Evaluatie van een nieuwe benadering van de diagnose van constitutionele functionele stoornissen van bloedplaatjes
Multicentrische evaluatie van een nieuwe laboratoriumbenadering voor de diagnose van constitutionele functionele stoornissen van bloedplaatjes
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Er is weinig bekend over de moleculaire basis van stoornissen van signaalroutes die mogelijk verantwoordelijk zijn voor constitutionele defecten van bloedplaatjesfuncties (adhesie, aggregatie of secretie) (1-5). In de routinepraktijk wordt dit onderzoek inderdaad beperkt door de complexiteit van de analyse met behulp van biochemische methoden (western-blotting) en de vereiste van grote hoeveelheden bloedplaatjes.
We hebben een nieuwe benadering ontworpen voor de kwantificering van fosfoproteïnen in het cytoplasma van bloedplaatjes door middel van flowcytometrie. Verse bloedplaatjes in bloedplaatjesrijk plasma worden geanalyseerd bij baseline of na stimulatie door belangrijke agonisten (ADP, TRAP, tromboxaananaloog of collageen-gerelateerd peptide), met en zonder relevante remmers van elke route. Multiplex-barcodering wordt gebruikt om elke aandoening te identificeren, waardoor een analyse met hoge verwerkingscapaciteit mogelijk is (6, 7). Platelet signaling profilering van Akt, Slp76, P38 MAPK en LIMK kan worden verkregen uit een bloedmonster van minder dan 10 ml, en binnen 6 uur. Het hoofddoel van de studie is om de methode te standaardiseren tussen klinische laboratoria met een standaardexpertise in flowcytometrie. De studie zal worden uitgevoerd in 4 academische ziekenhuizen die lid zijn van het Franse referentienetwerk voor zeldzame bloedplaatjesziekten. Drie groepen patiënten verwezen voor lichte of ernstige bloedingsstoornissen worden opgenomen: 1) een controlegroep van patiënten (30 per centrum) met een bloedingsstoornis die duidelijk anders is dan die van bloedplaatjes (bv. "laag" von Willebrand); 2) een groep van 10 patiënten per centrum met een duidelijke constitutionele bloedplaatjesstoornis (bijv. Glanzmann-trombasthenie) en 3) een groep van 10 patiënten per centrum met een defect in de bloedplaatjesfunctie van onbekende oorsprong, mogelijk defect in de signaalroute.
De controlegroep zal dienen om de methode tussen centra te standaardiseren en om de referentiewaarden vast te stellen. Er zal een kwaliteitscontrole worden opgezet door gebruik te maken van ingevroren trombocytenpreparaten. De patiënten met een duidelijke bloedplaatjesaandoening zullen nuttig zijn voor het opsporen van potentiële signaleringsdefecten die nog niet beschreven zijn in deze pathologieën. Bloedplaatjessignaleringsdefecten die in deze groepen kunnen worden aangetoond, zullen verder worden geïdentificeerd met conventionele biochemische en moleculaire methoden na bevestiging op een nieuw monster.
Als deze nieuwe aanpak kan worden voorgesteld aan klinische laboratoria die werken aan zeldzame bloedplaatjesziekten, verwachten we een vooruitgang in onze kennis in het veld. Bovendien heeft de methode een potentieel in farmaceutische innovatie, voor het identificeren (8) of het monitoren van nieuwe plaatjesaggregatieremmers (9, 10), of het identificeren van bloedplaatjesdefecten veroorzaakt door nieuwe "doelwittherapieën" die zijn ontworpen voor andere ziekten zoals kanker of immuunpathologieën (10 ).
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Fase
- Niet toepasbaar
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Toulouse, Frankrijk, 31000
- University Hospital toulouse
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- consultatie van patiënten voor hemorragische symptomen met een bloedingsaandoening die duidelijk anders is dan die van bloedplaatjes (bijv. "laag" von Willebrand) / of constitutionele bloedplaatjesstoornis (bijv. Glanzmann-trombasthenie) / of met een defect in de bloedplaatjesfunctie van onbekende oorsprong, mogelijk defect in de signaalroute.
- Geïnformeerd toestemmingsformulier
- patiënt met een sociale zekerheidsverzekering of gelijkwaardig
Uitsluitingscriteria:
- behandeling die de bloedplaatjesfunctie verstoort binnen 7 dagen voorafgaand aan inschrijving
- trombocytopenie <100G/L
- drachtige of zogende vrouwtjes
- proefpersonen die onder curatele of curatele staan
- proefpersonen die betrokken zijn bij een ander klinisch onderzoek
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Primair doel: Diagnostisch
- Toewijzing: Niet-gerandomiseerd
- Interventioneel model: Parallelle opdracht
- Masker: Geen (open label)
Wapens en interventies
Deelnemersgroep / Arm |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Ander: bloedingsstoornis
Bloedprikken bij patiënten met een bloedingsaandoening die duidelijk anders is dan die van bloedplaatjes (bijv.
