Полиморфизм генов, связанный с макроангиопатией у пациентов с диабетом 2 типа
Анализ полиморфизма аллелей HLA-DRB1*04 у пациентов с диабетической макроангиопатией 2 типа на северо-востоке Китая
Обзор исследования
Статус
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Предыдущие исследования молекулярной этиологии сахарного диабета в Китае и за рубежом в основном были сосредоточены на взаимосвязи между HLA и сахарным диабетом (СД) 1-го типа (1-3). Из-за сложности наследственности СД 2 типа мало кто исследовал корреляцию между СД 2 типа и HLA. В последние годы было высказано предположение, что развитие ишемической болезни сердца (ИБС) у больных сахарным диабетом является не просто осложнением диабетической макроангиопатии. ИБС и диабетическая макроангиопатия имеют некоторые общие генетические ассоциации. Предыдущие исследования показали, что определенные подтипы HLA*DRB1*04 связаны с повышенным риском сердечно-сосудистых заболеваний.
Экспериментальные методы. Для выделения геномной ДНК у всех пациентов брали образцы венозной крови объемом 3-5 мл. Коагуляцию предотвращали с помощью ЭДТА.
Методика ПЦР-амплификации следующая: денатурация 100 с при 96°С, отжиг 60 с при 63°С, 1 цикл; денатурация 10 с при 96°С, отжиг 60 с при 63°С, 9 циклов; денатурация 10 с при 96°С, отжиг 30 с при 59°С; вытяжка 30 с при 72°С, 20 циклов; поддержание на уровне 4°С. Анализ продуктов ПЦР, окрашенных бромистым этидием, с помощью электрофореза в 2,5% агарозном геле. Полосы наблюдали с использованием ультрафиолетового света и системы биологической визуализации.
Статистический метод. Степень соответствия равновесию Харди-Вайнберга определяли с помощью критерия χ2. Для сравнения уровней СРБ (M ± s) применяли t-критерий, а для сравнения частот аллелей проводили критерий χ2. Коэффициент относительного риска (ОР) рассчитывали как (Количество пациентов с геном × Количество людей в контрольной группе без гена), деленное на (Количество людей в контрольной группе с геном × Количество пациентов без гена). PC рассчитывали по методу Фишера, если χ2 > 3,84.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- клиническая ИБС (например, стенокардия, инфаркт миокарда), диагностируемая с помощью динамической электрокардиограммы и ультразвуковой кардиограммы;
- коронарный атеросклероз, подтвержденный коронароангиографическим исследованием;
- инфаркт головного мозга, диагностированный с помощью КТ головного мозга;
- толщина интимы-медиа общей сонной артерии (ТИМ) ≥1,2 мм, измеренная с помощью ультразвуковой допплерографии;
- обширный нерегулярный стеноз артерии нижней конечности (диаметр < 3 мм) или сегментарная закупорка.
Критерий исключения:
- возраст < 20 лет
- возраст > 60 лет
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Группа А
150 здоровых доноров крови без семейного анамнеза сахарного диабета
|
В исследование были включены 150 здоровых доноров крови без семейного анамнеза сахарного диабета.
Другие имена:
|
|
Группа Б
200 больных СД 2 типа без осложнений (группа Б), мужчин 62, женщин 108, возраст 29-53 года, средний возраст 42 ± 9 лет.
|
В исследование включено 200 больных СД 2 типа без осложнений.
Другие имена:
|
|
Группа С
120 больных СД 2 типа с осложнением макроангиопатии (группа С), 70 мужчин и 50 женщин, возраст 40-53 года, средний возраст 47 ± 6 лет.
Среди субъектов группы С 65 человек имели ИБС; 55 больных имели цереброваскулярные заболевания (ЦВЗ); и 30 человек имели сочетание заболеваний периферических сосудов (ЗПС) и ИБС.
|
В исследование включено 120 больных СД 2 типа с осложнением макроангиопатии.
Среди субъектов группы С 65 человек имели ИБС; 55 больных имели цереброваскулярные заболевания (ЦВЗ); и 30 человек имели сочетание заболеваний периферических сосудов (ЗПС) и ИБС.
Другие имена:
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Тест аллельных частот
Временное ограничение: При приеме на работу
|
Для выделения геномной ДНК из образцов цельной крови использовали коммерчески доступный набор (PEL-FREEZ Inc., США).
Тридцать две пары сиквенс-специфических праймеров (SSP) для аллелей HLA-DRB1*04 были приобретены у One Lambda, Inc. (США), а фермент Taq был приобретен у Promega Corp. (США).
Для определения аллелей HLA-DRB1*04 у каждого субъекта использовали метод PCR-SSP.
Гены амплифицировали с использованием термоциклера 5700 PCR производства Applied Biosystems Inc. (США).
|
При приеме на работу
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Оценка уровней СРБ (С-реактивного белка) в сыворотке
Временное ограничение: При приеме на работу
|
Имеющийся в продаже набор для анализа ELISA на 96-луночных планшетах (коэффициент вариабельности интроанализа 1,7%~3,9%,
межаналитический CV 2,8%~5,1%)
использовали для количественного определения вч-СРБ в сыворотке (DSL Inc., США).
Все образцы оценивали в двух повторностях.
Поглощение (ОП) определяли с помощью микропланшет-ридера BIO-RAD2550 (США).
|
При приеме на работу
|
Соавторы и исследователи
Следователи
- Главный следователь: Nan Ma, Master, First Affiliated Hospital of Harbin Medical University
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оценивать)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оценивать)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- HarbinMU_WHW_001
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .