COVID-SERologie u revmatoidní artritidy (COVID-19) (COVID-SERA)

Revmatoidní artritida (RA) je nejčastějším zánětlivým revmatismem, který postihuje 0,5 % až 1 % evropské populace. Vyznačuje se symetrickou a distální erozivní polyartritidou a její diagnóza je založena na spojení klinického vyšetření kombinovaného s přítomností chronického biologického zánětlivého syndromu a citrulinovaných cyklických antipeptidových protilátek (CCP) a/nebo revmatoidního faktoru. Některé faktory z prognostického hlediska umožňují rizikovou predikci progrese ke strukturálnímu poškození (eroze kosti), např. pozitivita revmatoidního faktoru nebo anti-CCP protilátek, a vyžadují rychlé zavedení základní imunosupresivní terapie nebo bioterapie. V souvislosti s pandemií SARS-CoV-2, která je odpovědná za onemocnění COVID-19, je zájem o sérologický test zásadní z epidemiologického hlediska, aby bylo možné sledovat vývoj pandemie a přizpůsobit strategii zbavení svobody běžné populace nebo ohrožených pacientů. Pacienti s RA, kteří dostávají bioterapii, však představují zvýšené riziko infekce. V tomto kontextu de-confinementu by byla užitečná sérologická analýza SARS-CoV-2 před zahájením budoucí léčby pacientů s RA nebo za účelem přizpůsobení jejich současné léčby.

Detekce protilátek namířených proti SARS-CoV-2 různými detekčními soupravami je v současné době ve fázi hodnocení. K nedostatku sérologických testovacích souprav na francouzském trhu se přidává složitost ověřování senzitivity a specificity těchto testů. Na druhou stranu imunitní odpověď na SARS-CoV-2 je složitá a stále docela neznámá. Často je pozorována současná přítomnost několika izotypů IgA, IgM a IgG. Zdá se tedy, že izotypové přepínání Ig neprobíhá v tomto případě onemocnění správně, což znamená, že provedení sérodiagnostiky je ještě složitější. Detekce méně specifických IgM by proto byla v případě SARS-CoV-2 zásadní. Revmatoidní faktor (RF) je imunoglobulin (Ig), častěji typu M, namířený proti Fc fragmentu IgG. Tato protilátka, i když není přímo patogenní, je velmi často přítomna u pacientů s RA (70 až 80 %), aniž by byla specifická pro tuto patologii, protože ji lze pozorovat i u jiných autoimunitních, infekčních nebo hematologických onemocnění. Přítomnost RF IgM, tím spíše ve vysokých titrech, je problematická při provádění mnoha sérologických nebo imunologických testů, protože tyto vysoké hladiny mohou být zodpovědné za falešně pozitivní výsledky.

Během předchozích epidemií SARS (SARS-CoV-1 nebo MERS-CoV) byly pozorovány falešně pozitivní výsledky sérologických testů. Při detekci IgG nebo IgM proti SARS-CoV-1 u pacientů, kteří neprodělali SARS, bylo prokázáno použití soupravy ELISA s destičkami potaženými buněčným lyzátem buněk Vero-E6 infikovaných SARS-CoV-1. k vyvolání nízkého počtu falešně pozitivních výsledků u zdravých kontrol (méně než 5 %). Počet falešně pozitivních výsledků u pacientů s autoimunitními chorobami byl však mnohem vyšší a měnil se podle patologie (mezi 10 % a 58 %), přičemž největší počet falešně pozitivních výsledků byl získán u pacientů s lupusem. Tento jev lze vysvětlit použitím imunitního testu s použitím nečištěných buněčných lyzátů, které obsahují antigeny, proti kterým by autoprotilátky přítomné v séru pacienta mohly reagovat a zkreslit tak výsledek testu. Při provádění sérologií SARS-CoV-1 byly popsány další příčiny zvýšení četnosti falešně pozitivních výsledků, jako je přítomnost aktivní neoplazie nebo kvůli předchozí infekci jiným koronavirem. Jiné koronaviry, jako HCoV-OC43 a HCoV-229E, skutečně vykazují nukleokapsidu blízkou nukleokapsidu SARS-CoV-1: tato podobnost může být zdrojem zkřížené reaktivity. Stejný jev byl pozorován u nejnovějšího koronaviru: proto bylo navrženo spíše použít rekombinantní antigeny SARS-CoV-2 v imunotestech, jako je například ELISA. Vzhledem k podobnosti mezi SARS-CoV1 a SARS-CoV2 je pravděpodobné, že různé prvky způsobující falešně pozitivní výsledky během sérologických testů na SARS-CoV-1, zejména přítomnost autoprotilátek včetně RF, by také mohly způsobit falešně pozitivní výsledky při provádění sérologických testů zaměřených na SARS-CoV-2. Nedávná čínská studie ukázala, že střední nebo vysoká míra RF byla spojena s významnou mírou falešně pozitivních výsledků při hledání anti-SARS-CoV-2 IgM pomocí soupravy ELISA, přičemž destičky byly potaženy rekombinantním antigenem. Autoři proto navrhli zahrnout do protokolu ELISA krok disociace močoviny, což zřejmě zlepšilo specifitu testu, aniž by se změnila jeho citlivost.

Zdá se tedy zásadní posoudit vliv RF pro jeho různé izotypy (IgG, IgM, IgA) na různé sérologické testy na SARS-CoV-2 dostupné ve Francii, aby bylo možné lépe posoudit specifičnost těchto testů.

Vyšetřovatelé navrhují vyhodnotit a porovnat 3 různé sérologické testy dostupné pro detekci specifických IgG a IgM SARS-CoV-2. Míra falešně pozitivních výsledků získaných pro každý typ testu bude hodnocena na sérech pocházejících od pacientů s RA, kteří nikdy nebyli v kontaktu se SARS-CoV-2, protože tato séra byla stažena před červencem 2019. Vztah mezi výskytem falešně pozitivních výsledků sérologických testů SARS-Cov-2 a hladinami protilátek proti RF lze odhadnout, stejně jako charakterizaci RF.