Función inmunitaria en la lesión renal aguda

Hipótesis:

Una respuesta inmunitaria proinflamatoria predominante subyace a la AKI en humanos, lo que contribuye a la disfunción de órganos no renales

Pregunta principal de investigación:

¿La AKI en humanos está asociada con una respuesta inmune predominantemente proinflamatoria?

Preguntas de investigación secundarias:

1. ¿La AKI afecta la caracterización fenotípica y la función de los neutrófilos?
2. ¿La gravedad de la LRA conduce a diferencias en la caracterización fenotípica y la función de los neutrófilos?
3. ¿Cuáles son las diferencias en los perfiles de citoquinas entre pacientes con AKI con y sin inflamación sistémica?
4. ¿Cuáles son las diferencias en los perfiles de citocinas entre pacientes con LRA e inflamación sistémica y pacientes con inflamación sistémica sin LRA?
5. ¿Existe una correlación entre los niveles de microARN en pacientes con LRA y el grado de LRA, la recuperación renal y la evolución del paciente?

Diseño del estudio:

Estudio observacional no intervencionista

Población de estudio:

30 pacientes con LRA en estadio II o III* e inflamación sistémica sin sepsis 30 pacientes con LRA en estadio II o III* y sin inflamación sistémica 30 pacientes con inflamación sistémica y función renal normal 30 pacientes después de una cirugía mayor que no tienen infección, SIRS o LRA

* AKI será definido por los criterios KDIGO

Medida de resultado primaria Detección de características fenotípicas medibles y función de leucocitos que son específicos de pacientes con LRA.

Resultados secundarios:

1. Diferencias en la caracterización fenotípica y función de los neutrófilos entre pacientes con LRA estadio II y III.
2. Diferencias en la caracterización fenotípica y función de los neutrófilos entre pacientes con y sin LRA.
3. Diferencias en los perfiles de citocinas entre pacientes con LRA e inflamación sistémica y pacientes con LRA sin inflamación sistémica
4. Diferencias en los perfiles de citocinas entre pacientes con LRA e inflamación sistémica y pacientes con inflamación sistémica sin LRA
5. Correlación entre los niveles de microARN en pacientes con LRA y la recuperación renal
6. Correlación entre los niveles de microARN en pacientes con LRA y el resultado del paciente
7. Diferencias en los perfiles de citocinas entre pacientes con LRA sin inflamación sistémica y pacientes sin LRA y sin inflamación/infección sistémica.

Análisis estadístico:

Para el análisis de variables de laboratorio que describan el fenotipo inmunológico, se aplicarán métodos estadísticos estándar. 1) Cuando se cumpla el supuesto de distribución normal, los grupos se compararán mediante ANOVA y los contrastes correspondientes para las comparaciones grupo a grupo; 2) En ausencia de normalidad o para variables ordinales, se aplicará Kruskal Wallis para comparaciones multigrupo y Wilcoxon para análisis de dos grupos. Aplicaremos corrección de prueba múltiple a través del control Benjamini-Hochberg FDR.

Para el análisis de los datos de la matriz de miRNA, primero seguiremos las medidas de control de calidad del protocolo adecuadas para la plataforma elegida y, posteriormente, realizaremos un análisis estadístico utilizando los paquetes SAMr y LIMMA de Bioconductor, a través del software R. De igual forma, para el análisis de los datos de PCR se utilizará el paquete HTqPCR de bioconductor para el control de calidad. Dependiendo de la distribución de los datos finales, se aplicarán estadísticas no paramétricas o una prueba t moderada para las comparaciones estadísticas, con las correspondientes correcciones de pruebas múltiples como se indicó anteriormente.