Daño citogenético en las células bucales causado por la pasta de dientes

El estudio incluyó a 40 participantes, estudiantes de Medicina Dental en la Facultad de Medicina de la Universidad de Split. Hubo un total de 12 hombres y 28 mujeres, con edades comprendidas entre 20 y 26 años (edad media 23,18 ± 1,48). Los sujetos se dividieron en dos grupos iguales, dependiendo de la combinación de la pasta de dientes utilizada.

En el primer grupo, Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, Reino Unido) y Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, Reino Unido) fueron las marcas de pasta dental utilizadas, mientras que en el segundo Plidenta 15 Seconds (Neva Ltd., Croacia) y Plidenta Sensitive (Neva Ltd., Croacia) ) (Tabla 1). Los participantes han usado pasta de dientes durante cuatro meses. Los dos primeros meses utilizaron pasta dental sin flúor, después de lo cual, durante los dos meses siguientes, utilizaron pasta dental con flúor del mismo fabricante y composición similar. Los tipos de pasta de dientes ensayados se aplicaron dos veces al día, por la mañana y por la noche, durante tres minutos en la cantidad de 1 g (≈2 cm). Los participantes contemporáneos no usaban otros agentes para la higiene bucal, como enjuague bucal o fluoración tópica. Se tomó una anamnesis médica y dental detallada de cada participante. En un cuestionario estructurado, adaptado a este estudio, todos los participantes proporcionaron respuestas a preguntas relacionadas con factores demográficos (edad, género), factores personales (salud general, medicación utilizada, exposición a la radiación), estilo de vida (tabaquismo, consumo de alcohol), hábitos alimenticios y hábitos orales. hábitos de higiene. Se consideraron fumadores los individuos que fumaban tres o más cigarrillos al día durante al menos un año. No se incluyeron en el estudio aquellos individuos que consumían dos o más unidades de alcohol por tres o más veces por semana, así como los pacientes con lesiones orales, antecedentes de malignidad y aquellos con prótesis removibles, fijas y aparatos de ortodoncia. El criterio de selección de los participantes fue estar completamente sanos, sin trastornos y enfermedades sistémicas.

Recolección de muestras Se recolectaron muestras de células epiteliales bucales de cada participante utilizando la técnica de hisopado inmediatamente antes del uso de la pasta de dientes probada y 30, 60, 90 y 120 días después del inicio de la investigación (T0 - control antes del uso de la pasta de dientes probada). , T1- 30 días después del inicio del uso de pasta dental sin flúor, T2 - 60 días después del inicio del uso de pasta dental sin flúor, T3 - 90 días después del inicio del estudio, utilizando pasta dental con flúor durante 30 días , T4 - 120 días después del inicio del estudio, utilizando pasta dental con flúor durante 60 días).

Una hora antes de la toma de muestras, se pidió a los participantes que se abstuvieran de fumar y de consumir alimentos y bebidas. Después de enjuagar la cavidad oral tres veces con agua tibia para eliminar las células exfoliadas, se tomó una muestra frotando suavemente la mucosa bucal bilateralmente con un citocepillo (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Alemania) y luego las muestras fueron aplicado a portaobjetos de vidrio de laboratorio codificados precalentados a 37 °C.

Ensayo de micronúcleos en células epiteliales bucales Las células aplicadas en portaobjetos de microscopio se dejaron secar al aire y luego se fijaron en metanol (80% v/v) a 4°C durante 20 minutos. La tinción se realizó con solución de Giemsa al 5% durante 10 minutos. Posteriormente, los portaobjetos se enjuagaron con agua destilada y se secaron al aire.

El análisis se realizó bajo un microscopio óptico Olympus CX40 (Olympus, Tokio, Japón) con un aumento de 400x, y cada micronúcleo y otras anomalías nucleares se verificaron adicionalmente con un aumento de 1000x. Se prepararon dos portaobjetos duplicados para cada sujeto y se puntuaron 1000 células epiteliales por preparación para cada tiempo de muestreo.

Análisis estadístico El análisis estadístico se realizó utilizando el paquete de software SPSS (IBM Corp., Armonk, NY, EE. UU.). Mediante análisis estadístico descriptivo se determinaron los parámetros estadísticos básicos (media, error estándar y desviación estándar y desviación estándar relativa, mediana y valores mínimo y máximo). Las diferencias en el número de micronúcleos y otras anomalías nucleares entre diferentes tiempos de muestreo para cada grupo y entre los grupos de examinados se probaron mediante ANOVA y la prueba post hoc HSD de Tukey utilizando un procedimiento de modelo lineal general. Se utilizó un modelo de regresión general (GRM) del método de modelado lineal/no lineal para evaluar la influencia de las variables predictoras (edad, género y profesión, uso de medicamentos, exposición a rayos X, hábitos dietéticos y estilo de vida) en las variables dependientes (micronúcleos, células binucleadas, huevos rotos, yemas nucleares, picnosis, cromatina condensada, cariolisis y cariorrexis). Los resultados de GRM se expresan en forma de diagramas de Pareto de valores t. Se fijó un nivel de significación de 0,05.