COVID-SERologia nell'artrite reumatoide (COVID-19) (COVID-SERA)

L'artrite reumatoide (RA) è il reumatismo infiammatorio più comune, che colpisce dallo 0,5% all'1% della popolazione europea. Caratterizzata da poliartrite erosiva simmetrica e distale, la sua diagnosi si basa sull'associazione della valutazione clinica unita alla presenza di una sindrome infiammatoria biologica cronica e di anticorpi antipeptidi ciclici citrullinati (CCP) e/o di fattore reumatoide. Dal punto di vista prognostico, alcuni fattori consentono la previsione del rischio di progressione verso il danno strutturale (erosione ossea), come la positività del fattore reumatoide o degli anticorpi anti-CCP, e richiedono la rapida introduzione della terapia immunosoppressiva di base o della bioterapia. Nel contesto della pandemia di SARS-CoV-2, responsabile della malattia COVID-19, l'interesse di un test sierologico è essenziale da un punto di vista epidemiologico per seguire l'evoluzione della pandemia e per adattare la strategia di de-confinamento della popolazione generale o dei pazienti a rischio. Tuttavia, i pazienti affetti da AR sottoposti a bioterapia presentano un aumentato rischio di infezione. In questo contesto di de-confinamento, sarebbe utile un'analisi sierologica SARS-CoV-2, prima di iniziare il trattamento futuro dei pazienti affetti da AR o per adattare il loro trattamento attuale.

Il rilevamento di anticorpi diretti contro SARS-CoV-2 mediante vari kit di rilevamento è attualmente in fase di valutazione. Alla mancanza di kit di test sierologici sul mercato francese si aggiunge la complessità di verificare la sensibilità e la specificità di questi test. D'altra parte, la risposta immunitaria al SARS-CoV-2 è complessa e ancora abbastanza sconosciuta. Si osserva frequentemente la presenza concomitante di diversi isotipi IgA, IgM e IgG. Pertanto, lo switching isotipico delle Ig non sembra avvenire correttamente in questo caso di malattia, il che rende la sierodiagnostica ancora più complicata da implementare. Il rilevamento delle IgM meno specifiche sarebbe quindi essenziale, nel caso di SARS-CoV-2. Il fattore reumatoide (RF) è un'immunoglobulina (Ig), più spesso di tipo M, diretta contro il frammento Fc di IgG. Questo anticorpo, pur non essendo direttamente patogeno, è molto frequente nei pazienti affetti da AR (dal 70 all'80%), senza essere specifico per questa patologia in quanto può essere osservato anche in altre malattie autoimmuni, infettive o ematologiche. La presenza di RF IgM, tanto più in titoli elevati, è problematica durante l'esecuzione di molti test sierologici o immunologici poiché questi livelli elevati possono essere responsabili di risultati falsi positivi.

Durante precedenti epidemie di SARS (SARS-CoV-1 o MERS-CoV), sono stati osservati risultati falsi positivi dei test sierologici. Durante la rilevazione di IgG o IgM anti-SARS-CoV-1 in pazienti che non avevano contratto la SARS, era stato dimostrato l'uso di un kit ELISA, con piastre rivestite con un lisato cellulare di cellule Vero-E6 infette da SARS-CoV-1 per indurre un basso numero di risultati falsi positivi nei controlli sani (meno del 5%). Tuttavia, il numero di risultati falsi positivi nei pazienti con malattie autoimmuni era molto più alto e variava in base alla patologia (tra il 10% e il 58%), il maggior numero di risultati falsi positivi si otteneva nei pazienti affetti da lupus. Questo fenomeno può essere spiegato con l'utilizzo di un test immunitario che utilizza lisati cellulari non purificati, che contengono antigeni contro i quali potrebbero reagire gli autoanticorpi presenti nel siero del paziente, falsando così l'esito del test. Altre cause di aumento del tasso di risultati falsi positivi sono state descritte durante l'esecuzione di sierologie SARS-CoV-1, come la presenza di neoplasia attiva o a causa di una precedente infezione con un altro coronavirus. Infatti, altri coronavirus, come HCoV-OC43 e HCoV-229E, mostrano un nucleocapside vicino a quello di SARS-CoV-1: questa somiglianza può essere fonte di cross-reattività. Lo stesso fenomeno è stato osservato con l'ultimo coronavirus: è stato quindi suggerito di utilizzare piuttosto antigeni ricombinanti di SARS-CoV-2 nei test immunologici, come ELISA per esempio Data la somiglianza tra SARS-CoV1 e SARS-CoV2, è probabile che il vari elementi che causano risultati falsi positivi durante i test sierologici per SARS-CoV-1, in particolare la presenza di autoanticorpi tra cui RF, potrebbero anche causare risultati falsi positivi durante l'esecuzione di test sierologici mirati a SARS-CoV-2. Un recente studio cinese ha mostrato che un tasso moderato o alto di RF era associato a un tasso significativo di risultati falsi positivi durante la ricerca di IgM anti-SARS-CoV-2 con un kit ELISA, le cui piastre erano tuttavia rivestite con antigene ricombinante. Gli autori hanno quindi proposto di includere una fase di dissociazione dell'urea nel protocollo ELISA, che sembrava migliorare la specificità del test, senza alterarne la sensibilità.

Appare quindi essenziale valutare l'influenza della RF, per i suoi diversi isotipi (IgG, IgM, IgA), su vari test sierologici per SARS-CoV-2 disponibili in Francia, al fine di valutare meglio la specificità di questi test.

I ricercatori propongono di valutare e confrontare 3 diversi test sierologici disponibili per il rilevamento di IgG e IgM specifiche per SARS-CoV-2. Il tasso di risultati falsi positivi ottenuti per ogni tipo di test sarà valutato su sieri originati da pazienti con AR che non sono mai stati in contatto con SARS-CoV-2, poiché questi sieri sono stati ritirati prima di luglio 2019. È stato possibile stimare la relazione tra l'incidenza dei risultati falsi positivi dei test sierologici SARS-Cov-2 e i livelli di anticorpi RF, nonché la caratterizzazione della RF.