Identificazione e caratterizzazione di biomarcatori specifici del cancro ovarico e del cancro endometriale nei fluidi vaginali

Inizialmente, verranno raccolti venti campioni di fluido vaginale da pazienti con carcinoma ovarico con diagnosi di carcinoma ovarico epiteliale in fase di diagnosi avanzata.

I campioni verranno utilizzati per identificare biomarcatori specifici come descritto sopra. I livelli dei biomarcatori saranno calibrati rispetto ai loro fluidi vaginali ottenuti da volontari sani. Inoltre, verranno raccolti cinque millilitri di sangue venoso dagli stessi pazienti per confrontare i livelli di fluidi vaginali dei biomarcatori rispetto ai livelli sierici. Tutti i pazienti firmeranno un modulo di consenso che approva che i loro campioni di fluido vaginale saranno utilizzati per la ricerca secondo l'approvazione di Helsinki.

Nella seconda fase della ricerca, verranno raccolti ulteriori venti campioni di fluidi vaginali da pazienti diagnosticati in diversi stadi (cinque campioni da ciascuno degli stadi principali 1-4). Il campione sarà utilizzato per calibrare i livelli di biomarcatori nelle varie fasi diagnostiche e sarà confrontato con i livelli sierici di campioni di sangue venoso che saranno anche raccolti dagli stessi pazienti.

Tutti i pazienti firmeranno un modulo di consenso dopo la spiegazione sugli obiettivi della ricerca. Il paziente verrà informato che la partecipazione a questa ricerca non avrà alcuna implicazione sul piano di trattamento medico.

Si noti che in tutte le fasi della ricerca non ci sarà restituzione di campioni ai pazienti, tutte le procedure di identificazione e caratterizzazione saranno eseguite in vitro solo per le proprietà di ricerca.

Metodologia

• Raccolta di campioni di fluidi vaginali da pazienti con carcinoma ovarico. I fluidi vaginali (almeno 400 µl, gli investigatori desiderano avere 1000 µl) verranno raccolti durante l'intervento chirurgico o durante l'esame fisico di routine utilizzando uno specifico applicatore/tampone di cotone/siringa. I campioni verranno spediti al laboratorio GinaLife Diagnostics per l'analisi. Inoltre, il giorno della raccolta dei fluidi vaginali verranno prelevati da ogni volontaria 5 ml di campioni di sangue periferico.
• Analisi di biomarcatori specifici nei campioni. I fluidi vaginali saranno analizzati utilizzando kit commerciali ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) per determinare la presenza e le concentrazioni di varie proteine. Inoltre, verrà utilizzata l'analisi western blot per confermare i risultati del test ELISA. L'acido nucleico specifico sarà determinato utilizzando metodi molecolari comuni come la reazione a catena della polimerasi a trascrizione inversa (RT-PCR) ecc.
• Analisi dei dati