COVID-Serologie bij reumatoïde artritis (COVID-19) (COVID-SERA)

Reumatoïde artritis (RA) is de meest voorkomende inflammatoire reuma en treft 0,5% tot 1% van de Europese bevolking. Gekenmerkt door symmetrische en distale erosieve polyartritis, is de diagnose gebaseerd op de associatie van de klinische beoordeling in combinatie met de aanwezigheid van een chronisch biologisch inflammatoir syndroom en van gecitrullineerde cyclische antipeptide-antilichamen (CCP) en / of reumafactor. Vanuit een prognostisch oogpunt laten sommige factoren de risicovoorspelling toe van de progressie naar structurele schade (boterosie), zoals de positiviteit van de reumafactor of anti-CCP-antilichamen, en vereisen ze de snelle introductie van basale immunosuppressieve therapie of biotherapie. In de context van de SARS-CoV-2-pandemie, verantwoordelijk voor de ziekte COVID-19, is het belang van een serologische test vanuit epidemiologisch oogpunt essentieel om de evolutie van de pandemie te volgen en de strategie van opheffing van de algemene bevolking of van risicopatiënten. RA-patiënten die biotherapie krijgen, lopen echter een verhoogd risico op infectie. In deze context van de-confinement zou een serologische analyse van SARS-CoV-2 nuttig zijn, voordat de toekomstige behandeling van RA-patiënten wordt gestart of om hun huidige behandeling aan te passen.

Detectie van antilichamen gericht tegen SARS-CoV-2 door verschillende detectiekits wordt momenteel geëvalueerd. Bij het gebrek aan serologische testkits op de Franse markt komt de complexiteit van het verifiëren van de gevoeligheid en specificiteit van deze tests. Aan de andere kant is de immuunrespons op SARS-CoV-2 complex en nog vrij onbekend. De gelijktijdige aanwezigheid van verschillende isotypes IgA, IgM en IgG wordt vaak waargenomen. De isotypische omschakeling van Ig lijkt dus niet correct plaats te vinden in dit ziektegeval, wat de uitvoering van de serodiagnostiek nog ingewikkelder maakt. Detectie van de minder specifieke IgM's zou daarom essentieel zijn, in het geval van SARS-CoV-2. Reumafactor (RF) is een immunoglobuline (Ig), vaker van het M-type, gericht tegen het Fc-fragment van IgG. Hoewel dit antilichaam niet direct pathogeen is, is het zeer frequent aanwezig bij RA-patiënten (70 tot 80%), zonder specifiek te zijn voor deze pathologie aangezien het ook kan worden waargenomen bij andere auto-immuun-, infectie- of hematologische ziekten. De aanwezigheid van RF-IgM, des te meer in hoge titers, is problematisch bij het uitvoeren van veel serologische of immunologische assays, aangezien deze hoge niveaus verantwoordelijk kunnen zijn voor fout-positieve resultaten.

Tijdens eerdere SARS-epidemieën (SARS-CoV-1 of MERS-CoV) werden fout-positieve resultaten van serologische tests waargenomen. Bij het detecteren van anti-SARS-CoV-1 IgG of IgM bij patiënten die geen SARS hadden opgelopen, was het gebruik van een ELISA-kit, met platen gecoat met een cellysaat van Vero-E6-cellen geïnfecteerd met SARS-CoV-1, aangetoond om een ​​laag aantal fout-positieve resultaten te veroorzaken bij gezonde controles (minder dan 5%). Het aantal fout-positieve resultaten bij patiënten met auto-immuunziekten was echter veel hoger en varieerde dienovereenkomstig met de pathologie (tussen 10% en 58%), waarbij het grootste aantal fout-positieve resultaten werd verkregen bij lupuspatiënten. Dit fenomeen kan worden verklaard door het gebruik van een immuuntest met ongezuiverde cellysaten, die antigenen bevatten waartegen de in het serum van de patiënt aanwezige auto-antilichamen kunnen reageren, waardoor de uitkomst van de test wordt vertekend. Er zijn andere oorzaken van een toename van het percentage fout-positieve resultaten beschreven bij het uitvoeren van SARS-CoV-1-serologieën, zoals de aanwezigheid van actieve neoplasie of vanwege een eerdere infectie met een ander coronavirus. Andere coronavirussen, zoals HCoV-OC43 en HCoV-229E, vertonen inderdaad een nucleocapside die dicht bij die van SARS-CoV-1 ligt: ​​deze gelijkenis kan de bron zijn van kruisreactiviteit. Hetzelfde fenomeen werd waargenomen bij het nieuwste coronavirus: daarom werd voorgesteld om liever recombinante antigenen van SARS-CoV-2 te gebruiken in immunoassays, zoals bijvoorbeeld ELISA. Gezien de gelijkenis tussen SARS-CoV1 en SARS-CoV2, is het waarschijnlijk dat de verschillende elementen die fout-positieve resultaten veroorzaken tijdens serologische tests voor SARS-CoV-1, met name de aanwezigheid van auto-antilichamen, waaronder RF, kunnen ook fout-positieve resultaten veroorzaken bij het uitvoeren van serologische tests gericht op SARS-CoV-2. Een recent Chinees onderzoek toonde aan dat een matige of hoge mate van RF geassocieerd was met een aanzienlijk aantal fout-positieve resultaten bij het zoeken naar anti-SARS-CoV-2 IgM met een ELISA-kit, welke platen echter waren gecoat met recombinant antigeen. De auteurs stelden daarom voor om een ​​ureumdissociatiestap in het ELISA-protocol op te nemen, wat de specificiteit van de test leek te verbeteren, zonder de gevoeligheid ervan te veranderen.

Het lijkt dus essentieel om de invloed van RF, voor zijn verschillende isotypes (IgG, IgM, IgA), op verschillende serologische tests voor SARS-CoV-2 die in Frankrijk beschikbaar zijn, te beoordelen om de specificiteit van deze tests beter te kunnen beoordelen.

De onderzoekers stellen voor om 3 verschillende serologische tests die beschikbaar zijn voor de detectie van specifieke SARS-CoV-2 IgG en IgM te evalueren en te vergelijken. Het percentage vals-positieve resultaten dat voor elk type test wordt verkregen, zal worden geëvalueerd op sera die afkomstig zijn van patiënten met RA die nooit in contact zijn geweest met SARS-CoV-2, aangezien deze sera vóór juli 2019 zijn teruggetrokken. De relatie tussen de incidentie van fout-positieve resultaten van SARS-Cov-2-serologische assays en de niveaus van RF-antilichamen kon worden geschat, evenals de karakterisering van RF.