Evaluación de un Nuevo Enfoque del Diagnóstico de los Trastornos Funcionales Constitucionales de las Plaquetas
Evaluación multicéntrica de un nuevo enfoque de laboratorio para el diagnóstico de trastornos funcionales constitucionales de las plaquetas
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
Poco se sabe de la base molecular de los trastornos de las vías de señalización potencialmente responsables de los defectos constitucionales de las funciones plaquetarias (adhesión, agregación o secreción) (1-5). De hecho, en la práctica habitual, esta investigación está limitada por la complejidad del análisis que utiliza métodos bioquímicos (Western blotting) y la necesidad de una gran cantidad de plaquetas.
Hemos diseñado un nuevo enfoque para la cuantificación de fosfoproteínas citoplasmáticas de plaquetas por citometría de flujo. Las plaquetas frescas en plasma rico en plaquetas se analizan al inicio del estudio o después de la estimulación con agonistas principales (ADP, TRAP, análogo de tromboxano o péptido relacionado con el colágeno), con y sin inhibidores relevantes de cada vía. El código de barras multiplex se utiliza para identificar cada condición, lo que permite un análisis de alto rendimiento (6, 7). El perfil de señalización plaquetaria de Akt, Slp76, P38 MAPK y LIMK se puede obtener a partir de una muestra de sangre de menos de 10 ml y en 6 horas. El objetivo principal del estudio es estandarizar el método entre laboratorios clínicos con experiencia estándar en citometría de flujo. El estudio se realizará en 4 hospitales académicos miembros de la red de referencia francesa de enfermedades plaquetarias raras. Se incluirán tres grupos de pacientes remitidos por trastornos hemorrágicos leves o graves: 1) un grupo control de pacientes (30 por centro) con un trastorno hemorrágico definitivamente distinto al de origen plaquetario (p. "bajo" von Willebrand); 2) un grupo de 10 pacientes por centro con trastorno plaquetario constitucional definido (p. trombastenia de Glanzmann) y 3) un grupo de 10 pacientes por centro con un defecto de la función plaquetaria de origen desconocido, potencialmente defectuoso en la vía de señalización.
El grupo de control servirá para estandarizar el método entre centros y establecer los valores de referencia. Se establecerá un control de calidad utilizando preparaciones de plaquetas congeladas. Los pacientes con trastorno plaquetario definitivo serán de utilidad para detectar posibles defectos de señalización aún no descritos en estas patologías. Los defectos de señalización de las plaquetas que podrían evidenciarse en estos grupos se identificarán más mediante métodos bioquímicos y moleculares convencionales después de la confirmación en una nueva muestra.
Si este nuevo enfoque se puede proponer a los laboratorios clínicos que trabajan en enfermedades plaquetarias raras, esperamos un avance en nuestro conocimiento en el campo. Además, el método tiene potencial en innovación farmacéutica, para identificar (8) o monitorizar nuevos agentes antiplaquetarios (9, 10), o identificar defectos plaquetarios inducidos por nuevas "terapias diana" diseñadas para otras enfermedades como el cáncer o patologías inmunitarias (10 ).
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Toulouse, Francia, 31000
- University Hospital toulouse
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios de inclusión:
- Paciente que consulta por sintomatología hemorrágica con un trastorno hemorrágico definitivamente distinto al de origen plaquetario (p. "bajo" von Willebrand) / o trastorno plaquetario constitucional (p. trombastenia de Glanzmann) / o con un defecto de la función plaquetaria de origen desconocido, potencialmente defectuoso en la vía de señalización.
- formulario de consentimiento informado
- paciente con seguro de seguridad social o equivalente
Criterio de exclusión:
- tratamiento que interfiere con la función de las plaquetas dentro de los 7 días anteriores a la inscripción
- trombocitopenia <100G/L
- hembras gestantes o lactantes
- sujetos bajo medida de tutela o tutela de protección jurídica
- sujetos involucrados en otro ensayo clínico
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Diagnóstico
- Asignación: No aleatorizado
- Modelo Intervencionista: Asignación paralela
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Otro: desorden sangrante
Punción de sangre en pacientes con trastornos hemorrágicos definitivamente distintos de los de origen plaquetario (p.
