Transformationspotentiale for E2-eksponeret brystkræftmodtagelighed Genmutation Heterozygote epiteliale brystceller
Identifikation af transformationspotentialet for normale østrogeneksponerede BRCA1 (brystkræftmodtagelighedsgen 1) og BRCA2 (modtagelighedsgen for brystkræft 2) heterozygote epitelbrystceller på grund af bestråling
Modtagelighed for brystkræft er relateret til kombinationen af genetiske, hormonelle og flere andre miljømæssige risikofaktorer, såsom mutationer i henholdsvis BRCA-genet og overdreven eksponering for eksogent østrogen. BRCA er et nukleart protein, der opretholder genomets stabilitet ved at fungere som en nøglespiller i DNA-reparationskomplekset. For nylig er der opstået beviser for, at BRCA-mutationsheterozygose i sig selv forbedrer afbrudt DNA-reparation og kan bidrage til initiering af brystkræft efter eksponering for bestråling. I vores foreløbige resultater om kortvarige lymfocytkulturer fandt vi yderligere beviser for, at sunde heterozygote BRCA1- og BRCA2-mutationsbærere har et andet respons på DNA-skade end ikke-bærere.
Hovedformålet med vores igangværende projekt er at identificere transkriptionel modulering og transformationspotentiale af normale BRCA1 og BRCA2 mutations heterozygote epiteliale brystceller efter bestråling og at undersøge, hvordan det påvirkes af eksponering for østrogen. Vores hypoteser vil blive undersøgt af RNA-seq og microRNA-seq for at identificere en unik molekylær ekspressionsprofil af de østrogeneksponerede celler efter ioniserende bestråling.
Forståelse af BRCA-heterozygositetens rolle i cellerespons på eksponering for østrogen og til bestråling kan lette udviklingen af mere passende diagnostiske og terapeutiske strategier for disse individer.
Studieoversigt
Status
Betingelser
Detaljeret beskrivelse
For at studere de forskellige cellelinjer planlægger vi at isolere og udbrede luminale progenitorer fra et normalt menneskeligt brystvæv. Til dette formål vil der blive udtaget 10 humane brystvævsprøver fra risikoreducerende mastektomi hos raske præmenopausale kvinder med BRCA1-mutationer. Væv fra 10 præmenopausale kvinder, der gennemgår en æstetisk brystoperation uden familiehistorie med bryst- eller æggestokkræft, vil fungere som kontrolgruppe. For at isolere primære epitelceller vil humant brystvæv blive hakket og enzymatisk fordøjet natten over i collagenase og hyaluronidase for at give suspension af epitelorganoider. Disse organoider vil blive opsamlet og yderligere fordøjet med trypsin, dispase og deoxyribonuclease 1 (DNAse), vil blive filtreret for at generere en enkelt cellesuspension, resuspenderet i Hank's + 2% føtalt bovint serum (FBS) og 0,1 mg/ml DNAse, og også inkuberet med et blokerende antistof i 15 minutter på is.
Celler vil blive behandlet med østrogen (E2) (10 nM) i 48 timer og vil derefter blive bestrålet for at inducere dobbeltstrengsbrud. Celler vil blive bestrålet med 8 Gray (Gy) ved hjælp af en Co60-kilde.
For at udføre vores undersøgelse vil østrogeneksponerede og ueksponerede BRCA-mutations heterozygote epiteliale brystceller blive bestrålet, og 1 time senere vil RNA blive ekstraheret fra cellerne ved hjælp af Tri-reagens (Sigma). RNA'et vil blive konverteret til et bibliotek af cDNA (komplementært DNA) fragmenter og vil blive sendt til dyb sekventering i illumina Hi-Seq platformen.
Undersøgelsestype
Tilmelding (Forventet)
Kontakter og lokationer
Studiesteder
-
-
-
Jerusalem, Israel
- Hadassah Medical Center
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Køn, der er berettiget til at studere
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- sund og rask
- præmenopausal
- Kvinder
- BRCA1 mutationer
- BRCA2 mutationer
Ekskluderingskriterier:
- kvinder med bryst- eller æggestokkræft
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorte |
|---|
|
ikke-transportører
Væv fra præmenopausale kvinder, der gennemgår æstetisk brystoperation uden familiehistorie med bryst- eller æggestokkræft, vil blive opnået.epitelial
brystceller vil blive isoleret, behandlet med østrogen i 48 timer og derefter bestrålet.
|
|
BRCA1 mutationsbærere
Væv fra risikoreducerende mastektomi hos raske præmenopausale kvinder med BRCA1-mutationer undergår.epitelial
brystceller vil blive isoleret, behandlet med østrogen i 48 timer og derefter bestrålet.
|
|
BRCA2 mutationsbærere
Væv fra risikoreducerende mastektomi hos raske præmenopausale kvinder med BRCA2-mutationer i gang.epitelial
brystceller vil blive isoleret, behandlet med østrogen i 48 timer og derefter bestrålet.
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Den transkriptionelle profil af heterozygote epiteliale brystceller
Tidsramme: humane brystvævsprøver vil blive indhentet fra præmenopausale kvinder, der gennemgår brystoperationer. celler vil blive isoleret øjeblikkeligt, og 48 timer senere vil transkriptionsprofilen blive identificeret.
|
vi vil udføre en RNA-seq ekspressionsprofileringsanalyse af normale østrogeneksponerede BRCA heterozygote epitelceller efter bestråling.
|
humane brystvævsprøver vil blive indhentet fra præmenopausale kvinder, der gennemgår brystoperationer. celler vil blive isoleret øjeblikkeligt, og 48 timer senere vil transkriptionsprofilen blive identificeret.
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Sponsor
Efterforskere
- Ledende efterforsker: Asher Y Salmon, MD, PhD, Hadassah Medical Organization
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart
Primær færdiggørelse (FORVENTET)
Studieafslutning (FORVENTET)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (SKØN)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (SKØN)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Nøgleord
Yderligere relevante MeSH-vilkår
Andre undersøgelses-id-numre
- ISF-1702/12
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .
Kliniske forsøg med BRCA1 genmutation
-
National Cancer Institute (NCI)AfsluttetBRCA1-gen | BRCA2-genForenede Stater
-
University of PennsylvaniaAfsluttet
-
Azienda Ospedaliera Universitaria Policlinico Paolo...Ukendt
-
Memorial Sloan Kettering Cancer CenterUniversity of Pennsylvania; University of California, Los Angeles; Dana-Farber... og andre samarbejdspartnereAktiv, ikke rekrutterende
-
Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli...RekrutteringBRCA1 mutation | BRCA2 mutationItalien
-
Duke UniversityRekrutteringBRCA1 mutation | BRCA2 mutationForenede Stater
-
Weill Medical College of Cornell UniversityBasser Research Center for BRCARekruttering
-
nVision MedicalAfsluttetBRCA1 mutation | BRCA2 mutation | Atypi mistænkelig for malignitetForenede Stater
-
European Institute of OncologyAfsluttetBRCA1 mutation | BRCA2 mutation | Psykosociale faktorerItalien
-
Abramson Cancer Center at Penn MedicineInovio PharmaceuticalsAktiv, ikke rekrutterende