A vérlemezkék alkotmányos működési zavarai diagnosztikájának új megközelítésének értékelése
A vérlemezkék alkotmányos funkcionális rendellenességeinek diagnosztizálására szolgáló új laboratóriumi megközelítés többközpontú értékelése
A tanulmány áttekintése
Részletes leírás
Keveset tudunk a jelátviteli útvonalak zavarainak molekuláris alapjáról, amelyek potenciálisan felelősek a vérlemezke-funkciók (adhézió, aggregáció vagy szekréció) szerkezeti hibáiért (1-5). Valójában a rutin gyakorlatban ennek a vizsgálatnak a biokémiai módszerekkel (western blot) végzett elemzés bonyolultsága és a nagy mennyiségű vérlemezke szükségessége korlátozza.
Új megközelítést dolgoztunk ki a vérlemezke citoplazmatikus foszfoproteinek mennyiségi meghatározására áramlási citometriával. A vérlemezkében gazdag plazmában lévő friss vérlemezkék elemzése a kiinduláskor vagy a fő agonisták (ADP, TRAP, tromboxán analóg vagy kollagénnel rokon peptid) általi stimuláció után történik, az egyes útvonalak releváns inhibitoraival és anélkül. Multiplex vonalkódolást használnak az egyes állapotok azonosítására, lehetővé téve a nagy teljesítményű elemzést (6, 7). Az Akt, Slp76, P38 MAPK és LIMK vérlemezke jelátviteli profilozása 10 ml-nél kisebb vérmintából nyerhető, és 6 órán belül A vizsgálat fő célja a módszer szabványosítása az áramlási citometriában standard szakértelemmel rendelkező klinikai laboratóriumok között. A vizsgálatot a ritka thrombocyta-betegségek francia referenciahálózatának 4 akadémiai kórházában végzik. Az enyhe vagy súlyos vérzési rendellenességek miatt beutalt betegek három csoportja szerepel: 1) a betegek kontrollcsoportja (központonként 30), akiknek vérlemezke eredetű (pl. "alacsony" von Willebrand); 2) központonként 10 betegből álló csoport, akiknek határozott konstitucionális vérlemezke-rendellenességük van (pl. Glanzmann thrombasthenia) és 3) központonként 10 betegből álló csoport, akiknek ismeretlen eredetű thrombocytafunkció-hibája van, és potenciálisan hibás a jelátviteli útvonalban.
A kontrollcsoport a központok közötti módszer szabványosítására és a referenciaértékek megállapítására szolgál. A minőség-ellenőrzést fagyasztott vérlemezke-készítmények felhasználásával állítják be. A határozott thrombocyta-rendellenességben szenvedő betegek hasznosak lehetnek a lehetséges jelátviteli hibák kimutatására, amelyeket ezekben a patológiákban még nem írtak le. Az ezekben a csoportokban kimutatható thrombocyta jelátviteli hibákat hagyományos biokémiai és molekuláris módszerekkel tovább azonosítják, miután egy új mintán megerősítik.
Ha ezt az új megközelítést a ritka thrombocyta-betegségekkel foglalkozó klinikai laboratóriumok számára javasolják, akkor tudásunk előrehaladását várjuk ezen a területen. Ezen túlmenően a módszerben lehetőség van a gyógyszerészeti innovációban, új thrombocyta-aggregáció-gátló szerek azonosítására (8) vagy monitorozására (9, 10), vagy olyan vérlemezke-defektusok azonosítására, amelyeket más betegségek, például rák vagy immunpatológiák kezelésére tervezett új "célterápiák" okoznak (10). ).
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Tényleges)
Fázis
- Nem alkalmazható
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi helyek
-
-
-
Toulouse, Franciaország, 31000
- University Hospital TOULOUSE
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányozható nemek
Leírás
Bevételi kritériumok:
- Vérzéses tünetekkel foglalkozó beteg, aki határozottan nem thrombocyta eredetű (pl. "alacsony" von Willebrand) / vagy alkotmányos vérlemezke-rendellenesség (pl. Glanzmann thrombasthenia) / vagy ismeretlen eredetű thrombocytafunkció-hibával, potenciálisan hibás a jelátviteli útvonalban.
- Tájékozott hozzájárulási űrlap
- társadalombiztosítással vagy azzal egyenértékű beteggel
Kizárási kritériumok:
- a vérlemezkeműködést befolyásoló kezelést a beiratkozást megelőző 7 napon belül
- thrombocytopenia <100 G/l
- terhes vagy szoptató nőstények
- törvényes védelmi gondnokság vagy gondnokság alatt álló alanyok
- egy másik klinikai vizsgálatban részt vevő alanyok
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Elsődleges cél: Diagnosztikai
- Kiosztás: Nem véletlenszerű
- Beavatkozó modell: Párhuzamos hozzárendelés
- Maszkolás: Nincs (Open Label)
Fegyverek és beavatkozások
Résztvevő csoport / kar |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Egyéb: vérzési zavar
Vérpunkció olyan betegeknél, akiknek vérzési rendellenessége határozottan nem thrombocyta eredetű (pl.
