Identifikace a charakterizace specifických biomarkerů rakoviny vaječníků a rakoviny endometria ve vaginálních tekutinách

Zpočátku bude odebráno dvacet vzorků vaginální tekutiny od pacientek s rakovinou vaječníků s diagnózou epiteliálního karcinomu vaječníků v pokročilém stádiu diagnózy.

Vzorky budou použity k identifikaci specifických biomarkerů, jak je popsáno výše. Hladiny biomarkerů budou kalibrovány v porovnání s jejich vaginálními tekutinami získanými od zdravých dobrovolníků. Kromě toho bude od stejných pacientek odebráno pět mililitrů žilní krve, aby bylo možné porovnat hladiny biomarkerů vaginální tekutiny a hladiny séra. Všechny pacientky podepíší formulář souhlasu s tím, že jejich vzorky vaginální tekutiny budou použity pro výzkum v souladu s Helsinským schválením.

Ve druhé fázi výzkumu bude odebráno dalších dvacet vzorků vaginálních tekutin od pacientek diagnostikovaných v různých stádiích (pět vzorků z každého z hlavních stádií 1-4). Vzorek bude použit ke kalibraci hladin biomarkerů v různých stadiích diagnózy a bude porovnán se sérovými hladinami ze vzorků žilní krve, které budou rovněž odebrány stejným pacientům.

Všichni pacienti podepíší formulář souhlasu po vysvětlení cílů výzkumu. Pacient bude upozorněn, že účast na tomto výzkumu nebude mít žádný dopad na léčebný plán.

Upozorňujeme, že ve všech fázích výzkumu nebude vracení vzorků pacientům, veškeré identifikační a charakterizační postupy budou prováděny in vitro pouze pro výzkumné vlastnosti.

Metodologie

• Odběr vzorků vaginálních tekutin od pacientek s rakovinou vaječníků. Vaginální tekutiny (alespoň 400 µl, zkoušející chtějí mít 1000 µl) budou odebírány během chirurgického zákroku nebo během rutinního fyzikálního vyšetření pomocí specifického aplikátoru/vatového tamponu/stříkačky. Vzorky budou odeslány do laboratoře GinaLife Diagnostics k analýze. Kromě toho bude v den odběru vaginálních tekutin každé dobrovolnici odebráno 5 ml vzorků periferní krve.
• Analýza specifických biomarkerů ve vzorcích. Vaginální tekutiny budou analyzovány pomocí komerčních souprav ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) ke stanovení přítomnosti a koncentrací různých proteinů. Kromě toho bude k potvrzení výsledků testu ELISA použita analýza Western blot. Specifická nukleová kyselina bude stanovena pomocí běžných molekulárních metod, jako je reverzní transkripční polymerázová řetězová reakce (RT-PCR) atd.
• Analýza dat