Genpolymorfisme geassocieerd met macroangiopathie bij patiënten met diabetes type 2
Polymorfismeanalyse van HLA-DRB1*04-allelen bij patiënten met type 2 diabetische macroangiopathie in Noordoost-Chinees
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Eerdere onderzoeken naar de moleculaire etiologie van diabetes mellitus in China en in het buitenland hebben zich voornamelijk gericht op de relatie tussen HLA en type 1 diabetes mellitus (DM) (1-3). Vanwege de complexiteit van type 2 DM-erfelijkheid, hebben weinig onderzoekers de correlatie tussen type 2 DM en HLA bestudeerd. In de afgelopen jaren is gesuggereerd dat de ontwikkeling van coronaire hartziekte (CHD) bij diabetici niet alleen een complicatie is van diabetische macroangiopathie. CHD en diabetische macroangiopathie delen enkele genetische associaties. Eerdere studies hebben aangetoond dat bepaalde HLA*DRB1*04-subtypen geassocieerd zijn met een verhoogd risico op hart- en vaatziekten.
Experimentele methoden: Voor genomische DNA-extractie werden 3-5 ml veneuze bloedmonsters verzameld van alle patiënten. Met EDTA werd coagulatie voorkomen.
De procedure voor PCR-amplificatie was als volgt: denatureren gedurende 100 seconden bij 96°C, hybridiseren gedurende 60 seconden bij 63°C, 1 cyclus; denaturering gedurende 10 seconden bij 96°C, annealing gedurende 60 seconden bij 63°C, 9 cycli; denaturering gedurende 10 s bij 96°C, annealing gedurende 30 s bij 59°C; verlengen gedurende 30 s bij 72°C, 20 cycli; handhaven op 4°C. Analyse van PCR-producten gekleurd door ethidiumbromide op 2,5% agarosegelelektroforese. Banden werden waargenomen met behulp van een ultraviolet licht en een biologisch beeldvormingssysteem.
Statistische methode: De mate van overeenstemming met het Hardy-Weinberg-evenwicht werd bepaald met behulp van de χ2-test. Een t-test werd gebruikt voor vergelijking van CRP-niveaus (M ± s) en een χ2-test werd uitgevoerd om allelische frequenties te vergelijken. Het relatieve risicopercentage (RR) werd berekend als (Aantal patiënten met het gen × Aantal mensen in controlegroep zonder het gen) gedeeld door (Aantal mensen in controlegroep met het gen × Aantal patiënten zonder het gen). PC werd berekend volgens de methode van Fisher als χ2 > 3,84.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- klinische CHD (zoals angina pectoris, myocardinfarct) gediagnosticeerd door dynamisch elektrocardiogram en ultrasoon cardiogram;
- coronaire atherosclerose bevestigd door coronair angiografisch onderzoek;
- herseninfarct gediagnosticeerd door cerebrale CT;
- dikte van de intimale media van de halsslagader (IMT) ≥ 1,2 mm gemeten met Doppler-ultrasoon onderzoek;
- uitgebreide onregelmatige stenose van een slagader van de onderste extremiteit (diameter < 3 mm) of segmentale obstructie.
Uitsluitingscriteria:
- leeftijd < 20 jaar
- leeftijd > 60 jaar
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Groep A
150 gezonde bloeddonoren zonder een familiegeschiedenis van diabetes mellitus
|
150 gezonde bloeddonoren zonder een familiegeschiedenis van diabetes mellitus namen deel aan het onderzoek.
Andere namen:
|
|
Groep B
200 gevallen van type 2 DM zonder complicaties (groep B), er waren 62 mannen en 108 vrouwen, in de leeftijd van 29-53, met een gemiddelde leeftijd van 42 ± 9 jaar
|
200 gevallen van type 2 DM zonder complicaties namen deel aan het onderzoek.
Andere namen:
|
|
Groep C
120 gevallen van type 2 DM met macroangiopathiecomplicatie (groep C), er waren 70 mannen en 50 vrouwen, in de leeftijd van 40-53, met een gemiddelde leeftijd van 47 ± 6 jaar.
Onder de proefpersonen van groep C hadden 65 personen CHD; 55 patiënten hadden cerebrovasculaire ziekte (HVZ); en 30 proefpersonen hadden een combinatie van perifere vasculaire aandoeningen (PVD) en CHD
|
120 gevallen van type 2 DM met macroangiopathie-complicatie namen deel aan de studie.
Onder de proefpersonen van groep C hadden 65 personen CHD; 55 patiënten hadden cerebrovasculaire ziekte (HVZ); en 30 proefpersonen hadden een combinatie van perifere vasculaire aandoeningen (PVD) en CHZ.
Andere namen:
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Test van allelische frequenties
Tijdsspanne: Bij werving
|
Een in de handel verkrijgbare kit werd gebruikt voor extractie van genomisch DNA uit de volbloedmonsters (PEL-FREEZ Inc., VS).
Tweeëndertig paar sequentiespecifieke primers (SSP) voor HLA-DRB1*04-allelen werden gekocht bij One Lambda, Inc. (VS) en het Taq-enzym werd gekocht bij Promega Corp. (VS).
De PCR-SSP-techniek werd gebruikt om de HLA-DRB1*04-allelen voor elke proefpersoon te bepalen.
Genen werden geamplificeerd met behulp van de 5700 PCR thermal cycler vervaardigd door Applied Biosystems Inc. (VS).
|
Bij werving
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Evaluatie van serum CRP (C-reactief proteïne) niveaus
Tijdsspanne: Bij werving
|
Een in de handel verkrijgbare ELISA-assaykit met 96 putjes (introassay CV 1,7%~3,9%,
interassay CV 2,8%~5,1%)
werd gebruikt om hs-CRP in serum te kwantificeren (DSL Inc., VS).
Alle monsters werden in tweevoud beoordeeld.
De absorptie (OD) werd bepaald met behulp van een BIO-RAD2550 microwell plate reader (VS).
|
Bij werving
|
Medewerkers en onderzoekers
Onderzoekers
- Hoofdonderzoeker: Nan Ma, Master, First Affiliated Hospital of Harbin Medical University
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Schatting)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Schatting)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- HarbinMU_WHW_001
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .