Ezt az oldalt automatikusan lefordították, és a fordítás pontossága nem garantált. Kérjük, olvassa el a angol verzió forrásszöveghez.

Az E2-nek kitett emlőrákra való érzékenység génmutációjának transzformációs potenciálja heterozigóta epiteliális emlősejtek

2013. július 24. frissítette: Asher Salmon, Hadassah Medical Organization

A normál ösztrogénnek kitett BRCA1 (Breast Cancer Susceptibility Gene 1) és BRCA2 (Breast Cancer Susceptibility Gene 2) Heterozigóta epiteliális emlősejtek transzformációs potenciáljának azonosítása besugárzás hatására

Az emlőrákra való érzékenység genetikai, hormonális és számos egyéb környezeti kockázati tényező kombinációjával függ össze, mint például a BRCA gén mutációi és az exogén ösztrogén túlzott expozíciója. A BRCA egy nukleáris fehérje, amely fenntartja a genom stabilitását azáltal, hogy kulcsszerepet játszik a DNS-javító komplexumban. A közelmúltban bizonyítékok merültek fel arra vonatkozóan, hogy a BRCA mutációs heterozigózis maga fokozza a megszakított DNS-javítást, és hozzájárulhat az emlőrák kialakulásához a besugárzás után. A rövid távú limfocita tenyészetekkel kapcsolatos előzetes eredményeinkben további bizonyítékokat találtunk arra vonatkozóan, hogy az egészséges heterozigóta BRCA1 és BRCA2 mutációhordozók eltérően reagálnak a DNS-károsodásra, mint a nem hordozók.

Folyamatban lévő projektünk fő célja a normál BRCA1 és BRCA2 mutációjú heterozigóta hámsejtek besugárzást követő transzkripciós modulációs és transzformációs potenciáljának azonosítása, valamint annak vizsgálata, hogy ezt hogyan befolyásolja az ösztrogén expozíció. Hipotéziseinket RNS-szekvenciával és mikroRNS-szekvenciával vizsgáljuk annak érdekében, hogy azonosítsuk az ösztrogénnek kitett sejtek egyedi molekuláris expressziós profilját ionizáló besugárzást követően.

A BRCA heterozigóta szerepének megértése az ösztrogén-expozícióra és a besugárzásra adott sejtválaszban elősegítheti megfelelőbb diagnosztikai és terápiás stratégiák kidolgozását ezen egyének számára.

A tanulmány áttekintése

Állapot

Ismeretlen

Körülmények

Részletes leírás

A különböző sejtvonalak tanulmányozásához luminális progenitorok izolálását és szaporítását tervezzük egy normál emberi emlőszövetből. Ebből a célból 10 humán emlőszövetmintát vesznek BRCA1 mutációval rendelkező egészséges premenopauzális nők kockázatcsökkentő mastectomiájából. Kontrollcsoportként 10 menopauza előtti, esztétikai emlőműtéten átesett nő szövetei szolgálnak, akiknek a családjában nem fordult elő mell- vagy petefészekrák. Az elsődleges hámsejtek izolálása érdekében az emberi emlőszövetet feldarabolják, és egy éjszakán át enzimatikusan emésztjük kollagenázban és hialuronidázban, így hámorganoidok szuszpenzióját kapjuk. Ezeket az organoidokat összegyűjtjük és tripszinnel, diszpázzal és dezoxiribonukleáz 1-gyel (DNS-ázzal) tovább emésztjük, szűrjük, hogy egyetlen sejt szuszpenziót hozzunk létre, újraszuszpendáljuk Hank-féle + 2% magzati szarvasmarha szérumban (FBS) és 0,1 mg/ml DNS-ázzal. blokkoló antitesttel 15 percig jégen inkubáltuk.

A sejteket ösztrogénnel (E2) (10 nM) kezeljük 48 órán át, majd besugározzuk a kettős szál szakadás indukálására. A sejteket 8 Gray-vel (Gy) sugározzuk be Co60 forrás felhasználásával.

Vizsgálatunk elvégzéséhez az ösztrogénnek kitett és nem exponált BRCA mutáció heterozigóta hámsejteket besugározzuk, és 1 órával később RNS-t vonunk ki a sejtekből Tri-reagens (Sigma) segítségével. Az RNS-t cDNS (komplementer DNS) fragmensek könyvtárává alakítják, és mély szekvenálásra küldik az illumina Hi-Seq platformon.

