Uszkodzenia cytogenetyczne w komórkach policzka spowodowane przez pastę do zębów

W badaniu wzięło udział 40 uczestników, studentów medycyny dentystycznej na Wydziale Lekarskim Uniwersytetu w Splicie. W sumie było 12 mężczyzn i 28 kobiet w wieku od 20 do 26 lat (średnia wieku 23,18 ± 1,48). Badanych podzielono na dwie równe grupy, w zależności od kombinacji użytej pasty do zębów.

W pierwszej grupie markami użytych past do zębów były Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, Wielka Brytania) i Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, Wielka Brytania), a w drugiej Plidenta 15 Seconds (Neva Ltd., Chorwacja) i Plidenta Sensitive (Neva Ltd., Chorwacja ) (Tabela 1). Uczestnicy używali pasty do zębów przez cztery miesiące. Przez pierwsze dwa miesiące stosowały pasty bezfluorkowe, a następnie przez kolejne dwa miesiące pasty zawierające fluor tego samego producenta i o podobnym składzie. Badane pasty stosowano dwa razy dziennie, rano i wieczorem, przez trzy minuty w ilości 1 g (≈2 cm). Współcześnie uczestnicy nie stosowali innych środków do higieny jamy ustnej, takich jak płyn do płukania jamy ustnej czy miejscowa fluoryzacja. Od każdego uczestnika zebrano szczegółowy wywiad lekarski i dentystyczny. W ustrukturyzowanym kwestionariuszu, dostosowanym do tego badania, wszyscy uczestnicy udzielili odpowiedzi na pytania związane z czynnikami demograficznymi (wiek, płeć), czynnikami osobistymi (ogólny stan zdrowia, stosowane leki, ekspozycja na promieniowanie), stylem życia (palenie tytoniu, spożywanie alkoholu), nawykami żywieniowymi i higieną jamy ustnej. nawyki higieniczne. Za palaczy uznano osoby, które paliły trzy lub więcej papierosów dziennie przez co najmniej rok. Do badania nie włączono osób, które spożywały dwie lub więcej jednostek alkoholu trzy lub więcej razy w tygodniu, a także pacjentów ze zmianami w jamie ustnej, nowotworami w wywiadzie oraz noszących protezy ruchome i stałe, aparaty ortodontyczne. Kryterium doboru uczestników miał być całkowicie zdrowy, bez zaburzeń i chorób ogólnoustrojowych.

Pobieranie próbek Próbki komórek nabłonka policzka pobrano od każdego uczestnika techniką wymazową bezpośrednio przed użyciem badanej pasty do zębów oraz po 30, 60, 90 i 120 dniach od rozpoczęcia badań (T0 – kontrola przed użyciem badanej pasty do zębów , T1 – 30 dni od rozpoczęcia stosowania pasty bez fluoru, T2 – 60 dni od rozpoczęcia stosowania pasty bez fluoru, T3 – 90 dni od rozpoczęcia badania, stosowanie pasty z fluorem przez 30 dni , T4 – 120 dni po rozpoczęciu badania, stosowanie pasty z fluorem przez 60 dni).

Na godzinę przed pobraniem próbek uczestnicy zostali poproszeni o powstrzymanie się od palenia i spożywania jakichkolwiek pokarmów i napojów. Po trzykrotnym przepłukaniu jamy ustnej letnią wodą w celu usunięcia złuszczonych komórek, pobrano wymaz poprzez delikatne dwustronne szczotkowanie błony śluzowej policzka cytoszczoteczką (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Niemcy), a następnie próbki naniesione na kodowane szkiełka laboratoryjne wstępnie ogrzane do temperatury 37 °C.

Test mikrojądrowy w komórkach nabłonka policzka Komórki naniesione na szkiełka mikroskopowe pozostawiono do wyschnięcia na powietrzu, a następnie utrwalono w metanolu (80% obj./obj.) w temperaturze 4°C przez 20 minut. Barwienie prowadzono 5% roztworem Giemsy przez 10 minut. Następnie szkiełka przepłukano wodnym destylatem i wysuszono na powietrzu.

Analizę przeprowadzono pod mikroskopem świetlnym Olympus CX40 (Olympus, Tokio, Japonia) przy powiększeniu 400×, a każde mikrojądro i inne anomalie jądrowe dodatkowo weryfikowano przy powiększeniu 1000×. Dla każdego osobnika przygotowano dwa powtórzenia szkiełek i dla każdego czasu pobierania oceniono 1000 komórek nabłonka na preparat.

Analiza statystyczna Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu pakietu oprogramowania SPSS (IBM Corp., Armonk, NY, USA). Za pomocą opisowej analizy statystycznej określono podstawowe parametry statystyczne (średnia, błąd standardowy i odchylenie standardowe oraz względne odchylenie standardowe, mediana oraz wartości minimalne i maksymalne). Różnice w liczbie mikrojąder i innych anomalii jądrowych między różnymi czasami pobierania próbek dla każdej grupy i między grupami badanych zbadano za pomocą testu post hoc ANOVA i HSD Tukeya, stosując ogólną procedurę modelu liniowego. Ogólny model regresji (GRM) z metody modelowania liniowego/nieliniowego wykorzystano do oceny wpływu zmiennych predykcyjnych (wiek, płeć i zawód, stosowanie leków, ekspozycja na promieniowanie rentgenowskie, nawyki żywieniowe i styl życia) na zmienne zależne (mikrojądro, komórki dwujądrzaste, rozbite jaja, pąki jądrowe, piknoza, skondensowana chromatyna, karioliza i karioreksja). Wyniki GRM wyrażono w postaci wykresów Pareto wartości t. Poziom istotności ustalono na 0,05.