Цитогенетические повреждения буккальных клеток, вызванные зубной пастой

В исследование были включены 40 участников, студентов стоматологического факультета Медицинского факультета Университета Сплита. Всего было 12 мужчин и 28 женщин в возрасте от 20 до 26 лет (средний возраст 23,18 ± 1,48). Испытуемые были разделены на две равные группы в зависимости от комбинации используемой зубной пасты.

В первой группе использовались марки зубной пасты Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, Великобритания) и Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, Великобритания), а во второй — Pldenta 15 Seconds (Neva Ltd., Хорватия) и Pldenta Sensitive (Neva Ltd., Хорватия). ) (Таблица 1). Участники использовали зубную пасту в течение четырех месяцев. Первые два месяца они использовали зубную пасту, не содержащую фтора, после чего в течение следующих двух месяцев использовали зубную пасту, содержащую фтор, того же производителя и аналогичного состава. Исследуемые виды зубной пасты наносили два раза в день, утром и вечером, на три минуты в количестве 1 г (≈2 см). В то же время участники не использовали другие средства для гигиены полости рта, такие как жидкость для полоскания рта или местное фторирование. У каждого участника был собран подробный медицинский и стоматологический анамнез. В структурированном вопроснике, адаптированном для данного исследования, все участники дали ответы на вопросы, связанные с демографическими факторами (возраст, пол), личными факторами (общее состояние здоровья, принимаемые лекарства, радиационное облучение), образом жизни (курение, употребление алкоголя), привычками питания и состоянием полости рта. гигиенические привычки. Курильщиками считались лица, выкуривающие три и более сигарет в день в течение как минимум года. В исследование не включались лица, употреблявшие две и более единиц алкоголя три и более раз в неделю, а также пациенты с поражением полости рта, онкологическими заболеваниями в анамнезе, а также лица со съемными и несъемными протезами, ортодонтическими аппаратами. Критерием отбора участников было полное здоровье без системных нарушений и заболеваний.

Сбор образцов Образцы клеток буккального эпителия были взяты у каждого участника методом мазка непосредственно перед применением испытуемой зубной пасты и через 30, 60, 90 и 120 дней после начала исследования (Т0 - контроль до применения испытуемой зубной пасты). , Т1- 30 дней после начала использования нефторированной зубной пасты, Т2 - 60 дней после начала использования нефторированной зубной пасты, Т3 - 90 дней после начала исследования, использование фторированной зубной пасты в течение 30 дней , Т4 - через 120 дней после начала исследования, с использованием зубной пасты с фтором в течение 60 дней).

За час до отбора проб участников просили воздержаться от курения и употребления любых продуктов питания и напитков. После трехкратного полоскания ротовой полости прохладной водой для удаления отслоившихся клеток брали мазок, осторожно очищая слизистую оболочку щек с двух сторон цитощеткой (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Германия), а затем образцы наносят на кодированные лабораторные предметные стекла, предварительно нагретые до 37 °C.

Анализ микроядер в клетках буккального эпителия. Клетки, нанесенные на предметные стекла для микроскопии, высушивали на воздухе, а затем фиксировали в метаноле (80% об./об.) при 4°С в течение 20 минут. Окрашивание проводили 5% раствором Гимза в течение 10 минут. Затем предметные стекла промывали водным дистиллятом и сушили на воздухе.

Анализ проводили под световым микроскопом Olympus CX40 (Olympus, Токио, Япония) при увеличении 400х, а каждое микроядро и другие ядерные аномалии дополнительно верифицировали при увеличении 1000х. Для каждого испытуемого готовили два повторных предметных стекла, и 1000 клеток эпителия на препарат подсчитывали для каждого времени отбора проб.

Статистический анализ Статистический анализ был выполнен с использованием программного пакета SPSS (IBM Corp., Армонк, Нью-Йорк, США). Путем описательного статистического анализа были определены основные статистические параметры (среднее значение, стандартная ошибка и стандартное отклонение, относительное стандартное отклонение, медиана, минимальные и максимальные значения). Различия в количестве микроядер и других ядерных аномалиях между разными временами отбора проб для каждой группы и между группами испытуемых были проверены с помощью дисперсионного анализа и апостериорного теста Тьюки HSD с использованием общей процедуры линейной модели. Общая регрессионная модель (GRM) из метода линейного/нелинейного моделирования использовалась для оценки влияния переменных-предикторов (возраст, пол и профессия, использование лекарств, рентгеновское облучение, пищевые привычки и образ жизни) на зависимые переменные. (микронуклеус, двуядерные клетки, разбитые яйца, ядерные зачатки, пикноз, конденсированный хроматин, кариолизис и кариорексис). Результаты GRM выражаются в виде диаграмм Парето значений t. Уровень значимости был установлен на уровне 0,05.