DNA) 조각 라이브러리로 변환되고 Illumina Hi-Seq 플랫폼에서 심층 시퀀싱을 위해 전송됩니다.
연구 유형
등록 (예상)
연락처 및 위치
연구 장소
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Jerusalem, 이스라엘
- Hadassah Medical Center
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
연구 대상 성별
샘플링 방법
연구 인구
설명
포함 기준:
- 건강한
- 폐경 전
- 여성
- BRCA1 돌연변이
- BRCA2 돌연변이
제외 기준:
- 유방암이나 난소암에 걸린 여성
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
코호트 및 개입
그룹/코호트 |
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비 캐리어
유방암 또는 난소암의 가족력이 없는 심미적 유방 수술을 받는 폐경 전 여성의 조직을 채취합니다.상피
유방 세포를 분리하고 48시간 동안 에스트로겐으로 처리한 다음 방사선을 조사합니다.
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BRCA1 돌연변이 보유자
BRCA1 돌연변이가 진행 중인 건강한 폐경 전 여성의 위험 감소 유방절제술 조직.
유방 세포를 분리하고 48시간 동안 에스트로겐으로 처리한 다음 방사선을 조사합니다.
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BRCA2 돌연변이 보유자
BRCA2 돌연변이가 진행 중인 건강한 폐경 전 여성의 위험 감소 유방절제술 조직.
유방 세포를 분리하고 48시간 동안 에스트로겐으로 처리한 다음 방사선을 조사합니다.
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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이형 접합 상피 유방 세포의 전사 프로파일
기간: 인간 유방 조직 샘플은 유방 수술을 받는 폐경 전 여성에게서 얻을 것입니다. 세포는 즉시 분리되고 48시간 후에 전사 프로필이 확인됩니다.
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방사선 조사 후 정상 에스트로겐 노출 BRCA 이형 상피 세포의 RNA-seq 발현 프로파일링 분석을 수행할 것입니다.
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인간 유방 조직 샘플은 유방 수술을 받는 폐경 전 여성에게서 얻을 것입니다. 세포는 즉시 분리되고 48시간 후에 전사 프로필이 확인됩니다.
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공동 작업자 및 조사자
수사관
- 수석 연구원: Asher Y Salmon, MD, PhD, Hadassah Medical Organization
연구 기록 날짜
연구 주요 날짜
연구 시작
기본 완료 (예상)
연구 완료 (예상)
연구 등록 날짜
최초 제출
QC 기준을 충족하는 최초 제출
처음 게시됨 (추정)
연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (추정)
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
마지막으로 확인됨
추가 정보
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BRCA1 유전자 돌연변이에 대한 임상 시험
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Henan Cancer HospitalFundamenta Therapeutics, Ltd.아직 모집하지 않음Allogeneic, CAR-T, Protein Sequestration, Non-gene Edited중국
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