Zytogenetische Schäden in Bukkalzellen durch Zahnpasta

An der Studie nahmen 40 Teilnehmer teil, Studenten der Zahnmedizin an der Medizinischen Fakultät der Universität Split. Es waren insgesamt 12 Männer und 28 Frauen im Alter zwischen 20 und 26 (Durchschnittsalter 23,18 ± 1,48). Die Probanden wurden in Abhängigkeit von der Kombination der verwendeten Zahnpasta in zwei gleiche Gruppen eingeteilt.

In der ersten Gruppe wurden Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, UK) und Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, UK) als Zahnpastamarken verwendet, während in der zweiten Gruppe Plidenta 15 Seconds (Neva Ltd., Kroatien) und Plidenta Sensitive (Neva Ltd., Kroatien) verwendet wurden ) (Tabelle 1). Die Teilnehmer haben vier Monate lang Zahnpasta verwendet. In den ersten zwei Monaten verwendeten sie fluoridfreie Zahnpasta, danach für die nächsten zwei Monate fluoridhaltige Zahnpasta des gleichen Herstellers und ähnlicher Zusammensetzung. Die getesteten Zahnpastaarten wurden zweimal täglich, morgens und abends, drei Minuten lang in einer Menge von 1 g (≈ 2 cm) aufgetragen. Zeitgenössisch verwendeten die Teilnehmer keine anderen Mittel zur Mundhygiene wie Mundwasser oder topische Fluoridierung. Von jedem Teilnehmer wurde eine ausführliche ärztliche und zahnärztliche Anamnese erhoben. In einem auf diese Studie zugeschnittenen strukturierten Fragebogen gaben alle Teilnehmer Antworten auf Fragen zu demografischen Faktoren (Alter, Geschlecht), persönlichen Faktoren (allgemeiner Gesundheitszustand, eingenommenes Medikament, Strahlenbelastung), Lebensstil (Rauchen, Alkoholkonsum), Essgewohnheiten und oral Hygienegewohnheiten. Als Raucher galten Personen, die mindestens ein Jahr lang drei oder mehr Zigaretten am Tag rauchten. Diejenigen Personen, die drei- oder öfter pro Woche zwei oder mehr Alkoholeinheiten konsumierten, wurden nicht in die Studie aufgenommen, ebenso wie Patienten mit oralen Läsionen, bösartigen Erkrankungen in der Vorgeschichte und solche mit herausnehmbarem und festsitzendem Zahnersatz, kieferorthopädischen Apparaturen. Das Kriterium für die Auswahl der Teilnehmer war, vollkommen gesund zu sein und keine systemischen Störungen und Krankheiten zu haben.

Probenentnahme Proben von Wangenepithelzellen wurden von jedem Teilnehmer unter Verwendung der Tupfertechnik unmittelbar vor der Verwendung der getesteten Zahnpasta und 30, 60, 90 und 120 Tage nach Beginn der Untersuchung (T0 – Kontrolle vor der Verwendung der getesteten Zahnpasta) gesammelt , T1 – 30 Tage nach Beginn der Verwendung von fluoridfreier Zahnpasta, T2 – 60 Tage nach Beginn der Verwendung von fluoridfreier Zahnpasta, T3 – 90 Tage nach Beginn der Studie, Verwendung von fluoridhaltiger Zahnpasta für 30 Tage , T4 – 120 Tage nach Beginn der Studie, Verwendung von fluoridhaltiger Zahnpasta für 60 Tage).

Eine Stunde vor der Probenahme wurden die Teilnehmer gebeten, auf das Rauchen und den Verzehr von Speisen und Getränken zu verzichten. Nach dreimaligem Spülen der Mundhöhle mit lauwarmem Wasser, um abgeblätterte Zellen zu entfernen, wurde ein Abstrich durch sanftes Bürsten der Wangenschleimhaut beidseitig mit einer Cytobrush (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Deutschland) entnommen und dann die Proben entnommen aufgetragen auf codierten, auf 37 °C vorgewärmten Laborglasobjektträgern.

Mikronukleus-Assay in bukkalen Epithelzellen Die auf mikroskopische Objektträger aufgetragenen Zellen wurden an der Luft trocknen gelassen und dann in Methanol (80 % v/v) bei 4°C für 20 Minuten fixiert. Die Färbung wurde mit 5 % Giemsa-Lösung für 10 Minuten durchgeführt. Anschließend wurden die Objektträger mit Wasserdestillat gespült und luftgetrocknet.

Die Analyse wurde unter einem Lichtmikroskop Olympus CX40 (Olympus, Tokio, Japan) mit 400-facher Vergrößerung durchgeführt, und jeder Mikronukleus und andere Kernanomalien wurden zusätzlich unter 1000-facher Vergrößerung verifiziert. Für jede Versuchsperson wurden zwei Replikat-Objektträger hergestellt, und 1000 Epithelzellen pro Präparation wurden für jede Probenahmezeit bewertet.

Statistische Analyse Die statistische Analyse wurde unter Verwendung des SPSS-Softwarepakets (IBM Corp., Armonk, NY, USA) durchgeführt. Durch deskriptive statistische Analyse wurden die grundlegenden statistischen Parameter (Mittelwert, Standardfehler und Standardabweichung und relative Standardabweichung, Median und Minimal- und Maximalwerte) bestimmt. Die Unterschiede in der Anzahl von Mikronuklei und anderen nuklearen Anomalien zwischen unterschiedlichen Probenahmezeiten für jede Gruppe und zwischen den Gruppen von Untersuchten wurden durch ANOVA und den HSD-Post-Hoc-Test von Tukey unter Verwendung eines allgemeinen linearen Modellverfahrens getestet. Zur Bewertung des Einflusses der Prädiktorvariablen (Alter, Geschlecht und Beruf, Medikamenteneinnahme, Röntgenexposition, Ernährungsgewohnheiten und Lebensstil) auf abhängige Variablen wurde das Allgemeine Regressionsmodell (GRM) aus der linearen/nichtlinearen Modellierungsmethode verwendet (Mikronukleus, zweikernige Zellen, zerbrochene Eier, Kernknospen, Pyknose, kondensiertes Chromatin, Karyolyse und Karyorrhexis). Die Ergebnisse von GRM werden in Form von Pareto-Diagrammen von t-Werten ausgedrückt. Als Signifikanzniveau wurde 0,05 festgelegt.