Tanulmány típusa

Megfigyelő

Beiratkozás (Várható)

30

Kapcsolatok és helyek

Ez a rész a vizsgálatot végzők elérhetőségeit, valamint a vizsgálat lefolytatásának helyére vonatkozó információkat tartalmazza.

Tanulmányi helyek

  • Izrael
      • Jerusalem, Izrael
        • Hadassah Medical Center

Részvételi kritériumok

A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.

Jogosultsági kritériumok

Tanulmányozható életkorok

25 év (FELNŐTT)

Egészséges önkénteseket fogad

Igen

Tanulmányozható nemek

Női

Mintavételi módszer

Nem valószínűségi minta

Tanulmányi populáció

emberi emlőszövet-mintákat vesznek BRCA1 és BRCA2 mutációval rendelkező egészséges premenopauzális nők kockázatcsökkentő mastectomiájából. A menopauza előtti, esztétikai mellműtéten átesett nők szöveteit is megkapják, akiknek a családjában nem fordult elő mell- vagy petefészekrák.

Leírás

Bevételi kritériumok:

  • egészséges
  • premenopauzális
  • nők
  • BRCA1 mutációk
  • BRCA2 mutációk

Kizárási kritériumok:

  • mell- vagy petefészekrákban szenvedő nők

Tanulási terv

Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.

Hogyan készül a tanulmány?

Tervezési részletek

Kohorszok és beavatkozások

Csoport / Kohorsz
nem hordozók
A menopauza előtti, esztétikai emlőműtéten átesett nők szöveteit veszik fel, akiknek a családjában nem fordult elő emlő- vagy petefészekrák.epiteliális Az emlősejteket izoláljuk, ösztrogénnel kezeljük 48 órán át, majd besugározzuk.
BRCA1 mutációhordozók
A kockázatcsökkentő mastectomiából származó szövetek BRCA1 mutáción átesett egészséges premenopauzás nőknél. epithelialis Az emlősejteket izoláljuk, ösztrogénnel kezeljük 48 órán át, majd besugározzuk.
BRCA2 mutációhordozók
A kockázatcsökkentő mastectomiából származó szövetek BRCA2 mutáción átesett egészséges premenopauzás nőknél. epithelialis Az emlősejteket izoláljuk, ösztrogénnel kezeljük 48 órán át, majd besugározzuk.

Mit mér a tanulmány?

Elsődleges eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
A heterozigóta epiteliális emlősejtek transzkripciós profilja
Időkeret: emberi emlőszövet-mintákat emlőműtéten átesett, menopauza előtti nőktől vesznek majd. A sejteket azonnal izoláljuk, és 48 órával később azonosítjuk a transzkripciós profilt.
normál ösztrogénnek kitett BRCA heterozigóta hámsejtek RNS-seq expressziós profilozását végezzük besugárzást követően.
emberi emlőszövet-mintákat emlőműtéten átesett, menopauza előtti nőktől vesznek majd. A sejteket azonnal izoláljuk, és 48 órával később azonosítjuk a transzkripciós profilt.

Együttműködők és nyomozók

Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.

Szponzor

Hadassah Medical Organization

Nyomozók

  • Kutatásvezető: Asher Y Salmon, MD, PhD, Hadassah Medical Organization

Tanulmányi rekorddátumok

Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.

Tanulmány főbb dátumok

Tanulmány kezdete

2013. szeptember 1.

Elsődleges befejezés (VÁRHATÓ)

2014. szeptember 1.

A tanulmány befejezése (VÁRHATÓ)

2015. szeptember 1.

Tanulmányi regisztráció dátumai

Először benyújtva

2013. július 22.

Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2013. július 24.

Első közzététel (BECSLÉS)

2013. július 25.

Tanulmányi rekordok frissítései

Utolsó frissítés közzétéve (BECSLÉS)

2013. július 25.

Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2013. július 24.

Utolsó ellenőrzés

2013. július 1.

Több információ

A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések

Kulcsszavak

További vonatkozó MeSH feltételek

Egyéb vizsgálati azonosító számok

  • ISF-1702/12

Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .

Iratkozz fel