Imunitní funkce při akutním poškození ledvin

Hypotéza:

Převažující prozánětlivá imunitní odpověď je základem AKI u lidí, která přispívá k dysfunkci jiných než ledvinových orgánů

Hlavní výzkumná otázka:

Je AKI u lidí spojena s převážně prozánětlivou imunitní reakcí?

Sekundární výzkumné otázky:

1. Ovlivňuje AKI fenotypovou charakterizaci a funkci neutrofilů?
2. Vede závažnost AKI k rozdílům ve fenotypové charakterizaci a funkci neutrofilů?
3. Jaké jsou rozdíly v cytokinových profilech mezi pacienty s AKI se systémovým zánětem a bez něj?
4. Jaké jsou rozdíly v cytokinových profilech mezi pacienty s AKI se systémovým zánětem a pacienty se systémovým zánětem bez AKI?
5. Existuje korelace mezi hladinami mikroRNA u pacientů s AKI a stupněm AKI, renálním zotavením a výsledkem pacienta?

Studovat design:

Observační neintervenční studie

Studijní populace:

30 pacientů s AKI stadia II nebo III * a systémovým zánětem bez sepse 30 pacientů s AKI stadia II nebo III * a bez systémového zánětu 30 pacientů se systémovým zánětem a normální funkcí ledvin 30 pacientů po velkém chirurgickém výkonu, kteří nemají infekci, SIRS resp. AKI

* AKI bude definováno podle kritérií KDIGO

Primární výsledek Detekce měřitelných fenotypových charakteristik a funkce leukocytů, které jsou specifické pro pacienty s AKI.

Sekundární výsledky:

1. Rozdíly ve fenotypové charakterizaci a funkci neutrofilů mezi pacienty s AKI stadia II a III.
2. Rozdíly ve fenotypové charakterizaci a funkci neutrofilů mezi pacienty s a bez AKI.
3. Rozdíly v cytokinových profilech mezi pacienty s AKI a systémovým zánětem a pacienty s AKI bez systémového zánětu
4. Rozdíly v cytokinových profilech mezi pacienty s AKI se systémovým zánětem a pacienty se systémovým zánětem bez AKI
5. Korelace mezi hladinami mikroRNA u pacientů s AKI a obnovením ledvin
6. Korelace mezi hladinami mikroRNA u pacientů s AKI a výsledkem pacienta
7. Rozdíly v cytokinových profilech mezi pacienty s AKI bez systémového zánětu a pacienty bez AKI a bez systémového zánětu/infekce.

Statistická analýza:

Pro analýzu laboratorních proměnných, které popisují imunologický fenotyp, budou použity standardní statistické metody. 1) Když je splněn předpoklad normálního rozdělení, skupiny budou porovnány pomocí ANOVA a odpovídajících kontrastů pro srovnání skupin po skupinách; 2) Při absenci normality nebo pro ordinální proměnné bude Kruskal Wallis použit pro víceskupinová srovnání a Wilcoxon pro dvouskupinovou analýzu. Použijeme vícenásobnou korekci testování pomocí ovládání Benjamini-Hochberg FDR.

Pro analýzu dat z pole miRNA budeme nejprve dodržovat opatření kontroly kvality protokolu vhodná pro zvolenou platformu a následně provedeme statistickou analýzu pomocí balíčků SAMr a LIMMA od Bioconductor prostřednictvím softwaru R. Podobně pro analýzu PCR dat bude pro kontrolu kvality použit balíček HTqPCR od bioconductor. V závislosti na distribuci konečných dat bude pro statistická srovnání použita buď neparametrická statistika, nebo moderovaný t-test s odpovídajícími vícenásobnými testovacími korekcemi, jak je uvedeno výše.