Immuunitoiminta akuutissa munuaisvauriossa

Hypoteesi:

Ylivoimainen tulehdusta edistävä immuunivaste on ihmisten AKI:n taustalla, mikä edistää muiden kuin munuaiselinten toimintahäiriöitä

Tutkimuksen pääkysymys:

Liittyykö AKI ihmisillä pääasiassa tulehdusta edistävään immuunivasteeseen?

Toissijaiset tutkimuskysymykset:

1. Vaikuttaako AKI neutrofiilien fenotyyppiseen karakterisointiin ja toimintaan?
2. Johtaako AKI:n vakavuus eroihin neutrofiilien fenotyyppisessä karakterisoinnissa ja toiminnassa?
3. Mitkä ovat erot sytokiiniprofiileissa AKI-potilaiden välillä, joilla on systeeminen tulehdus ja ilman?
4. Mitkä ovat erot sytokiiniprofiileissa AKI-potilaiden välillä, joilla on systeeminen tulehdus, ja potilailla, joilla on systeeminen tulehdus ilman AKI:ta?
5. Onko AKI-potilaiden mikroRNA-tasojen ja AKI-asteen, munuaisten paranemisen ja potilaan lopputuloksen välillä korrelaatiota?

Opintojen suunnittelu:

Havainnollinen ei-interventiotutkimus

Tutkimuspopulaatio:

30 potilasta, joilla on AKI vaihe II tai III * ja systeeminen tulehdus ilman sepsis 30 potilasta AKI vaiheen II tai III * ja ei systeemistä tulehdusta 30 potilasta, joilla on systeeminen tulehdus ja normaali munuaisten toiminta 30 potilasta suuren leikkauksen jälkeen, joilla ei ole infektiota, SIRS tai AKI

* AKI määritellään KDIGO-kriteerien mukaan

Ensisijainen tulos Leukosyyttien mitattavissa olevien fenotyyppisten ominaisuuksien ja toiminnan havaitseminen, jotka ovat spesifisiä AKI-potilaille.

Toissijaiset tulokset:

1. Erot neutrofiilien fenotyyppisessä karakterisoinnissa ja toiminnassa AKI-vaiheen II ja III potilaiden välillä.
2. Erot fenotyyppisessä karakterisoinnissa ja neutrofiilien toiminnassa potilaiden välillä, joilla on AKI ja ilman.
3. Erot sytokiiniprofiileissa potilailla, joilla on AKI ja systeeminen tulehdus, ja potilailla, joilla on AKI ilman systeemistä tulehdusta
4. Erot sytokiiniprofiileissa AKI-potilaiden välillä, joilla on systeeminen tulehdus, ja potilailla, joilla on systeeminen tulehdus ilman AKI:ta
5. Korrelaatio AKI-potilaiden mikroRNA-tasojen ja munuaisten palautumisen välillä
6. Korrelaatio AKI-potilaiden mikroRNA-tasojen ja potilaan lopputuloksen välillä
7. Erot sytokiiniprofiileissa AKI-potilaiden välillä, joilla ei ole systeemistä tulehdusta, ja potilailla, joilla ei ole AKI:tä ja joilla ei ole systeemistä tulehdusta/infektiota.

Tilastollinen analyysi:

Immunologista fenotyyppiä kuvaavien laboratoriomuuttujien analysointiin sovelletaan standardeja tilastollisia menetelmiä. 1) Kun normaalijakauman oletus täyttyy, ryhmiä verrataan käyttämällä ANOVA:ta ja vastaavia kontrasteja ryhmäkohtaisissa vertailuissa; 2) Normaalin tai järjestysmuuttujien puuttuessa usean ryhmän vertailuissa käytetään Kruskal Wallista ja kahden ryhmän analyysissä Wilcoxonia. Käytämme useita testauskorjauksia Benjamini-Hochbergin FDR-ohjauksen kautta.

MiRNA-joukkotietojen analysoinnissa noudatamme ensin valitulle alustalle sopivia protokollan laadunvalvontatoimenpiteitä ja sen jälkeen teemme tilastollisen analyysin Bioconductorin SAMr- ja LIMMA-pakettien avulla R-ohjelmiston kautta. Samoin PCR-tietojen analysointiin käytetään bioconductorista HTqPCR-pakettia laadunvalvontaan. Lopullisten tietojen jakautumisesta riippuen tilastollisiin vertailuihin sovelletaan joko ei-parametrista tilastoa tai moderoitua t-testiä vastaavilla moninkertaisilla testauskorjauksilla kuten edellä.