Immuunfunctie bij acuut nierletsel

Hypothese:

Een overheersende pro-inflammatoire immuunrespons ligt ten grondslag aan AKI bij mensen, wat bijdraagt ​​aan disfunctie van niet-renale organen

Hoofdonderzoeksvraag:

Is AKI bij mensen geassocieerd met een overwegend pro-inflammatoire immuunrespons?

Secundaire onderzoeksvragen:

1. Heeft AKI invloed op de fenotypische karakterisering en functie van neutrofielen?
2. Leidt de ernst van AKI tot verschillen in fenotypische karakterisering en functie van neutrofielen?
3. Wat zijn de verschillen in cytokineprofielen tussen AKI-patiënten met en zonder systemische ontsteking?
4. Wat zijn de verschillen in cytokineprofielen tussen AKI-patiënten met systemische ontsteking en patiënten met systemische ontsteking zonder AKI?
5. Is er een correlatie tussen microRNA-niveaus bij patiënten met AKI en mate van AKI, nierherstel en patiëntuitkomst?

Studie ontwerp:

Observationeel niet-interventioneel onderzoek

Studiepopulatie:

30 patiënten met AKI stadium II of III* en systemische ontsteking zonder sepsis 30 patiënten met AKI stadium II of III* en geen systemische ontsteking 30 patiënten met systemische ontsteking en normale nierfunctie 30 patiënten na een grote operatie die geen infectie, SIRS of AKI

* AKI wordt bepaald door de KDIGO-criteria

Primaire uitkomst Detectie van meetbare fenotypische kenmerken en functie van leukocyten die specifiek zijn voor patiënten met AKI.

Secundaire uitkomsten:

1. Verschillen in fenotypische karakterisering en functie van neutrofielen tussen patiënten met AKI stadium II en III.
2. Verschillen in fenotypische karakterisering en functie van neutrofielen tussen patiënten met en zonder AKI.
3. Verschillen in cytokineprofielen tussen patiënten met AKI en systemische ontsteking en patiënten met AKI zonder systemische ontsteking
4. Verschillen in cytokineprofielen tussen AKI-patiënten met systemische ontsteking en patiënten met systemische ontsteking zonder AKI
5. Correlatie tussen microRNA-niveaus bij patiënten met AKI en nierherstel
6. Correlatie tussen microRNA-niveaus bij patiënten met AKI en patiëntuitkomst
7. Verschillen in cytokineprofielen tussen AKI-patiënten zonder systemische ontsteking en patiënten zonder AKI en zonder systemische ontsteking/infectie.

Statistische analyse:

Voor de analyse van laboratoriumvariabelen die het immunologische fenotype beschrijven, zullen standaard statistische methoden worden toegepast. 1) Wanneer aan de aanname van normale verdeling wordt voldaan, zullen groepen worden vergeleken met behulp van ANOVA en de overeenkomstige contrasten voor vergelijkingen per groep; 2) Bij afwezigheid van normaliteit of voor ordinale variabelen, wordt Kruskal Wallis toegepast voor vergelijkingen met meerdere groepen en Wilcoxon voor analyse met twee groepen. We zullen meerdere testcorrecties toepassen via Benjamini-Hochberg FDR-controle.

Voor de analyse van miRNA-arraygegevens zullen we eerst de protocolkwaliteitscontrolemaatregelen volgen die geschikt zijn voor het platform van keuze, en vervolgens statistische analyse uitvoeren met behulp van de SAMr- en LIMMA-pakketten van Bioconductor, via de R-software. Evenzo zal voor de analyse van PCR-gegevens het pakket HTqPCR van bioconductor worden gebruikt voor kwaliteitscontrole. Afhankelijk van de verdeling van de definitieve gegevens, wordt ofwel niet-parametrische statistiek, ofwel een gemodereerde t-toets toegepast voor statistische vergelijkingen, met de overeenkomstige meerdere testcorrecties zoals hierboven.