Cytogenetické poškození bukálních buněk způsobené zubní pastou

Studie zahrnovala 40 účastníků, studentů zubního lékařství na lékařské fakultě Univerzity ve Splitu. Jednalo se celkem o 12 mužů a 28 žen ve věku od 20 do 26 let (průměrný věk 23,18 ± 1,48). Subjekty byly rozděleny do dvou stejných skupin v závislosti na kombinaci použité zubní pasty.

V první skupině byly použity značky zubní pasty Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, Velká Británie) a Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, Velká Británie), zatímco ve druhé skupině byly použity Plidenta 15 Seconds (Neva Ltd., Chorvatsko) a Plidenta Sensitive (Neva Ltd., Chorvatsko ) (Stůl 1). Účastníci používali zubní pastu čtyři měsíce. První dva měsíce používali nefluoridovou zubní pastu, poté další dva měsíce používali zubní pastu s obsahem fluoru stejného výrobce a podobného složení. Testované druhy zubních past byly aplikovány dvakrát denně, ráno a večer, po dobu tří minut v množství 1 g (≈2 cm). V současné době účastníci nepoužívali jiné prostředky pro ústní hygienu, jako je ústní voda nebo místní fluoridace. Každému účastníkovi byla odebrána podrobná lékařská a zubní anamnéza. Ve strukturovaném dotazníku, přizpůsobeném této studii, všichni účastníci poskytli odpovědi na otázky související s demografickými faktory (věk, pohlaví), osobními faktory (celkový zdravotní stav, užívané léky, radiační expozice), životním stylem (kouření, konzumace alkoholu), stravovacími návyky a orálními hygienické návyky. Za kuřáky byli považováni jedinci, kteří kouřili tři a více cigaret denně po dobu alespoň jednoho roku. Do studie nebyli zahrnuti jedinci, kteří konzumovali dvě nebo více jednotek alkoholu třikrát nebo vícekrát týdně, stejně jako pacienti s orálními lézemi, anamnézou malignity a pacienti se snímatelnou a fixní protézou a ortodontickými aparáty. Kritériem pro výběr účastníků bylo být zcela zdraví bez systémových poruch a onemocnění.

Odběr vzorků Vzorky bukálních epiteliálních buněk byly od každého účastníka odebrány technikou výtěru bezprostředně před použitím testované zubní pasty a 30, 60, 90 a 120 dnů po začátku výzkumu (T0 - kontrola před použitím testované zubní pasty , T1- 30 dnů po začátku používání nefluoridové zubní pasty, T2 - 60 dnů po začátku používání nefluoridové zubní pasty, T3 - 90 dnů po začátku studie, používání fluoridové zubní pasty po dobu 30 dnů , T4 - 120 dní po začátku studie s použitím fluoridové zubní pasty po dobu 60 dní).

Hodinu před odběrem vzorků byli účastníci požádáni, aby se zdrželi kouření a konzumace jakéhokoli jídla a nápojů. Po trojnásobném vypláchnutí ústní dutiny vlažnou vodou za účelem odstranění exfoliovaných buněk byl odebrán tampon jemným oboustranným kartáčováním bukální sliznice cytokartáčkem (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Německo) a poté byly vzorky odebrány. aplikován na kódovaná laboratorní skla předehřátá na 37 °C.

Mikronukleový test v bukálních epiteliálních buňkách Buňky nanesené na mikroskopická sklíčka byly ponechány uschnout na vzduchu a poté byly fixovány v methanolu (80 % obj./obj.) při 4 °C po dobu 20 minut. Barvení bylo prováděno 5% roztokem Giemsa po dobu 10 minut. Poté byla sklíčka opláchnuta vodným destilátem a vysušena na vzduchu.

Analýza byla provedena pod světelným mikroskopem Olympus CX40 (Olympus, Tokio, Japonsko) se 400násobným zvětšením a každé mikronukleus a další jaderné anomálie byly navíc ověřeny při 1000násobném zvětšení. Pro každý subjekt byla připravena dvě replikovaná sklíčka a pro každý čas odběru vzorků bylo hodnoceno 1000 epitelových buněk na preparát.

Statistická analýza Statistická analýza byla provedena pomocí softwarového balíku SPSS (IBM Corp., Armonk, NY, USA). Pomocí deskriptivní statistické analýzy byly stanoveny základní statistické parametry (průměr, směrodatná chyba a směrodatná odchylka a relativní směrodatná odchylka, medián a minimální a maximální hodnoty). Rozdíly v počtu mikrojader a dalších jaderných anomálií mezi různými dobami odběru vzorků pro každou skupinu a mezi skupinami vyšetřovaných byly testovány pomocí ANOVA a Tukeyho post hoc testu HSD za použití obecného lineárního modelového postupu. Obecný regresní model (GRM) z metody lineárního/nelineárního modelování byl použit k posouzení vlivu prediktorových proměnných (věk, pohlaví a povolání, užívání léků, expozice rentgenovému záření, stravovací návyky a životní styl) na závislé proměnné. (mikronukleus, dvoujaderné buňky, rozbitá vajíčka, jaderné pupeny, pyknóza, kondenzovaný chromatin, karyolýza a karyorrhexe). Výsledky GRM jsou vyjádřeny ve formě Paretových diagramů hodnot t. Hladina významnosti byla stanovena na 0,05.