Immunfunkciók akut vesekárosodásban

Hipotézis:

Az emberekben az AKI hátterében egy mindenek felett álló gyulladást elősegítő immunválasz áll, amely hozzájárul a nem vese szervek működési zavarához

A kutatás fő kérdése:

Az emberekben az AKI túlnyomórészt gyulladást elősegítő immunválaszhoz kapcsolódik?

Másodlagos kutatási kérdések:

1. Befolyásolja-e az AKI a neutrofilek fenotípusos jellemzését és működését?
2. Az AKI súlyossága eltérésekhez vezet a neutrofilek fenotípusos jellemzésében és funkciójában?
3. Milyen különbségek vannak a citokinprofilokban a szisztémás gyulladásos és nem szisztémás gyulladásos AKI-s betegek között?
4. Milyen különbségek vannak a citokin profilban a szisztémás gyulladásban szenvedő AKI-s betegek és az AKI nélküli szisztémás gyulladásos betegek között?
5. Van-e összefüggés az AKI-s betegek mikroRNS-szintje és az AKI foka, a vese gyógyulása és a beteg kimenetele között?

Dizájnt tanulni:

Megfigyeléses, nem beavatkozási vizsgálat

Vizsgálati populáció:

30 beteg AKI II. vagy III. stádiumban * és szisztémás gyulladásban szepszis nélkül 30 beteg AKI II. vagy III. stádiumban * és nincs szisztémás gyulladás 30 beteg szisztémás gyulladásban és normális veseműködésben 30 beteg nagy műtét után, akiknél nincs fertőzés, SIRS ill. AKI

* Az AKI-t a KDIGO kritériumai határozzák meg

Elsődleges eredmény A leukociták mérhető fenotípusos jellemzőinek és funkcióinak kimutatása, amelyek AKI-s betegekre jellemzőek.

Másodlagos eredmények:

1. Különbségek a neutrofilek fenotípusos jellemzésében és funkciójában az AKI II és III stádiumú betegek között.
2. Különbségek a neutrofilek fenotípusos jellemzésében és funkciójában az AKI-s és nem szenvedő betegek között.
3. Különbségek a citokinprofilokban az AKI-s és szisztémás gyulladásos betegek, valamint a szisztémás gyulladás nélküli AKI-s betegek között
4. Különbségek a citokinprofilokban a szisztémás gyulladásban szenvedő AKI-s betegek és az AKI nélküli szisztémás gyulladásban szenvedő betegek között
5. Korreláció az AKI-s betegek mikroRNS-szintje és a vese helyreállítása között
6. Korreláció az AKI-s betegek mikroRNS-szintje és a beteg kimenetele között
7. Különbségek a citokinprofilokban a szisztémás gyulladásban nem szenvedő AKI-s betegek és a szisztémás gyulladás/fertőzés nélküli AKI-s betegek között.

Statisztikai analízis:

Az immunológiai fenotípust leíró laboratóriumi változók elemzéséhez standard statisztikai módszereket kell alkalmazni. 1) Ha a normál eloszlási feltételezés teljesül, a csoportokat ANOVA-val és a megfelelő kontrasztokkal hasonlítják össze a csoportonkénti összehasonlításokhoz; 2) Normalitás hiányában vagy ordinális változók esetén a Kruskal Wallis-t alkalmazzuk a többcsoportos összehasonlításhoz, a Wilcoxon pedig a kétcsoportos elemzéshez. Többszörös tesztelési korrekciót alkalmazunk a Benjamini-Hochberg FDR vezérléssel.

A miRNS tömb adatok elemzéséhez először a választott platformnak megfelelő protokoll minőségellenőrzési intézkedéseket követjük, majd a Bioconductor SAMr és LIMMA csomagjaival, az R szoftveren keresztül statisztikai elemzést végzünk. Hasonlóképpen a PCR adatok elemzéséhez a bioconductor HTqPCR csomagot használják minőségellenőrzésre. A végső adatok eloszlásától függően vagy nem paraméteres statisztikát, vagy moderált t-próbát alkalmazunk a statisztikai összehasonlításhoz, a megfelelő többszörös tesztelési korrekciókkal a fentiek szerint.