"alacsony" von Willebrand)
|
T1 és T2: egy vérvétel jeladási teszttel (T1 mindkét karon, T2 +6 hónapnál csak akkor, ha a jelátviteli teszt anomáliát észlel) A jelátviteli teszt áramlási citometriával történik 1. szakasz: kar "vérzési rendellenesség" esetén: áramlási citometriai analízis a trombopátia nélküli alanyoknál megfigyelt referenciaértékek megállapítására minden egyes marker esetében agonista stimuláció után, és a hatás megfelelő keresése, ha a referenciaértékeken központ-központ hatás figyelhető meg, annak eredete megkeresték és kijavították. 2. szakasz: a másik két kar esetében: Számos markert elemzünk a különböző jelzések útvonalainak vagy szintjei szerint. Mindegyik marker esetében a teszt kvantitatívan értékeli a vizsgált fehérje foszforilációs aktivitását. |
|
Egyéb: alkotmányos vérlemezke rendellenesség
Vérpunkció alkotmányos vérlemezke-rendellenességben szenvedő betegeknél (pl.
Glanzmann-trombaszténia)
|
T1 és T2: egy vérvétel jeladási teszttel (T1 mindkét karon, T2 +6 hónapnál csak akkor, ha a jelátviteli teszt anomáliát észlel) A jelátviteli teszt áramlási citometriával történik 1. szakasz: kar "vérzési rendellenesség" esetén: áramlási citometriai analízis a trombopátia nélküli alanyoknál megfigyelt referenciaértékek megállapítására minden egyes marker esetében agonista stimuláció után, és a hatás megfelelő keresése, ha a referenciaértékeken központ-központ hatás figyelhető meg, annak eredete megkeresték és kijavították. 2. szakasz: a másik két kar esetében: Számos markert elemzünk a különböző jelzések útvonalainak vagy szintjei szerint. Mindegyik marker esetében a teszt kvantitatívan értékeli a vizsgált fehérje foszforilációs aktivitását. |
|
Egyéb: a vérlemezke funkció hibája
Vérpunkció ismeretlen eredetű thrombocyta-funkciós hibában szenvedő betegeknél, esetleg hibás a jelátviteli útvonalban.
|
T1 és T2: egy vérvétel jeladási teszttel (T1 mindkét karon, T2 +6 hónapnál csak akkor, ha a jelátviteli teszt anomáliát észlel) A jelátviteli teszt áramlási citometriával történik 1. szakasz: kar "vérzési rendellenesség" esetén: áramlási citometriai analízis a trombopátia nélküli alanyoknál megfigyelt referenciaértékek megállapítására minden egyes marker esetében agonista stimuláció után, és a hatás megfelelő keresése, ha a referenciaértékeken központ-központ hatás figyelhető meg, annak eredete megkeresték és kijavították. 2. szakasz: a másik két kar esetében: Számos markert elemzünk a különböző jelzések útvonalainak vagy szintjei szerint. Mindegyik marker esetében a teszt kvantitatívan értékeli a vizsgált fehérje foszforilációs aktivitását. |
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
szabványosítani a módszert a klinikai laboratóriumok között
Időkeret: 3 év
|
Ez egy kísérleti tanulmány a vérlemezke jelátviteli útvonalak rendellenességeinek áramlási citometriával történő szűrésének új megközelítéséről, melynek módszertani elsődleges eredményei (12) a következők: 1) a módszer standardizálása a klinikai laboratóriumok között, 2) a módszer referenciaértékeinek meghatározása és 3) minőség-ellenőrzési értékelés megtervezéséhez Az elsődleges végpont a thrombopathiában nem szenvedő alanyoknál megfigyelt referenciaértékek általános variabilitására fog összpontosítani minden egyes marker esetében agonista stimuláció után, és ennek megfelelő hatáskeresésre, ha a középponti hatás megfigyelhető azon referenciaértékeken, amelyek eredetét keresni fogják (eltérés a protokoll, reagens tétel .....) és javítva. A „központi hatást” a negyedéves minőség-ellenőrzés is elemzi, amely három helyszínen, egyidejűleg elemzett azonos ostyatesztek eredményeit fogja összehasonlítani. |
3 év
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
A jelátviteli útvonalak leírása thrombocyta-rendellenességekben
Időkeret: 3 év
|
A jelátviteli útvonalak leírása thrombocyta-rendellenességekben definiált diagnózissal. A feltételezett defektusok kiszűrése ismeretlen eredetű thrombocyta-működési zavarban szenvedő betegeknél Az ezekben a csoportokban talált defektusok mélyebb azonosítása. Számos markert elemzünk, amelyek megfelelnek a különböző jelzések útvonalainak vagy szintjeinek. Mindegyik marker esetében a teszt kvantitatívan értékeli a vizsgált fehérje foszforilációs aktivitását. Így minden alanyra és minden markerre meghatározhatjuk a tesztre adott választ, amelyet a következők határoznak meg:
|
3 év
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Nyomozók
- Kutatásvezető: Pierre SIE, MD PhD, CHU Toulouse
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete
Elsődleges befejezés (Tényleges)
A tanulmány befejezése (Tényleges)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Becslés)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- 12 068 08
- PHRCI 2012 (Egyéb támogatási/finanszírozási szám: French Ministry of Health)
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .