Danos citogenéticos em células bucais causados ​​por creme dental

O estudo incluiu 40 participantes, estudantes de Medicina Dentária da Faculdade de Medicina da Universidade de Split. Havia um total de 12 homens e 28 mulheres, com idades entre 20 e 26 anos (média de idade 23,18 ± 1,48). Os indivíduos foram divididos em dois grupos iguais, dependendo da combinação do creme dental usado.

No primeiro grupo, Sensodyne Classic (GlaxoSmithKline, Reino Unido) e Sensodyne Fluor (GlaxoSmithKline, Reino Unido) foram as marcas de creme dental utilizadas, enquanto no segundo Plidenta 15 Seconds (Neva Ltd., Croácia) e Plidenta Sensitive (Neva Ltd., Croácia ) (Tabela 1). Os participantes usaram creme dental por quatro meses. Nos dois primeiros meses usaram creme dental sem flúor, após o que, nos dois meses seguintes, usaram creme dental contendo flúor do mesmo fabricante e composição semelhante. Os cremes dentais testados foram aplicados duas vezes ao dia, pela manhã e à noite, por três minutos na quantidade de 1 g (≈2 cm). Contemporâneos, os participantes não faziam uso de outros agentes para higiene bucal, como bochechos ou fluoretação tópica. Foi feita uma anamnese médica e odontológica detalhada de cada participante. Em um questionário estruturado, adaptado para este estudo, todos os participantes forneceram respostas a questões relacionadas a fatores demográficos (idade, sexo), fatores pessoais (saúde geral, medicamento usado, exposição à radiação), estilo de vida (tabagismo, consumo de álcool), hábitos alimentares e hábitos orais hábitos de higiene. Foram considerados fumantes os indivíduos que fumavam três ou mais cigarros por dia há pelo menos um ano. Não foram incluídos no estudo aqueles indivíduos que consumiam duas ou mais unidades alcoólicas por três ou mais vezes por semana, bem como pacientes com lesões bucais, história de malignidade, e aqueles com próteses removíveis e fixas, aparelhos ortodônticos. O critério de seleção dos participantes foi ser completamente saudável, sem distúrbios e doenças sistêmicas.

Coleta de amostras Amostras de células epiteliais bucais foram coletadas de cada participante por meio da técnica de swab imediatamente antes do uso do dentifrício testado e 30, 60, 90 e 120 dias após o início da pesquisa (T0 - controle antes do uso do dentifrício testado , T1- 30 dias após o início do uso de creme dental sem flúor, T2 - 60 dias após o início do uso de creme dental sem flúor, T3 - 90 dias após o início do estudo, usando creme dental com flúor por 30 dias , T4 - 120 dias após o início do estudo, usando creme dental com flúor por 60 dias).

Uma hora antes da amostragem, foi solicitado aos participantes que se abstivessem de fumar e consumir qualquer alimento e bebida. Após enxaguar a cavidade oral por três vezes com água morna para remover as células esfoliadas, uma zaragatoa foi feita escovando suavemente a mucosa bucal bilateralmente com uma escova Cytobrush (Cytobrush Plus, GmbH, Dietramszell-Linden, Alemanha) e, em seguida, as amostras foram aplicado a lâminas de vidro de laboratório codificadas pré-aquecidas a 37 °C.

Ensaio de micronúcleo em células epiteliais bucais As células aplicadas em lâminas microscópicas foram deixadas secar ao ar e depois fixadas em metanol (80% v/v) a 4°C por 20 minutos. A coloração foi realizada com solução de Giemsa 5% por 10 minutos. Em seguida, as lâminas foram lavadas com água destilada e secas ao ar.

A análise foi feita em microscópio de luz Olympus CX40 (Olympus, Tóquio, Japão) com aumento de 400×, e cada micronúcleo e outras anomalias nucleares foram verificados adicionalmente com aumento de 1000×. Duas lâminas replicadas foram preparadas para cada sujeito, e 1000 células epiteliais por preparação foram pontuadas para cada tempo de amostragem.

Análise estatística A análise estatística foi feita usando o pacote de software SPSS (IBM Corp., Armonk, NY, EUA). Pela análise estatística descritiva, foram determinados os parâmetros estatísticos básicos (média, erro padrão e desvio padrão, desvio padrão relativo, mediana e valores mínimos e máximos). As diferenças no número de micronúcleos e outras anomalias nucleares entre diferentes tempos de amostragem para cada grupo e entre os grupos de examinados foram testadas por ANOVA e teste post hoc HSD de Tukey usando um procedimento de modelo linear geral. O modelo de regressão geral (GRM) do método de modelagem linear/não linear foi usado para avaliar a influência das variáveis ​​preditoras (idade, sexo e profissão, uso de medicamentos, exposição aos raios X, hábitos alimentares e estilo de vida) sobre as variáveis ​​dependentes (micronúcleo, células binucleadas, ovos quebrados, gemas nucleares, picnose, cromatina condensada, cariólise e cariorrexe). Os resultados do GRM são expressos na forma de gráficos de Pareto de valores t. Foi estabelecido nível de significância de 0,05.