Identificação e Caracterização de Biomarcadores Específicos de Câncer de Ovário e de Câncer de Endométrio em Fluidos Vaginais

Inicialmente, serão coletadas vinte amostras de fluido vaginal de pacientes com câncer de ovário com diagnóstico de carcinoma epitelial de ovário em estágio avançado de diagnóstico.

As amostras serão usadas para identificar biomarcadores específicos conforme descrito acima. Os níveis dos biomarcadores serão calibrados em comparação com seus fluidos vaginais obtidos de voluntárias saudáveis. Além disso, cinco mililitros de sangue venoso serão coletados dos mesmos pacientes para comparar os níveis de fluidos vaginais de biomarcadores versus níveis séricos. Todos os pacientes assinarão um formulário de consentimento que aprova que suas amostras de fluido vaginal sejam utilizadas para pesquisa de acordo com a aprovação de Helsinki.

Na segunda fase da pesquisa, vinte amostras adicionais de fluidos vaginais serão coletadas de pacientes diagnosticadas em diferentes estágios (cinco amostras de cada um dos principais estágios 1-4). A amostra será utilizada para calibrar os níveis de biomarcadores em várias etapas do diagnóstico e será comparada com os níveis séricos de amostras de sangue venoso que também serão coletadas dos mesmos pacientes.

Todos os pacientes assinarão um termo de consentimento após explicação sobre os objetivos da pesquisa. O paciente será notificado de que a participação nesta pesquisa não terá nenhuma implicação no plano de tratamento médico.

Ressalta-se que em todas as fases da pesquisa não haverá devolução de amostras aos pacientes, todos os procedimentos de identificação e caracterização serão realizados in vitro apenas para fins de pesquisa.

Metodologia

• Coleta de amostras de fluidos vaginais de pacientes com câncer de ovário. Os fluidos vaginais (pelo menos 400µl, os investigadores desejam ter 1000 µl) serão coletados durante a cirurgia ou durante o exame físico de rotina usando aplicador/cotonete/seringa específicos. As amostras serão enviadas ao laboratório GinaLife Diagnostics para análise. Além disso, no dia da coleta de fluidos vaginais serão coletados 5 ml de amostras de sangue periférico de cada voluntária.
• Analisar biomarcadores específicos em amostras. Os fluidos vaginais serão analisados ​​usando kits comerciais de imunoabsorção enzimática (ELISA) para determinar a presença e as concentrações de várias proteínas. Além disso, a análise de western blot será usada para confirmar os resultados do ensaio ELISA. O ácido nucleico específico será determinado usando métodos moleculares comuns, como reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa (RT-PCR), etc.
• Análise de dados