Função Imunológica na Lesão Renal Aguda

Hipótese:

Uma resposta imune pró-inflamatória predominante está subjacente à IRA em humanos, o que contribui para a disfunção de órgãos não renais

Questão principal de pesquisa:

A LRA em humanos está associada a uma resposta imune predominantemente pró-inflamatória?

Questões secundárias de pesquisa:

1. A LRA afeta a caracterização fenotípica e a função dos neutrófilos?
2. A gravidade da LRA leva a diferenças na caracterização fenotípica e na função dos neutrófilos?
3. Quais são as diferenças nos perfis de citocinas entre pacientes com LRA com e sem inflamação sistêmica?
4. Quais são as diferenças nos perfis de citocinas entre pacientes com LRA com inflamação sistêmica e pacientes com inflamação sistêmica sem LRA?
5. Existe uma correlação entre os níveis de microRNA em pacientes com LRA e grau de LRA, recuperação renal e evolução do paciente?

Design de estudo:

Estudo observacional não intervencional

População do estudo:

30 pacientes com IRA estágio II ou III * e inflamação sistêmica sem sepse 30 pacientes com IRA estágio II ou III * e sem inflamação sistêmica 30 pacientes com inflamação sistêmica e função renal normal 30 pacientes após cirurgia de grande porte que não apresentam infecção, SIRS ou AKI

* AKI será definido pelos critérios KDIGO

Desfecho primário Detecção de características fenotípicas mensuráveis ​​e função de leucócitos específicos de pacientes com LRA.

Resultados secundários:

1. Diferenças na caracterização fenotípica e na função dos neutrófilos entre pacientes com LRA estágio II e III.
2. Diferenças na caracterização fenotípica e na função dos neutrófilos entre pacientes com e sem LRA.
3. Diferenças nos perfis de citocinas entre pacientes com LRA e inflamação sistêmica e pacientes com LRA sem inflamação sistêmica
4. Diferenças nos perfis de citocinas entre pacientes com LRA com inflamação sistêmica e pacientes com inflamação sistêmica sem LRA
5. Correlação entre níveis de microRNA em pacientes com LRA e recuperação renal
6. Correlação entre os níveis de microRNA em pacientes com LRA e evolução do paciente
7. Diferenças nos perfis de citocinas entre pacientes com LRA sem inflamação sistêmica e pacientes sem LRA e sem inflamação/infecção sistêmica.

Análise estatística:

Para a análise das variáveis ​​laboratoriais que descrevem o fenótipo imunológico, serão aplicados métodos estatísticos padronizados. 1) Quando a suposição de distribuição normal for atendida, os grupos serão comparados usando ANOVA e os contrastes correspondentes para comparações grupo a grupo; 2) Na ausência de normalidade ou para variáveis ​​ordinais, Kruskal Wallis será aplicado para comparações multigrupos e Wilcoxon para análise de dois grupos. Aplicaremos correção de teste múltiplo via controle Benjamini-Hochberg FDR.

Para a análise dos dados do miRNA array, primeiro seguiremos as medidas de controle de qualidade do protocolo apropriadas para a plataforma escolhida e, posteriormente, faremos a análise estatística usando os pacotes SAMr e LIMMA da Bioconductor, via software R. Da mesma forma, para a análise dos dados de PCR, será utilizado o pacote HTqPCR da biocondutora para controle de qualidade. Dependendo da distribuição dos dados finais, serão aplicadas estatísticas não paramétricas ou um teste t moderado para comparações estatísticas, com as correções de testes múltiplos correspondentes conforme acima.