Funkcja odpornościowa w ostrym uszkodzeniu nerek

Hipoteza:

Nadrzędna prozapalna odpowiedź immunologiczna leży u podstaw AKI u ludzi, co przyczynia się do dysfunkcji narządów innych niż nerki

Główne pytanie badawcze:

Czy AKI u ludzi jest związana głównie z prozapalną odpowiedzią immunologiczną?

Dodatkowe pytania badawcze:

1. Czy AKI wpływa na charakterystykę fenotypową i funkcję neutrofili?
2. Czy nasilenie AKI prowadzi do różnic w charakterystyce fenotypowej i funkcji neutrofili?
3. Jakie są różnice w profilach cytokin między pacjentami z AKI z i bez ogólnoustrojowego zapalenia?
4. Jakie są różnice w profilach cytokin między pacjentami z AKI z ogólnoustrojowym zapaleniem a pacjentami z ogólnoustrojowym zapaleniem bez AKI?
5. Czy istnieje korelacja między poziomem mikroRNA u pacjentów z AKI a stopniem AKI, regeneracją nerek i stanem zdrowia pacjentów?

Projekt badania:

Obserwacyjne badanie nieinterwencyjne

Badana populacja:

30 pacjentów z AKI w stadium II lub III* i ogólnoustrojowym zapaleniem bez posocznicy 30 pacjentów z AKI w stadium II lub III* bez ogólnoustrojowego zapalenia 30 pacjentów z ogólnoustrojowym zapaleniem i prawidłową czynnością nerek 30 pacjentów po dużych operacjach, u których nie występuje infekcja, SIRS lub AKI

* AKI zostanie określone przez kryteria KDIGO

Pierwszorzędowy wynik Wykrywanie mierzalnych cech fenotypowych i funkcji leukocytów specyficznych dla pacjentów z AKI.

Wyniki drugorzędne:

1. Różnice w charakterystyce fenotypowej i funkcji neutrofili między pacjentami z AKI w stadium II i III.
2. Różnice w charakterystyce fenotypowej i funkcji neutrofili między pacjentami z i bez AKI.
3. Różnice w profilach cytokin między pacjentami z AKI i zapaleniem ogólnoustrojowym a pacjentami z AKI bez zapalenia ogólnoustrojowego
4. Różnice w profilach cytokin między pacjentami z AKI z ogólnoustrojowym zapaleniem a pacjentami z ogólnoustrojowym zapaleniem bez AKI
5. Korelacja między poziomami mikroRNA u pacjentów z AKI a regeneracją nerek
6. Korelacja między poziomami mikroRNA u pacjentów z AKI a wynikami pacjentów
7. Różnice w profilach cytokin między pacjentami z AKI bez ogólnoustrojowego zapalenia a pacjentami bez AKI i bez ogólnoustrojowego zapalenia/zakażenia.

Analiza statystyczna:

Do analizy zmiennych laboratoryjnych opisujących fenotyp immunologiczny zastosowane zostaną standardowe metody statystyczne. 1) Gdy spełnione jest założenie o rozkładzie normalnym, grupy zostaną porównane przy użyciu analizy ANOVA i odpowiednich kontrastów dla porównań grup po grupach; 2) W przypadku braku normalności lub dla zmiennych porządkowych, Kruskal Wallis zostanie zastosowany do porównań wielogrupowych, a Wilcoxon do analizy dwugrupowej. Zastosujemy wielokrotną korektę testową za pośrednictwem kontroli Benjamini-Hochberg FDR.

W celu analizy danych macierzy miRNA najpierw zastosujemy środki kontroli jakości protokołu odpowiednie dla wybranej platformy, a następnie przeprowadzimy analizę statystyczną przy użyciu pakietów SAMr i LIMMA firmy Bioconductor za pośrednictwem oprogramowania R. Podobnie do analizy danych PCR do kontroli jakości wykorzystany zostanie pakiet HTqPCR firmy bioconductor. W zależności od rozkładu danych końcowych, do porównań statystycznych zostaną zastosowane statystyki nieparametryczne lub moderowany test t, z odpowiednimi wielokrotnymi poprawkami testowymi, jak powyżej.