Identificatie en karakterisering van eierstokkanker en endometriumkankerspecifieke biomarkers in vaginale vloeistoffen

In eerste instantie zullen twintig vaginale vloeistofmonsters worden verzameld bij patiënten met eierstokkanker die gediagnosticeerd zijn met epitheliaal ovariumcarcinoom in een vergevorderd stadium van de diagnose.

De monsters zullen worden gebruikt om specifieke biomarkers te identificeren, zoals hierboven beschreven. De niveaus van biomarkers zullen worden gekalibreerd in vergelijking met hun vaginale vloeistoffen verkregen van gezonde vrijwilligers. Bovendien zal vijf milliliter veneus bloed worden verzameld van dezelfde patiënten om biomarkers vaginale vloeistofniveaus te vergelijken met serumniveaus. Alle patiënten zullen een toestemmingsformulier ondertekenen dat goedkeurt dat hun vaginale vloeistofmonsters zullen worden gebruikt voor onderzoek volgens de goedkeuring van Helsinki.

In de tweede fase van het onderzoek zullen nog eens twintig vaginale vloeistofmonsters worden verzameld bij patiënten bij wie de diagnose in verschillende stadia is gesteld (vijf monsters uit elk van de hoofdfasen 1-4). Het monster zal worden gebruikt om biomarkerniveaus in verschillende diagnosestadia te kalibreren en zal worden vergeleken met serumniveaus van veneuze bloedmonsters die ook van dezelfde patiënten zullen worden verzameld.

Alle patiënten ondertekenen een toestemmingsformulier na uitleg over onderzoeksdoelen. De patiënt zal op de hoogte worden gebracht dat deelname aan dit onderzoek geen gevolgen heeft voor het medische behandelplan.

Merk op dat er in alle onderzoeksfasen geen monsters naar de patiënten worden teruggestuurd, alle identificatie- en karakteriseringsprocedures zullen alleen in vitro worden uitgevoerd voor onderzoekseigenschappen.

Methodologie

• Het verzamelen van vaginale vloeistofmonsters van patiënten met eierstokkanker. Vaginaal vocht (minstens 400 µl, de onderzoekers wensen 1000 µl) zal tijdens de operatie of tijdens routinematig lichamelijk onderzoek worden verzameld met behulp van een specifieke applicator/wattenstaafje/spuit. Monsters worden voor analyse naar het laboratorium van GinaLife Diagnostics verzonden. Bovendien zal op de dag van de vaginale vochtafname van elke vrijwilliger 5 ml perifeer bloed worden afgenomen.
• Analyse van specifieke biomarkers in monsters. Vaginale vloeistoffen zullen worden geanalyseerd met behulp van commerciële enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) kits om de aanwezigheid en de concentraties van verschillende eiwitten te bepalen. Daarnaast zal western blot-analyse worden gebruikt om de resultaten van de ELISA-assay te bevestigen. Specifiek nucleïnezuur zal worden bepaald met behulp van gangbare moleculaire methoden zoals Reverse Transcriptie Polymerase Kettingreactie (RT-PCR) etc.
• Gegevens analyse