Polimorfismo gênico associado à macroangiopatia em pacientes com diabetes tipo 2

Estudos anteriores que examinaram a etiologia molecular do diabetes mellitus na China e no exterior focaram principalmente na relação entre o HLA e o diabetes mellitus (DM) tipo 1 (1-3). Devido à complexidade da hereditariedade do DM tipo 2, poucos pesquisadores estudaram a correlação entre DM tipo 2 e HLA. Nos últimos anos, tem sido sugerido que o desenvolvimento de doença cardíaca coronária (CHD) em indivíduos diabéticos não é meramente uma complicação da macroangiopatia diabética. A DCC e a macroangiopatia diabética compartilham algumas associações genéticas. Estudos anteriores demonstraram que certos subtipos HLA*DRB1*04 estão associados a um risco aumentado de doença cardiovascular.

Métodos experimentais: Para extração de DNA genômico, amostras de sangue venoso de 3-5ml foram coletadas de todos os pacientes. A coagulação foi evitada com EDTA.

O procedimento para amplificação por PCR foi o seguinte: desnaturação por 100s a 96°C, anelamento por 60s a 63°C, 1 ciclo; desnaturação por 10s a 96°C, recozimento por 60s a 63°C, 9 ciclos; desnaturação por 10 s a 96°C, anelamento por 30 s a 59°C; estendendo-se por 30 s a 72°C, 20 ciclos; mantendo a 4°C. Análise de produtos de PCR corados por brometo de etídio em eletroforese em gel de agarose a 2,5%. As bandas foram observadas usando uma luz ultravioleta e um sistema de imagem biológica.

Método estatístico: O grau de concordância com o equilíbrio de Hardy-Weinberg foi determinado pelo teste do χ2. Um teste t foi empregado para comparação dos níveis de PCR (M ± s) e um teste χ2 foi realizado para comparar frequências alélicas. A taxa de risco relativo (RR) foi calculada como (Número de pacientes com o gene × Número de pessoas no grupo controle sem o gene) dividido por (Número de pessoas no grupo controle com o gene × Número de pacientes sem o gene). O PC foi calculado pelo método de Fisher se χ2 > 3,84.