"bajo" von Willebrand)
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T1 y T2: una punción de sangre con prueba de señalización (T1 para cada brazo, T2 a los +6 meses solo si se detecta una anomalía en la prueba de señalización) la prueba de señalización se realiza mediante citometría de flujo Etapa 1: para el brazo "trastorno hemorrágico": análisis de citometría de flujo para establecer valores de referencia observados en sujetos sin trombopatía para cada marcador después de la estimulación con agonista y la búsqueda correspondiente de un efecto si se observa un efecto centro-centro en los valores de referencia su origen será buscado y corregido. Etapa 2: para los otros dos brazos: Se analizarán varias balizas, correspondientes a rutas o niveles de diferente señalización. Para cada uno de estos marcadores, la prueba evaluará cuantitativamente la actividad de fosforilación de la proteína analizada. |
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Otro: trastorno plaquetario constitucional
Punción de sangre en pacientes con trastorno plaquetario constitucional (p.
trombastenia de Glanzmann)
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T1 y T2: una punción de sangre con prueba de señalización (T1 para cada brazo, T2 a los +6 meses solo si se detecta una anomalía en la prueba de señalización) la prueba de señalización se realiza mediante citometría de flujo Etapa 1: para el brazo "trastorno hemorrágico": análisis de citometría de flujo para establecer valores de referencia observados en sujetos sin trombopatía para cada marcador después de la estimulación con agonista y la búsqueda correspondiente de un efecto si se observa un efecto centro-centro en los valores de referencia su origen será buscado y corregido. Etapa 2: para los otros dos brazos: Se analizarán varias balizas, correspondientes a rutas o niveles de diferente señalización. Para cada uno de estos marcadores, la prueba evaluará cuantitativamente la actividad de fosforilación de la proteína analizada. |
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Otro: defecto de la función plaquetaria
Punción de sangre en pacientes con defecto de la función plaquetaria de origen desconocido, potencialmente defectuoso en la vía de señalización.
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T1 y T2: una punción de sangre con prueba de señalización (T1 para cada brazo, T2 a los +6 meses solo si se detecta una anomalía en la prueba de señalización) la prueba de señalización se realiza mediante citometría de flujo Etapa 1: para el brazo "trastorno hemorrágico": análisis de citometría de flujo para establecer valores de referencia observados en sujetos sin trombopatía para cada marcador después de la estimulación con agonista y la búsqueda correspondiente de un efecto si se observa un efecto centro-centro en los valores de referencia su origen será buscado y corregido. Etapa 2: para los otros dos brazos: Se analizarán varias balizas, correspondientes a rutas o niveles de diferente señalización. Para cada uno de estos marcadores, la prueba evaluará cuantitativamente la actividad de fosforilación de la proteína analizada. |
¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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estandarizar el método entre laboratorios clínicos
Periodo de tiempo: 3 años
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Este es un estudio piloto de un nuevo enfoque de detección de trastornos de las vías de señalización plaquetaria mediante citometría de flujo con los siguientes resultados metodológicos primarios (12): 1) estandarizar el método entre laboratorios clínicos, 2) establecer valores de referencia del método y 3) para diseñar una evaluación de control de calidad El criterio principal de valoración se centrará en la variabilidad global de los valores de referencia observados en sujetos sin trombopatía para cada marcador tras la estimulación con agonistas y la búsqueda correspondiente de un efecto si se observa un efecto centro-centro en los valores de referencia se buscará su origen (desviación del protocolo, lote de reactivos...) y corregido. El "efecto centro" también será analizado por el control de calidad trimestral, que comparará los resultados obtenidos de las mismas pruebas de obleas analizadas simultáneamente en tres sitios. |
3 años
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Describir las vías de señalización en los trastornos plaquetarios.
Periodo de tiempo: 3 años
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Describir las vías de señalización en trastornos plaquetarios con diagnóstico definitivo. Detección de supuestos defectos en pacientes hemorrágicos con trastornos de la función plaquetaria de origen desconocido. Identificar con mayor profundidad los defectos encontrados en estos grupos. Se analizarán varios marcadores, correspondientes a rutas o niveles de diferente señalización. Para cada uno de estos marcadores, la prueba evaluará cuantitativamente la actividad de fosforilación de la proteína analizada. Así podemos determinar para cada sujeto y cada marcador, la respuesta al test definida por:
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3 años
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Pierre SIE, MD PhD, University Hospital, Toulouse
Publicaciones y enlaces útiles
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Actual)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Estimado)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Estimado)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- 12 068 08
- PHRCI 2012 (Otro número de subvención/financiamiento: French Ministry of Health)
Esta información se obtuvo directamente del sitio web clinicaltrials.gov sin cambios. Si tiene alguna solicitud para cambiar, eliminar o actualizar los detalles de su estudio, comuníquese con register@clinicaltrials.gov. Tan pronto como se implemente un cambio en clinicaltrials.gov, también se actualizará automáticamente en nuestro sitio web. .