"laag" von Willebrand)
|
T1 en T2: één bloedpunctie met signalisatietest (T1 voor elke arm, T2 bij +6 maanden alleen als er een afwijking bij signalisatietest wordt vastgesteld) signalisatietest wordt uitgevoerd door flowcytometrie Fase 1: voor arm "bloedingsstoornis": flowcytometrie-analyse om referentiewaarden vast te stellen die zijn waargenomen bij proefpersonen zonder trombopathie voor elke marker na agonistische stimulatie en overeenkomstig zoeken naar een effect als een centrum-centrum-effect wordt waargenomen op de referentiewaarden, zal de oorsprong ervan zijn gezocht en gecorrigeerd. Fase 2: voor de twee andere armen: er zullen verschillende markeringen worden geanalyseerd, die overeenkomen met routes of niveaus van verschillende signalering. Voor elk van deze markers zal de test de fosforyleringsactiviteit van het geteste eiwit kwantitatief evalueren. |
|
Ander: constitutionele bloedplaatjesstoornis
Bloedprikken bij patiënten met een constitutionele bloedplaatjesstoornis (bijv.
Glanzmann-trombasthenie)
|
T1 en T2: één bloedpunctie met signalisatietest (T1 voor elke arm, T2 bij +6 maanden alleen als er een afwijking bij signalisatietest wordt vastgesteld) signalisatietest wordt uitgevoerd door flowcytometrie Fase 1: voor arm "bloedingsstoornis": flowcytometrie-analyse om referentiewaarden vast te stellen die zijn waargenomen bij proefpersonen zonder trombopathie voor elke marker na agonistische stimulatie en overeenkomstig zoeken naar een effect als een centrum-centrum-effect wordt waargenomen op de referentiewaarden, zal de oorsprong ervan zijn gezocht en gecorrigeerd. Fase 2: voor de twee andere armen: er zullen verschillende markeringen worden geanalyseerd, die overeenkomen met routes of niveaus van verschillende signalering. Voor elk van deze markers zal de test de fosforyleringsactiviteit van het geteste eiwit kwantitatief evalueren. |
|
Ander: defect van de bloedplaatjesfunctie
Bloedpunctie bij patiënten met een defect in de bloedplaatjesfunctie van onbekende oorsprong, mogelijk defect in de signaalroute.
|
T1 en T2: één bloedpunctie met signalisatietest (T1 voor elke arm, T2 bij +6 maanden alleen als er een afwijking bij signalisatietest wordt vastgesteld) signalisatietest wordt uitgevoerd door flowcytometrie Fase 1: voor arm "bloedingsstoornis": flowcytometrie-analyse om referentiewaarden vast te stellen die zijn waargenomen bij proefpersonen zonder trombopathie voor elke marker na agonistische stimulatie en overeenkomstig zoeken naar een effect als een centrum-centrum-effect wordt waargenomen op de referentiewaarden, zal de oorsprong ervan zijn gezocht en gecorrigeerd. Fase 2: voor de twee andere armen: er zullen verschillende markeringen worden geanalyseerd, die overeenkomen met routes of niveaus van verschillende signalering. Voor elk van deze markers zal de test de fosforyleringsactiviteit van het geteste eiwit kwantitatief evalueren. |
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
standaardiseren van de methode tussen klinische laboratoria
Tijdsspanne: 3 jaar
|
Dit is een pilootstudie van een nieuwe benadering van het screenen van stoornissen van de signaalroutes van bloedplaatjes door middel van flowcytometrie met methodologische primaire uitkomsten (12) als volgt: 1) om de methode tussen klinische laboratoria te standaardiseren, 2) om referentiewaarden van de methode vast te stellen en 3) om een kwaliteitscontrolebeoordeling te ontwerpen Het primaire eindpunt zal zich richten op de algehele variabiliteit van referentiewaarden waargenomen bij proefpersonen zonder trombopathie voor elke marker na agoniststimulatie en overeenkomstig zoeken naar een effect. protocol, partij reagens .....) en gecorrigeerd. Het "centrumeffect" zal ook worden geanalyseerd door de driemaandelijkse kwaliteitscontrole, die de resultaten zal vergelijken die zijn verkregen uit dezelfde wafertests die tegelijkertijd op drie locaties zijn geanalyseerd. |
3 jaar
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Om de signaalroutes bij bloedplaatjesstoornissen te beschrijven
Tijdsspanne: 3 jaar
|
Beschrijven van de signaalroutes bij trombocytenstoornissen met definitieve diagnose. Screenen van vermoedelijke defecten bij bloedende patiënten met trombocytenfunctiestoornissen van onbekende oorsprong. De gevonden defecten in deze groepen nader identificeren. Er zullen verschillende markeringen worden geanalyseerd, die overeenkomen met routes of niveaus van verschillende signalering. Voor elk van deze markers zal de test de fosforyleringsactiviteit van het geteste eiwit kwantitatief evalueren. We kunnen dus voor elk onderwerp en elke marker de respons op de test bepalen, gedefinieerd door:
|
3 jaar
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Onderzoekers
- Hoofdonderzoeker: Pierre SIE, MD PhD, University Hospital, Toulouse
Publicaties en nuttige links
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Geschat)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Geschat)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Trefwoorden
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- 12 068 08
- PHRCI 2012 (Ander subsidie-/financieringsnummer: French Ministry of Health)
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .