Cytogenetische schade in buccale cellen veroorzaakt door tandpasta

De studie omvatte 40 deelnemers, studenten Tandheelkunde aan de School of Medicine, van de Universiteit van Split. Er waren in totaal 12 mannen en 28 vrouwen, tussen de 20 en 26 jaar oud (gemiddelde leeftijd 23,18 ± 1,48). De proefpersonen werden verdeeld in twee gelijke groepen, afhankelijk van de combinatie van de gebruikte tandpasta.

In de eerste groep waren Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, VK) en Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, VK) de merken tandpasta die werden gebruikt, terwijl in de tweede groep Plidenta 15 Seconds (Neva Ltd., Kroatië) en Plidenta Sensitive (Neva Ltd., Kroatië) ) (Tafel 1). De deelnemers hebben vier maanden tandpasta gebruikt. De eerste twee maanden gebruikten ze tandpasta zonder fluoride, daarna gebruikten ze de volgende twee maanden tandpasta met fluoride van dezelfde fabrikant en vergelijkbare samenstelling. De geteste soorten tandpasta werden twee keer per dag aangebracht, 's morgens en' s avonds, gedurende drie minuten in een hoeveelheid van 1 g (≈2 cm). Hedendaags gebruikten de deelnemers geen andere middelen voor mondhygiëne, zoals mondwater of plaatselijke fluoridering. Van elke deelnemer werd een gedetailleerde medische en tandheelkundige anamnese afgenomen. In een gestructureerde vragenlijst, toegesneden op dit onderzoek, gaven alle deelnemers antwoord op vragen over demografische factoren (leeftijd, geslacht), persoonlijke factoren (algemene gezondheid, gebruikte medicatie, blootstelling aan straling), levensstijl (roken, alcoholgebruik), eetgewoonten en orale hygiëne gewoonten. Personen die minstens een jaar lang drie of meer sigaretten per dag rookten, werden als rokers beschouwd. Die personen die drie of meer keer per week twee of meer alcoholeenheden consumeerden, werden niet in het onderzoek opgenomen, evenals patiënten met orale laesies, een voorgeschiedenis van maligniteiten en patiënten met verwijderbare en vaste protheses, orthodontische hulpmiddelen. Het criterium voor het selecteren van deelnemers was volledig gezond te zijn zonder systemische aandoeningen en ziekten.

Monstername Monsters van buccale epitheelcellen werden verzameld van elke deelnemer met behulp van de uitstrijktechniek onmiddellijk voorafgaand aan het gebruik van geteste tandpasta en 30, 60, 90 en 120 dagen na het begin van het onderzoek (T0 - controle voorafgaand aan het gebruik van geteste tandpasta , T1- 30 dagen na het begin van het gebruik van fluoridevrije tandpasta, T2 - 60 dagen na het begin van het gebruik van fluoridevrije tandpasta, T3 - 90 dagen na het begin van het onderzoek, gebruik van fluoridetandpasta gedurende 30 dagen , T4 - 120 dagen na het begin van het onderzoek, gebruik van fluoridetandpasta gedurende 60 dagen).

Een uur voorafgaand aan de bemonstering werd de deelnemers gevraagd zich te onthouden van roken en het consumeren van eten en drinken. Na driemaal spoelen van de mondholte met lauw water om geëxfolieerde cellen te verwijderen, werd een uitstrijkje genomen door het mondslijmvlies voorzichtig bilateraal te borstelen met een cytobrush (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Duitsland) en vervolgens werden de monsters genomen. aangebracht op gecodeerde laboratoriumglaasjes die zijn voorverwarmd op 37 °C.

Micronucleus-assay in buccale epitheelcellen De cellen die op microscopische objectglaasjes waren aangebracht, lieten ze aan de lucht drogen en werden vervolgens gefixeerd in methanol (80% v/v) bij 4°C gedurende 20 minuten. Kleuring werd uitgevoerd met 5% Giemsa-oplossing gedurende 10 minuten. Daarna werden de glaasjes gespoeld met aqua-destillaat en aan de lucht gedroogd.

De analyse werd uitgevoerd onder een lichtmicroscoop Olympus CX40 (Olympus, Tokyo, Japan) met een vergroting van 400x, en elke micronucleus en andere nucleaire anomalieën werden bovendien geverifieerd onder een vergroting van 1000x. Voor elke proefpersoon werden twee replicaatglaasjes gemaakt en voor elk bemonsteringstijdstip werden 1000 epitheelcellen per preparaat gescoord.

Statistische analyse Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van het SPSS-softwarepakket (IBM Corp., Armonk, NY, VS). Door beschrijvende statistische analyse werden de statistische basisparameters (gemiddelde, standaardfout en standaarddeviatie, en relatieve standaarddeviatie, mediaan en minimum- en maximumwaarden) bepaald. De verschillen in het aantal micronuclei en andere nucleaire anomalieën tussen verschillende bemonsteringstijden voor elke groep en tussen de groepen onderzochten werden getest door ANOVA en Tukey's HSD post hoc test met behulp van een algemene lineaire modelprocedure. Algemeen regressiemodel (GRM) van lineaire/niet-lineaire modelleringsmethode werd gebruikt voor de beoordeling van de invloed van de voorspellende variabelen (leeftijd, geslacht en beroep, gebruik van medicatie, blootstelling aan röntgenstralen, voedingsgewoonten en levensstijl) op afhankelijke variabelen (micronucleus, tweekernige cellen, gebroken eieren, kernknoppen, pyknosis, gecondenseerde chromatine, karyolyse en karyorrhexis). De resultaten van GRM worden uitgedrukt in de vorm van Pareto-diagrammen van t-waarden. Een significantieniveau werd vastgesteld op 0,05.