Cytogenetisk skade i bukkale celler forårsaget af tandpasta

Undersøgelsen omfattede 40 deltagere, studerende i tandmedicin ved School of Medicine, fra University of Split. Der var i alt 12 mænd og 28 kvinder i alderen mellem 20 og 26 år (gennemsnitsalder 23,18 ± 1,48). Forsøgspersonerne blev opdelt i to lige store grupper afhængigt af kombinationen af ​​den anvendte tandpasta.

I den første gruppe var Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, UK) og Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, UK) de anvendte mærker af tandpasta, mens i den anden Plidenta 15 Seconds (Neva Ltd., Kroatien) og Plidenta Sensitive (Neva Ltd., Kroatien) ) (Tabel 1). Deltagerne har brugt tandpasta i fire måneder. De første to måneder brugte de fluorfri tandpasta, hvorefter de i de næste to måneder brugte tandpasta indeholdende fluor af samme producent og lignende sammensætning. De testede former for tandpasta blev påført to gange om dagen, morgen og aften, i tre minutter i en mængde på 1 g (≈2 cm). På nuværende tidspunkt brugte deltagerne ikke andre midler til mundhygiejne såsom mundskyl eller topisk fluorering. En detaljeret medicinsk og dental anamnese blev taget fra hver deltager. I et struktureret spørgeskema, skræddersyet til denne undersøgelse, gav alle deltagere svar på spørgsmål relateret til demografiske faktorer (alder, køn), personlige faktorer (generelt helbred, en brugt medicin, strålingseksponering), livsstil (rygning, alkoholforbrug) spisevaner og oral indtagelse. hygiejnevaner. Personer, der røg tre eller flere cigaretter om dagen i mindst et år, blev betragtet som rygere. De personer, der indtog to eller flere alkoholenheder tre eller flere gange om ugen, var ikke inkluderet i undersøgelsen, såvel som patienter med orale læsioner, malignitetshistorie og dem med aftagelig og fast protetik, ortodontiske apparater. Kriteriet for at udvælge deltagere var at være fuldstændig raske uden systemiske lidelser og sygdomme.

Prøveindsamling Prøver af bukkale epitelceller blev indsamlet fra hver deltager ved brug af vatpindsteknikken umiddelbart før brug af testet tandpasta og 30, 60, 90 og 120 dage efter begyndelsen af ​​forskningen (T0 - kontrol før brug af testet tandpasta , T1- 30 dage efter påbegyndelse af brugen af ​​ikke-fluortandpasta, T2 - 60 dage efter påbegyndelse af brugen af ​​ikke-fluorid tandpasta, T3 - 90 dage efter begyndelsen af ​​undersøgelsen, ved brug af fluortandpasta i 30 dage , T4 - 120 dage efter begyndelsen af ​​undersøgelsen, ved brug af fluortandpasta i 60 dage).

En time før prøveudtagningen blev deltagerne bedt om at afstå fra at ryge og indtage mad og drikkevarer. Efter skylning af mundhulen tre gange med lunkent vand for at fjerne eksfolierede celler, blev der taget en podepind ved forsigtigt at børste mundslimhinden bilateralt med en cytobørste (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Tyskland) og derefter blev prøverne påføres kodede laboratorieglas forvarmet ved 37 °C.

Mikronukleusassay i bukkale epitelceller Cellerne påført på mikroskopiske objektglas fik lov til at lufttørre og blev derefter fikseret i methanol (80 % v/v) ved 4°C i 20 minutter. Farvning blev udført med 5% Giemsa-opløsning i 10 minutter. Bagefter blev objektglassene skyllet med aqua destillat og lufttørret.

Analysen blev udført under et lysmikroskop Olympus CX40 (Olympus, Tokyo, Japan) med en 400x forstørrelse, og hver mikrokerne og andre nukleare anomalier blev desuden verificeret under 1000x forstørrelse. To replikatobjektglas blev fremstillet for hvert individ, og 1000 epitelceller pr. præparat blev bedømt for hver prøveudtagningstid.

Statistisk analyse Statistisk analyse blev udført ved at bruge SPSS softwarepakke (IBM Corp., Armonk, NY, USA). Ved deskriptiv statistisk analyse blev de grundlæggende statistiske parametre (middelværdi, standardfejl og standardafvigelse, og relativ standardafvigelse, median og minimums- og maksimumværdier) bestemt. Forskellene i antallet af mikrokerner og andre nukleare anomalier mellem forskellige prøveudtagningstider for hver gruppe og mellem grupperne af eksaminander blev testet ved ANOVA og Tukeys HSD post hoc test ved brug af en generel lineær modelprocedure. Generel regressionsmodel (GRM) fra lineær/ikke-lineær modelleringsmetode blev brugt til vurdering af indflydelsen af ​​prædiktorvariablerne (alder, køn og profession, brug af medicin, røntgeneksponering, kostvaner og livsstil) på afhængige variabler (mikronukleus, binukleerede celler, knækkede æg, nukleare knopper, pyknose, kondenseret kromatin, karyolyse og karyorrhexis). Resultaterne af GRM er udtrykt i form af Pareto-diagrammer med t-værdier. Et signifikansniveau blev sat til 0,05.